【正文】 愈傷組織。(2) 分裂期: 外植體切口邊緣開始膨大，外層細(xì)胞通過一分為二的方式進(jìn)行分裂，從而形成一團(tuán)具有分生組織狀態(tài)細(xì)胞的過程。(3) 形成期: 外植體的細(xì)胞經(jīng)過誘導(dǎo)，分裂形成了具有無序結(jié)構(gòu)的愈傷組織時(shí)期植株再生的兩個(gè)途徑及其比較（這里不太確定，你們可以看看課件）植株再生的兩種途徑：器官發(fā)生(organogenesis)和體細(xì)胞胚胎發(fā)生(somatic embryogenesis) 體細(xì)胞胚胎發(fā)生：在離體培養(yǎng)條件下，植物體細(xì)胞形成胚性細(xì)胞，然后經(jīng)過一系列形態(tài)學(xué)及生物化學(xué)的變化形成類似合子胚結(jié)構(gòu)的過程。體細(xì)胞胚是一個(gè)二極結(jié)構(gòu)，不物理地附著于原組織，每一個(gè)體細(xì)胞胚稱為胚狀體，它可以同合子胚一樣發(fā)育成植株。器官發(fā)生：是指培養(yǎng)條件下的組織或細(xì)胞團(tuán)（愈傷組織）分化形成不定根（adventitious roots）、不定芽（adventitious shoots）等器官的過程 。 兩種形態(tài)發(fā)生的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)胚狀體途徑形成的植株細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)方向相反的兩極分化，具有根端和芽端兩個(gè)分生中心不定胚維管組織與外植體維管組織不相連具有典型的胚胎形態(tài)發(fā)生過程形成的幼苗具有子葉胚狀體發(fā)育的苗，根和芽齊全器官途徑形成的植株單向極性，單個(gè)分生中心直接分化為器官不定芽和不定根與愈傷組織的維管相連,無胚胎形態(tài)不定芽的苗無子葉先長(zhǎng)芽后長(zhǎng)根，或先長(zhǎng)根后長(zhǎng)芽 影響器官發(fā)生的因素（1）化學(xué)因素? 早期煙草組織的研究，器官發(fā)生的表達(dá)可被外源化學(xué)物質(zhì)控制– 高濃度的生長(zhǎng)素和低濃度的分裂素可以促使細(xì)胞連續(xù)繁殖——無組織的生長(zhǎng)– 高濃度的分裂素能引起莖芽（shootbud）形成? auxion/cytokinin之比值的變化成為特定的器官、根或芽分化的一個(gè)參數(shù)– 生長(zhǎng)素促進(jìn)根分化，分裂素促進(jìn)芽分化– 生長(zhǎng)素與根形成有關(guān)，同時(shí)對(duì)于愈傷組織的保持也是必須的– 在促進(jìn)芽的分化中，BAP （芐氨基嘌呤）是最有效的（2）物理因素? 光：– 很多光照條件下，一些植物均能進(jìn)行器官發(fā)生，說明光周期并不是非常重要的因子– 有的植物在光、暗交替條件下才能形成芽，而在連續(xù)光照下則不能– 盡管如此，多數(shù)植物需要一個(gè)穩(wěn)定的光周期，多數(shù)培養(yǎng)條件是1416h光照，810h黑暗? 溫度：不同植物不一樣，需要摸索，如煙草和棉花就不一樣影響胚狀體發(fā)生和發(fā)育的因素1影響胚狀體發(fā)生和發(fā)育的外部條件①.植物激素胡蘿卜胚狀體的發(fā)生可分為兩個(gè)階段外植體細(xì)胞的脫分化、愈傷組織的誘導(dǎo)、胚性細(xì)胞或細(xì)胞團(tuán)的形成，培養(yǎng)基必須含有生長(zhǎng)素類物質(zhì)，主要是2，4D胚狀體的形成和發(fā)育，必須在降低2，4D濃度或完全去除2，4D的培養(yǎng)基上才能進(jìn)行其它生長(zhǎng)素如IAA、NAA、NOA、2，4，5T等的作用與2，4D大致相同，但誘導(dǎo)的效果和對(duì)胚狀體形成的抑制作用不完全一致絕大多數(shù)植物均屬于這一模式，但不同的植物在含生長(zhǎng)素時(shí)胚狀體發(fā)育時(shí)期不一樣，有的只能產(chǎn)生胚性愈傷，有的可達(dá)圓球胚，有的可達(dá)魚雷胚，個(gè)別植物可發(fā)育到成熟胚這些不同發(fā)育程度的胚狀體都必須在轉(zhuǎn)移到無生長(zhǎng)素或生長(zhǎng)素含量很低的培養(yǎng)基上以后才能繼續(xù)發(fā)育和成株 不僅沒有誘導(dǎo)的作用(單獨(dú)使用不能誘導(dǎo)愈傷),而且對(duì)已完成誘導(dǎo)的愈傷組織中胚狀體的發(fā)生還有抑制作用。