動物分子遺傳育種學(xué)第4章-文庫吧
2025-04-23 17:15 本頁面
【正文】 0 10 10 1 大鼠 60 1020 15 2 小鼠 80 24 4 不同動物的轉(zhuǎn)基因成功率 動物轉(zhuǎn)基因的技術(shù)： （ 1）上游技術(shù)： 是指利用分子遺傳學(xué)和分子生物學(xué)技術(shù)進行基因改造，載體構(gòu)建，最后組裝成轉(zhuǎn)基因單位的一系列方法技術(shù)。 （ 2）中游技術(shù)： 包括外源基因?qū)胧荏w細胞、胚胎移植、轉(zhuǎn)基因動物的繁育建系等。 （ 3）下游技術(shù)： 是指轉(zhuǎn)基因的整和表達情況的檢測。 下游技術(shù)的檢測方法： （ 1）在染色體和DNA水平上： a. Southern 雜交 b. PCR擴增 c. 熒光原位雜交 （ 2）在 mRNA水平上： blot雜交 （ 3）在 Pr水平上： Western blot雜交。 （ 4）表型水平上： 檢測轉(zhuǎn)基因動物在生長速度、抗病性、產(chǎn)品質(zhì)量等方面與原來動物有無差異。 第二節(jié) 轉(zhuǎn)基因動物的研究方法 轉(zhuǎn)基因動物的常用方法： （ 1）顯微注射法 （ 2）逆轉(zhuǎn)錄病毒法 （ 3）胚胎干細胞法 （ 4）精子載體法 顯微注射法： 外源基因構(gòu)建 準(zhǔn)備受精卵 顯微注射 胚胎移植 轉(zhuǎn)基因檢測 優(yōu)點： （ 1）安全（無病毒基因組序列） （ 2）轉(zhuǎn)移率高（整合率達 30%） （ 3）相對較短周期內(nèi)可得到純合體 缺點： （ 1）設(shè)備昂貴，所需技術(shù)性很強。 （ 2）轉(zhuǎn)基因的拷貝數(shù)無法控制，通 常為多拷貝，最多可達幾百個 （ 3）通常在插入點引起突變（重組、 缺失）造成動物生理缺陷 顯微注射法： 逆轉(zhuǎn)錄病毒法： 逆轉(zhuǎn)錄病毒： 是一種整合性的單鏈
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