轉(zhuǎn)基因、基因敲除和rna干涉-文庫吧
2025-04-22 18:34 本頁面
【正文】 摘自 《 中華醫(yī)學(xué)信息 》 2021年第 22卷第 21期 ? 基因敲除分為完全基因敲除和條件型基因敲 除（又稱不完全基因敲除）兩種。 ? 完全基因敲除是指通過同源重組法完全消除 細(xì)胞或者動(dòng)物個(gè)體中的靶基因活性，條件型 基因敲除是指通過定位重組系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)特定時(shí)間和空間的基因敲除。 一、實(shí)現(xiàn)基因敲除的多種原理和方法 ? 1 利用基因同源重組進(jìn)行基因敲除 ? 基因敲除是 80年代后半期應(yīng)用 DNA同源重組原理發(fā)展起來的。 80年代初，胚胎干細(xì)胞（ ES細(xì)胞）分離和體外培養(yǎng)的成功奠定了基因敲除的技術(shù)基礎(chǔ)。 ? 1985年，首次證實(shí)的哺乳動(dòng)物細(xì)胞中同源重組的存在奠定了基因敲除的理論基礎(chǔ)。 ? 到 1987年， Thompsson首次建立了完整的 ES細(xì)胞基因敲除的小鼠模型。 ? 直到現(xiàn)在，運(yùn)用基因同源重組進(jìn)行基因敲除依然是構(gòu)建基因敲除動(dòng)物模型中最普遍的使用方法。 步驟 ? 基因載體的構(gòu)建 ? ES 細(xì)胞的獲得 ? 同源重組 ? 選擇篩選已擊中的細(xì)胞 ? 表型研究 ? 得到純合體
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