但在除去，胚狀體發(fā)生能力還可能部分地恢復(fù)。 一般ABA、GA抑制胚狀體發(fā)育，但有人認(rèn)為，ABA對(duì)柑桔的胚狀體發(fā)生有明顯的促進(jìn)作用②含氮化合物 NH4+與NO3的作用不同 NH4+/NO3的比例 氨基酸、酰胺等有機(jī)氮③其它外部因素離子濃度、逆境脅迫、懸浮培養(yǎng)等2影響胚狀體發(fā)生和發(fā)育的內(nèi)部因素 ① 植株基因型的影響培養(yǎng)個(gè)體的遺傳基礎(chǔ)決定了離體培養(yǎng)的反應(yīng)能力不同種的植物甚至同種植物的不同品種(或不同地理來源)個(gè)體之間，其個(gè)體基因型存在著差異，這就決定了不同的體細(xì)胞胚胎發(fā)生能力②生理上的隔離 細(xì)胞與其周圍組織之間生理上的隔離是其進(jìn)行胚狀體發(fā)生的先決條件。③外植體的年齡(生理狀態(tài))與來源少數(shù)植物如胡蘿卜，幾乎所有的器官都可誘導(dǎo) 產(chǎn)生胚狀體大多數(shù)植物，在目前只有一定發(fā)育時(shí)期的某些器官可產(chǎn)生胚狀體一般以幼嫰組織作外植體較易誘導(dǎo)胚狀體④培養(yǎng)時(shí)間和細(xì)胞倍性變化的影響一般由初分離或誘導(dǎo)的或僅經(jīng)過短時(shí)期培養(yǎng)的愈傷組織，最易產(chǎn)生胚狀體隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)，形成胚狀體的能力下降以至完全消失培養(yǎng)細(xì)胞倍性的變化可能對(duì)胚狀體的形成有一定影響⑤內(nèi)源激素水平的變化 外源生長(zhǎng)素對(duì)體細(xì)胞胚產(chǎn)生和發(fā)育的調(diào)控是通過調(diào)節(jié)內(nèi)源激素的合成、代謝、極性運(yùn)輸和平衡而起作用的第四章體細(xì)胞無性系變異：體細(xì)胞培養(yǎng)的任何階段所產(chǎn)生的變異（細(xì)胞，原生質(zhì)體，愈傷組織，再生植株等）統(tǒng)稱為體細(xì)胞無性系變異體細(xì)胞無性系變異的特點(diǎn)變異廣泛 包括數(shù)量性狀、質(zhì)量性狀、染色體數(shù)目和結(jié)構(gòu)變異，DNA擴(kuò)增和減少，生化特性變化等，以數(shù)量性狀變異為主 變異頻率高 棉花體細(xì)胞培養(yǎng)獲得的每一個(gè)再生植株幾乎都存在一定程度的變異。后代穩(wěn)定快 一般無性系二代就可獲得穩(wěn)定株系，這是優(yōu)良性狀選擇的關(guān)鍵時(shí)期，從而大大地縮短育種年限潛在的隱性性狀和顯性性狀的活化 在無性系變異后代不但出現(xiàn)顯性性狀的改變，常出現(xiàn)一些供體植株所沒有的隱性性狀的變異如雄性不育、矮桿等起點(diǎn)高，效率高 選用現(xiàn)行最好的品種（系），作為起始材料，一旦選育出就能超過現(xiàn)有的品種，不需要多年的適應(yīng)性試驗(yàn)體細(xì)胞無性系變異的應(yīng)用（這是在育種中的應(yīng)用）一、直接利用體細(xì)胞變異材料二、利用誘變技術(shù)或進(jìn)行定向選擇獲得體細(xì)胞變異材料三、體細(xì)胞突變體的應(yīng)用當(dāng)前在農(nóng)業(yè)上，體細(xì)胞突變體篩選技術(shù)研究主要集中在抗病、 抗鹽、抗除草劑、抗低溫、高溫等逆境脅迫的突變體篩選。另外，在提高作物營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)（如蛋白質(zhì)、賴氨酸等）改變作物品質(zhì)方面也取得了一定進(jìn)展。