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食品安全現代生物檢測技術-文庫吧

2024-12-24 12:42 本頁面


【正文】 );酶標記的抗原或抗體(結合物);酶的底物;陰性對照品和陽性對照品(定性測定中),參考標準品和控制血清(定量測定中);結合物及標本的稀釋液;洗滌液;酶反應終止液。 ? 1 免疫吸附劑 ? 2 結合物 ? 3 酶的底物 ? 4 洗滌液 ? 5 酶反應終止液 ? 6 陽性對照品和陰性對照品 ? 7 參考標準品 ? 三、磺胺二甲嘧啶的間接競爭 ELISA檢測 ? (一)人工完全抗原的合成 ? (二)合成抗原的鑒定 ? (三)抗體的制備與純化 ? (四)標準競爭抑制曲線的制作 ? (五)畜產品中 SM2殘留的 ELISA檢測 ? (六)方法評價 ?1 特異性 ?2 靈敏度 ?3 準確度 ?4 精確度 ? 第二節(jié) PCR檢測技術 ? 一、概述 ? PCR又稱聚合酶鏈式反應 (Polymerase chain reaction),是1985年由美國的 Kary Mullis首創(chuàng)并由美國 Cetus公司開發(fā)的一項體外擴增 DNA的方法。應用該方法可使極微量的特定 DNA片段在幾小時內迅速擴增至百萬倍,因而一經問世便在短短的數年內就得到了迅速發(fā)晨和實際應用,并在原有基礎上結合各種生化分子生物學技術衍生出了許多改良技術。這些技術顯示出了巨大的潛力,發(fā)揮著越來越大的作用,也正因為如此它們被譽為 20世紀 80年代分子生物學革命和生物技術的飛躍。 ? (一) PCR原理 ? PCR是依據 DNA模板的特性,模仿體內的復制過程,在體外合適的條件下以單鏈 DNA為模板,以人工設計和合成的寡核苷酸為引物,利用熱穩(wěn)定的 DNA聚合酶延 5’3’方向摻人單核苷酸來特異性的擴增 DNA片段的技術。 ? (二) PCR反應體系 ? PCR反應體系主要由引物、 dNTP、 DNA聚合酶 (TaqDNA聚合酶 )、緩沖液、 Mg2+和核酸模板組成。 ? (三) PCR反應參數 ? 在 PCR反應中每輪循環(huán)的各步反應時間不應過長,以免降低 TaqDNA聚合酶的活性。下面介紹 PCR反應中的一些具體
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