遺傳毒性評價ppt課件(已改無錯字)
2023-02-15 13:25:17 本頁面
【正文】 ， 25℃下恢復(fù)培養(yǎng) 22～ 24h。 四、實驗操作流程 根尖細(xì)胞固定并保存： 切取恢復(fù)后的 1cm長的幼根，甲醇：冰醋酸（ 3： 1）液固定 24h。 置 70%的乙醇中保存于 4℃ 冰箱中。 解離： 加入 1mol/L鹽酸浸沒幼根 10min，使幼根軟化。解離前后用蒸餾水清洗干凈。 染色、壓片： 截取 1～ 2mm長的根尖置載玻片上，滴一滴染液，染色 5～ 8min，加上蓋玻片，壓片。 鏡檢觀察、計數(shù)： 首先在低倍鏡下找到分生組織區(qū)細(xì)胞分散均勻，分裂相較多的部位，再轉(zhuǎn)高倍鏡觀察。 每一處理觀察 3個根尖，每個根尖數(shù) 1000個細(xì)胞，統(tǒng)計其中含微核的細(xì)胞數(shù)，然后平均，即為該處理的 MCN‰ ，即微核千分率。 五、結(jié)果與分析 微核識別標(biāo)準(zhǔn)： （ 1）在主核大小的 1/3以下，并與主核分離的小核。 直徑大約是細(xì)胞直徑的 1/20～ 1/5。 （ 2）小核著色與主核相當(dāng)或稍淺。 （ 3）小核形態(tài)為圓形、橢圓形或不規(guī)則形。 處理 觀察的細(xì)胞數(shù) 微核數(shù) 總計 微核 ‰ NaN3 (mmol/L) 紫外線 (min) 20 40 60 蠶豆根尖微核檢測記錄表 注：以小組為單位統(tǒng)計平均微核千分率。 處理 觀察的細(xì)胞數(shù) 微核數(shù) 總計 ‰蒸餾
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