《單克隆抗體技術(shù)》ppt課件-文庫(kù)吧
2025-02-07 00:15 本頁(yè)面
【正文】 氨 基 酸 鳥(niǎo)嘌呤核苷酸 谷 氨 酰 胺 （ A） 尿核苷單磷酸 胸腺嘧啶核苷酸 TK ：胸腺嘧啶核苷（ T） m 核酸補(bǔ)救合成 m 核酸從頭合成 核酸 氨甲喋呤 (A) () 次黃嘌呤 (H)\胸苷 (T) TK HGPRT TK HGPRT HAT選擇培養(yǎng)基的原理 ? HAT選擇培養(yǎng)基組分 次黃嘌呤（ hypoxanthine,H) 氨甲喋呤（ aminopterin,A):葉酸拮抗劑 胸腺嘧啶核苷（ thymidine,T) 抗原免疫的脾細(xì)胞 小鼠骨髓瘤細(xì)胞 （ B細(xì)胞） （ B細(xì)胞惡性腫瘤） 1. 抗體分泌（ Ig+) +在 HAT生長(zhǎng) HGPRT株 PEG 融合 HAT篩選 脾 骨髓瘤細(xì)胞（雜交瘤細(xì)胞） （ HGPRT+、 Ig+） 融合的結(jié)果及命運(yùn) 雜交瘤細(xì)胞 未融合的脾細(xì)胞 未融合的骨髓瘤細(xì)胞 脾 脾雜交細(xì)胞 骨髓瘤 骨髓瘤雜交細(xì)胞 免疫動(dòng)物 培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞 收集致敏的 B淋巴細(xì)胞 收集骨髓瘤細(xì)胞 細(xì)胞融合 HAT選擇培養(yǎng)基篩選雜交瘤細(xì)胞 檢測(cè)篩選陽(yáng)性細(xì)胞 克隆化培養(yǎng)（反復(fù) 35次） 獲得穩(wěn)定分泌 McAb的雜交瘤細(xì)胞株 McAb的制備（雜交瘤培養(yǎng)上清或誘生腹水） McAb 純化及鑒定 制備單克隆抗體的基本技術(shù) 1 抗原提純與動(dòng)物免疫 2 骨髓瘤細(xì)胞及飼養(yǎng)細(xì)胞的制備 3 細(xì)胞融合 4 抗體檢測(cè) 5 雜交瘤的克隆化和凍存 6 McAB的制備 7 單克隆抗體的純化 抗 體 X a b c d a b c d 抗原決定基 BALB/c a b b c d 傳統(tǒng)抗體 (抗血清 ) 是所有抗 體 的混和 脾 臟產(chǎn)生各種 B 細(xì)胞 免 疫前要先 把抗原作 成乳 劑
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