獸醫(yī)微生物學(xué)變態(tài)反應(yīng)(已改無錯(cuò)字)
2022-10-02 21:43:18 本頁面
【正文】 清學(xué)反應(yīng)常用 pH為 68， 過高或過低的pH可使抗原抗體復(fù)合物重新離解 。 課件 002 獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件 29 第二節(jié) 凝聚性試驗(yàn) 抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合形成復(fù)合物 ， 在有電解質(zhì)存在下 ， 復(fù)合物相互凝聚形成肉眼可見的凝聚小塊或沉淀物 ， 根據(jù)此現(xiàn)象來測(cè)定相應(yīng)抗體或抗原 ， 稱為凝聚性試驗(yàn) 。 分為 凝集試驗(yàn)和沉淀試驗(yàn) 。 一 、 凝集試驗(yàn) 細(xì)菌 、 紅細(xì)胞等顆粒性抗原 ， 與相應(yīng)抗體結(jié)合 ，在有適當(dāng)電解質(zhì)存在下 ， 形成肉眼可見的凝集團(tuán)塊 ，稱為 凝集試驗(yàn) 。 參與的抗體主要為 IgG、 IgM。 凝集試驗(yàn)可用于檢測(cè)抗原或抗體 ， 優(yōu)點(diǎn)是操作簡便 。 課件 002 獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件 30 根據(jù)抗原的性質(zhì)分為 直接凝集試驗(yàn) 和 間接凝集試驗(yàn) 。 顆粒性抗原與凝集素直接結(jié)合并出現(xiàn)凝集現(xiàn)象的試驗(yàn)稱作直接凝集試驗(yàn)。按操作方法可分玻片法 和 試管法 兩種。 （ 1）玻片法 為一種 定性試驗(yàn) 。將含有已知抗體的診斷血清與待檢抗原懸液在玻片上混合，數(shù)分鐘后，如出現(xiàn)顆粒狀或絮狀凝集，即為陽性反應(yīng)。 此法簡便快速，適用于新分細(xì)菌的鑒定或分型。如沙門氏菌的鑒定。也可用已知的診斷抗原，檢測(cè)待檢血清中的相應(yīng)抗體，如布氏桿菌、雞白痢全血平板凝集試驗(yàn)。 課件 002 獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件 31 （ 2）試管法 為一種 定量試驗(yàn) ，用以檢測(cè)血清抗體含量。 將待檢血清用生理鹽水作倍比稀釋，然后加入等量抗原，置 37℃ 水浴數(shù)小時(shí)觀察。視不同凝集程度記錄為 ++++(100％凝集 )、 +++(75％凝集 )、 ++(50％凝集 )、 +(25％凝集 )和 (不凝集 )。以其 ++以上的血清最大稀釋度為該血清的凝集價(jià) (或稱滴度 )。 試驗(yàn)時(shí)必須設(shè)置 陽性血清 、 陰性血清和生理鹽水等對(duì)照 。 課件 002 獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件 32 將可溶性抗原 (或抗體 ) 吸附不溶性顆粒載體的表面 ， 與相應(yīng)抗體 (或抗原 )作用 ， 在電解質(zhì)存在條件下 ， 出現(xiàn)的特異性的凝集反應(yīng)稱為 間接凝集反應(yīng) 。 優(yōu)點(diǎn) 敏感性高 ， 比直接凝集反應(yīng)敏感 28倍 。 常用載體 紅細(xì)胞 (綿羊紅細(xì)胞 )、 膠乳顆粒等 。 當(dāng)載體吸附了可溶性抗原后即稱為 致敏顆粒 。 間接血凝試驗(yàn) 是將 可溶性抗原 致敏于紅細(xì)胞表面 ，用以檢測(cè)相應(yīng)抗體 。 反向間接血凝試驗(yàn) 如將 抗體 致敏于紅細(xì)胞表面 ，用以檢測(cè)檢樣中相應(yīng)抗原 。 課件 002 獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件 33 (LAT) 用它膠乳微球 （ 直徑約） 作載體吸附某些抗原 (或抗體 )， 可用以檢測(cè)相應(yīng)的抗體 (或抗原 )。 優(yōu)點(diǎn) 快速簡便 、 易保存 、 較準(zhǔn)確等 。 (COAG) 葡萄球菌 A蛋白 (SPA) 能與多種動(dòng)物 IgG分子的 Fc片結(jié)合 ， 結(jié)合后保持其抗體活性 ， 當(dāng)與相應(yīng)的抗原結(jié)合時(shí) ， 就可產(chǎn)生凝集反應(yīng) 。 本法廣泛應(yīng)用于多種細(xì)菌和某些病毒的快速診斷 。 課件 002 獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件 34 二、沉淀試驗(yàn) 可溶性抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合，在電解質(zhì)存在下，形成肉眼可見的白色沉淀，稱為 沉淀試驗(yàn) 。 參與沉淀試驗(yàn)的抗原稱 沉淀原 ，抗體稱為 沉淀素?？乖梢允嵌嗵恰⒌鞍踪|(zhì)、類脂等，抗原分子較小，如細(xì)菌的外毒素、內(nèi)毒素、菌體裂解液，病毒的可溶性抗原、血清、組織浸出液等。 在小口徑試管內(nèi) 先加入已知抗血清 ，然后小心沿管壁加入 待檢抗原 于血清表面 ， 使之成為分界清晰的兩層 。 數(shù)分鐘后 ， 兩層液面交界處出現(xiàn)白色環(huán)狀沉淀 ， 即為陽性反應(yīng) 。 課件 002 獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件 35 用途 用于抗原的定性試驗(yàn)，如診斷炭疽的 Ascoli試驗(yàn)、鏈球菌血清型鑒定、沉淀素的效價(jià)滴定等。試驗(yàn)時(shí)出現(xiàn)白色沉淀帶的最高血清稀釋倍數(shù)，即為血清的沉淀價(jià)。 課件 002 獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件 36 （免疫）擴(kuò)散試驗(yàn) 瓊脂凝膠呈多孔結(jié)構(gòu)，孔內(nèi)充滿水分， 1％瓊脂凝膠的孔徑約為 85nm，各種抗原抗體在瓊脂凝膠中自由擴(kuò)散?？乖贵w在瓊脂凝膠中擴(kuò)散，當(dāng)二者在比例適當(dāng)處相遇，即發(fā)生沉淀反應(yīng)，形成肉眼可見的 沉淀帶 ，稱為瓊脂免疫擴(kuò)散，又簡稱 瓊脂擴(kuò)散 和 免疫擴(kuò)散 。雙向雙擴(kuò)散最常用。 雙向雙擴(kuò)散 雙向雙擴(kuò)散試驗(yàn)，簡稱雙擴(kuò)散。即用1％瓊脂澆成厚 23mm的凝膠板，在其上打圓孔，于相鄰孔內(nèi)滴加抗原和抗體，在飽和濕度下，擴(kuò)散 24h或數(shù)日，觀察沉淀帶。 課件 002 獸醫(yī)微生物學(xué)教學(xué)課件 37 抗原抗體在瓊脂凝膠內(nèi)相向擴(kuò)散，
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