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生物學]放射性免疫藥盒本科課程-文庫吧

2024-12-20 14:20 本頁面


【正文】 RIA) 免疫放射量度分析( Immunoradiometric assay, IRMA) 受體放射性配體結合分析( Receptor Radioligand Bonding Assay, PRLBA) 放射受體分析( RadioReceptor Assay, RRA) 2 主要的放射標記免疫分析方法 19581960年由 Yalow RS and Breson SA創(chuàng)建,為最早的放射標記免疫分析方法。 ( 1977年獲得了諾貝爾生物醫(yī)學獎)。 原理: 用放射性核素標記抗原,標記抗原與非標記抗原同時競爭結合物(如抗體)上有限的結合位點。然后將結合與未結合的游離抗原分離,測定其放射性分布,利用標準曲線確定樣本中待測物的含量。 1) 放射免疫分析( Radioimmunoassay, RIA) Ag* +Ag+ Ab Ag*Ab + AgAb 游離物( F) 復合物( B) 對于 RIA,應滿足以下條件: ◆ 抗原是純一的,只由一種化學成分組成; ◆ 抗體也僅由一種化學成分組成; ◆ 抗原與抗體均為單價,即一分子抗原只能和一分子抗體反應; ◆ 標記的和未標記的抗原具有相同的物理 化學性質; ◆ 抗原 抗體反應遵循質量作用定律; ◆ 反應達到平衡; ◆ 結合抗原和未結合的游離抗原能完全分開,且不破壞反應平衡; ◆ 能準確測量結合抗原和游離抗原之比,或結合抗原與總抗原之比。 K1 Ag + Ab AgAb k1 K(親和常數(shù)) = =(AgAb) / [ Ag] [ Ab] k1 b/f =( AgAb) / ( Ag)=K(Ab) b/f=K(AbTB) K1 放射免疫分析的 Scatchard圖 2) 免疫放射量度分析( Immunoradiometric assay, IRMA) 在 RIA基礎上建立起來的標記免疫分析方法。 原理: 用放射性核素標記抗體,以過量的標記抗體與抗原結合建立的方法 . 免疫放射量度分析原理示意圖 IRMA劑量反映曲線 RIA反映曲線 RIA與 IRMA反應式比較 方法 反應式 分離方法 RIA Ag* +Ag+ Ab Ag*Ab + AgAb (定量抗體) 液相分離 固相分離 IRMA Ag+ Ab* AgAb* + Ab* Ag +Ab*+固相 Ab 固相 AbAgAb
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