爬山虎葉中黃酮類化合物提取條件初探及含量測(cè)定畢業(yè)論文(已改無錯(cuò)字)
2022-10-09 05:03:55 本頁(yè)面
【正文】 1mL于試管，加氫氧化鈉溶液，振蕩 。 若溶液呈亮黃色，說明含 黃酮。 鐵離子反應(yīng)：取提取液 1mL于試管中，加鐵離子溶液，振蕩 。 若溶 液呈墨綠色，說明含 黃酮。 濃氨水 反應(yīng)：取提取液 1mL 于試管中，加幾滴濃氨水溶液，振蕩 。 若溶液呈黃色，說明 含 黃酮。 鹽酸 鋅反應(yīng)：取提取液 1mL 于試管中，先加少量鋅粉，再加幾滴濃鹽酸溶液，微熱。 若溶液呈橙黃色，說明含有黃酮。 將蘆丁 置 于干燥 潔凈的燒杯，于干燥箱 中，在 120℃ 下恒重 ，取出置于干燥 器 中冷卻，冷卻后準(zhǔn)確稱取 ，用 90%的乙醇 溶解后移入 100mL 容量瓶中，定容，搖勻備用。 最大吸收波長(zhǎng)的選擇 楚雄師范學(xué)院本科論文（設(shè)計(jì)） 3 準(zhǔn)確移取 液于 10mL 比色管中， 加入 5%亞硝酸鈉溶液，放置 6分鐘后，加入 %硝酸鋁溶液，放置 6 分鐘后，加入 %氫氧化鈉溶液，用 95%乙醇溶液稀釋至刻度，再放置 10 分鐘，以試劑為 參比 ，在 430～ 550nm 波長(zhǎng)范圍測(cè)定吸光度。 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 分別精密移取 ， ， ， 于 10mL 比色管中，加入 %亞硝酸鈉溶液，放置 6分鐘，加入 %硝酸鋁溶液，放置 6分鐘，加入 %氫氧化鈉溶液，用 95%乙醇溶液稀釋至刻度， 再 放置 10 分鐘，以試劑為 參比 ，在一定波長(zhǎng)下分別測(cè)吸光度。 黃酮含量的測(cè)定 準(zhǔn)確移取 10mL 比色管中，加入 %亞硝酸鈉溶液，放置 6 分鐘后，加入 %硝酸鋁溶液，放置 6 分鐘后，加入 4mL4%氫氧化鈉溶液，用相應(yīng)濃度的乙醇溶液稀釋至刻度， 再 放置 10 分鐘，以試劑為 參比 ，在一定波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度，平行測(cè)定三次，結(jié)果取平均值，并計(jì)算含量。 單因素 實(shí)驗(yàn) 乙醇濃度對(duì)提取爬山虎葉中黃酮類化合物的影響 按照 所述 實(shí)驗(yàn) 方法，分別用 95%， 85%， 80%， 75%， 70%的乙醇為提取 劑 ，回流提取爬山虎葉中的黃酮類化合物 ，測(cè)定黃酮含量，以確定較適宜的乙醇濃度。 回流時(shí)間對(duì)提取爬山虎葉中黃酮類化合物的影響 按照 ，用 體積 分?jǐn)?shù)的乙醇，分別回流提取 ， ， ， ， ，測(cè)定黃酮含量，以確定較適宜的回流時(shí)間。 物料比對(duì)提取爬山虎葉中黃酮類化合物的影響 按照 ，用 體積 分?jǐn)?shù)和回流時(shí)間，分別 按料液比（ g/mL）1:10， 1:15， 1:20， 1:25， 1:30， 在 80℃ 下，回流 提取爬山虎葉中的黃酮類化合物 ，測(cè)定黃酮含量，以確定較適宜的料液比。 提取溫度對(duì)提取爬山虎葉中黃酮類化合物的影響 按照 ，用 、 和 分別在 70℃ ， 75℃ ， 80℃ ， 85℃ ，90℃ 下， 回流提取爬山虎葉中的黃酮類化合物 ，測(cè)定黃酮含量，以確定較適宜的提取溫度。 正交實(shí)驗(yàn) 根據(jù)單因素實(shí)驗(yàn)， 設(shè)計(jì)正交實(shí)驗(yàn) ， 找出 最佳提取 條件 。 楚雄師范學(xué)院本科論文（設(shè)計(jì)） 4 2 結(jié)果與分析 定性 檢驗(yàn) 結(jié)果 提取液定性 檢驗(yàn) 結(jié)果如下 ： 表 21 黃酮類化合物的定性鑒定 試劑 Al(NO3)3 NaOH Fe3+ 濃氨水 HClZn 現(xiàn)象 黃色 亮黃色 墨綠色 黃色 橙紅色 通過 5 種顯色反應(yīng)， 提取液 顯色均與黃酮類化合物顯色相同，說明 提取液中的提取物 含 黃酮類化合物。 最大吸收波長(zhǎng)的選擇結(jié)果 按實(shí)驗(yàn) 所得蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液，在 420～ 550nm范圍內(nèi)的吸光度如圖 21所示 ： 圖 21蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度與波長(zhǎng)關(guān)系圖 由圖 21 可知， 蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液 在 500nm 處有最大吸收峰，故選擇 500nm 為最大吸收波長(zhǎng)。 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制結(jié)果與分析 及黃酮含量計(jì)算公式 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制結(jié)果與分析 以蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo) ， 吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，結(jié)果 見圖 22。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明蘆丁含量在 0～ ，其回歸方程為y=+， R2=。 黃酮含量計(jì)算公式 420 440 460 480 500 520 540 5600 .1 00 .1 20 .1 40 .1 60 .1 80 .2 0吸光度波長(zhǎng)楚雄師范學(xué)院本科論文（設(shè)計(jì)） 5 CV1 總黃酮含量 = 100103100% V2 V1=10mL V2=1mL C— 測(cè)量液中黃酮的濃度 圖 22 吸光度與蘆丁標(biāo)準(zhǔn)液濃度的關(guān)系 單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析 乙醇濃度對(duì)提取爬山虎葉中黃酮類化合物的影響 據(jù) ，改變乙醇濃度，所得提取液的吸光度及 黃酮 含量 如下： 表 22 乙醇濃度對(duì)提取爬山虎葉中黃酮類化合物的影響 乙醇濃度（ %） 70 75 80 85 90 吸光度 黃酮含量（ %） 由表 22 可知 ，隨著乙醇濃度的增大，吸光度不斷增大，當(dāng)乙醇濃度為 80%時(shí)吸光度達(dá)到最大，隨后依次減小，故較適宜乙醇濃度為 80%。 回流時(shí)間對(duì)提取爬山虎葉中黃酮類化合物的影響 據(jù) ， 在不同回流時(shí)間下，所得提取液的吸光度和黃酮含量見表 23。 由表 23 可知，在 ～ 范圍，黃酮含量隨著回流時(shí)間的增加不斷的增大 ；在 ～ 范圍內(nèi)，黃酮含量隨回流時(shí)間的增加而逐漸減?。?回流時(shí)間為 ，黃酮含量最高。因此， 為較適宜回流時(shí)間。
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