體細(xì)胞無性系變異育種應(yīng)用中存在一些不足: 產(chǎn)生的變異多，變異類型復(fù)雜，并非所有的變異都可以穩(wěn)定遺傳，離體選擇只對(duì)那些在離體培養(yǎng)和移栽到大田環(huán)境都表現(xiàn)的表型變異有效，即能在后代穩(wěn)定表達(dá)和遺傳； 變異方向難以控制，難以預(yù)測(cè)，負(fù)向變異多，或有一個(gè)性狀表現(xiàn)優(yōu)良，但其它方面則呈現(xiàn)負(fù)向，變異并非都是新的變異； 篩選出的突變性狀隨著代數(shù)的增加，存在逐漸喪失抗性的趨勢(shì)；同時(shí)一些抗性突變體的篩選與豐產(chǎn)性之間存在一定的矛盾；植物細(xì)胞群體和微生物相比，除原生質(zhì)體外，難以像微生物那樣獲得完全是單細(xì)胞的群體；在離體培養(yǎng)時(shí)增殖速率遠(yuǎn)低于微生物，且多次繼代后特別是經(jīng)過相應(yīng)因子篩選，很快喪失分化能力； 無性系變異選擇并非對(duì)所有的作物都有效，更適應(yīng)于營(yíng)養(yǎng)繁殖作物。第五章原生質(zhì)體：指采用機(jī)械或酶解法去掉細(xì)胞壁的裸露細(xì)胞 由于沒有細(xì)胞壁，原生質(zhì)體為作物遺傳改良和植物學(xué)研究提供了極為有利的試驗(yàn)材料。原生質(zhì)體分離方法原生質(zhì)體分離的最基本原則是保證原生質(zhì)體不受傷害及不損害它的再生能力一、分離方法機(jī)械法分離質(zhì)壁分離細(xì)胞 缺點(diǎn)：產(chǎn)量極低；應(yīng)用的材料受限制；操作極費(fèi)力酶法分離216。 酶法可在短時(shí)間內(nèi)獲得大量原生質(zhì)體216。 分為直接法和順序法兩種216。 缺點(diǎn)是：不純的酶制劑所含雜質(zhì)對(duì)原生質(zhì)體可能有不同程度的毒害作用原生質(zhì)體融合的意義（應(yīng)用找不到）216。 物種間生殖隔離阻礙了物種之間的基因交流,從而給作物育種帶來很大的局限性216。 原生質(zhì)體融合技術(shù)是實(shí)現(xiàn)基因重組的一條新途徑，目前利用細(xì)胞融合已從很多作物種、屬間，甚至科間獲得體細(xì)胞雜種，創(chuàng)造了一些自然界不存在的植物類型（1） 克服有性雜交不親和和生殖障礙216。 一些植物的野生材料具有很好的抗性，但與栽培品種之間存在有性雜交不親和現(xiàn)象，難以通過常規(guī)技術(shù)實(shí)現(xiàn)有益抗性的轉(zhuǎn)移。原生質(zhì)體融合不涉及到雌雄性配子，從而可以克服生殖障礙216。 番茄薯或薯番茄盡管沒有實(shí)際價(jià)值，但其設(shè)想還是具有很深遠(yuǎn)的意義 （2 ）轉(zhuǎn)移有利的農(nóng)藝性狀，創(chuàng)造新的種質(zhì)材料216。 作物栽培品種常常缺乏某些抗性性狀，在栽培中處于不利地位216。 野生種中具有很多優(yōu)良的抗性，通過原生質(zhì)體融合可以將野生種的抗性轉(zhuǎn)移進(jìn)栽培種中（3） 轉(zhuǎn)移胞質(zhì)基因，為研究體細(xì)胞遺傳提供途徑和材料 216。 植物的細(xì)胞質(zhì)控制著很多優(yōu)良的性狀，如線粒體控制胞質(zhì)雄性不育，葉綠體控制的抗除草劑特性216。 有性雜交的胞質(zhì)成分主要為母系遺傳，不可能實(shí)現(xiàn)雜交親本的胞質(zhì)雜交。但原生質(zhì)體融合則可以達(dá)到此目的第六章? 單倍體在遺傳和育種中的應(yīng)用價(jià)值? 一、在植物育種中使后代迅速純合? 二、提高選擇效率? 三、排除雜種優(yōu)勢(shì)對(duì)后代選擇的干擾? 四、遺傳研究的良好實(shí)驗(yàn)材料體系 ? 五、突變體的篩選? 六、消除致死基因? 七、選育新型自交系 ? 八、遺傳轉(zhuǎn)化的受體材料? 培養(yǎng)條件下小孢子的發(fā)育途徑? 1）營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞發(fā)育途徑? 2）生殖細(xì)胞發(fā)育途徑? 3）營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞和生殖細(xì)胞并進(jìn)發(fā)育途徑? 4）花粉均等分裂途徑? 小孢子培養(yǎng)與花藥培養(yǎng)的優(yōu)勢(shì)體現(xiàn)在哪些方面? 小孢子培養(yǎng)在某些方面比花藥培養(yǎng)有一定優(yōu)勢(shì)? 花藥培養(yǎng)有時(shí)會(huì)由于花藥中的有害物質(zhì)而不能