《單克隆抗體技術》ppt課件-文庫吧
2025-02-07 00:15 本頁面
【正文】 氨 基 酸 鳥嘌呤核苷酸 谷 氨 酰 胺 （ A） 尿核苷單磷酸 胸腺嘧啶核苷酸 TK ：胸腺嘧啶核苷（ T） m 核酸補救合成 m 核酸從頭合成 核酸 氨甲喋呤 (A) () 次黃嘌呤 (H)\胸苷 (T) TK HGPRT TK HGPRT HAT選擇培養(yǎng)基的原理 ? HAT選擇培養(yǎng)基組分 次黃嘌呤（ hypoxanthine,H) 氨甲喋呤（ aminopterin,A):葉酸拮抗劑 胸腺嘧啶核苷（ thymidine,T) 抗原免疫的脾細胞 小鼠骨髓瘤細胞 （ B細胞） （ B細胞惡性腫瘤） 1. 抗體分泌（ Ig+) +在 HAT生長 HGPRT株 PEG 融合 HAT篩選 脾 骨髓瘤細胞（雜交瘤細胞） （ HGPRT+、 Ig+） 融合的結果及命運 雜交瘤細胞 未融合的脾細胞 未融合的骨髓瘤細胞 脾 脾雜交細胞 骨髓瘤 骨髓瘤雜交細胞 免疫動物 培養(yǎng)骨髓瘤細胞 收集致敏的 B淋巴細胞 收集骨髓瘤細胞 細胞融合 HAT選擇培養(yǎng)基篩選雜交瘤細胞 檢測篩選陽性細胞 克隆化培養(yǎng)（反復 35次） 獲得穩(wěn)定分泌 McAb的雜交瘤細胞株 McAb的制備（雜交瘤培養(yǎng)上清或誘生腹水） McAb 純化及鑒定 制備單克隆抗體的基本技術 1 抗原提純與動物免疫 2 骨髓瘤細胞及飼養(yǎng)細胞的制備 3 細胞融合 4 抗體檢測 5 雜交瘤的克隆化和凍存 6 McAB的制備 7 單克隆抗體的純化 抗 體 X a b c d a b c d 抗原決定基 BALB/c a b b c d 傳統(tǒng)抗體 (抗血清 ) 是所有抗 體 的混和 脾 臟產(chǎn)生各種 B 細胞 免 疫前要先 把抗原作 成乳 劑
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