血清成分分析-閱讀頁(yè)
2024-11-19 04:23本頁(yè)面
【正文】 通過燈芯上升到濾紙上向四周展層，直到溶劑前沿移至距濾紙邊緣約1cm處時(shí)停止（展層時(shí)間為1h）80100℃烘箱干燥，噴灑水合茚三酮的正丁醇溶液，80100℃顯色實(shí)驗(yàn)結(jié)果： 血清中膽固醇的測(cè)定膽固醇含量 吸光度對(duì)照樣品不免疫血清免疫血清⑵、洗脫曲線波峰低一點(diǎn)的藍(lán)色曲線為藍(lán)聚糖，波峰高一點(diǎn)的黃色曲線為重鉻酸鉀。2 、纖維素薄膜電泳的實(shí)驗(yàn)結(jié)果 全血清電泳圖譜 γ球蛋白電泳圖譜 血清清蛋白電泳圖譜⑷、谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性的鑒定⑸、谷丙轉(zhuǎn)氨酶活力單位的測(cè)定吸光度活力單位對(duì)照試管不免疫血清120GPT單位免疫血清190 GPT單位實(shí)驗(yàn)分析與討論： 血清中膽固醇的吸光度為何為負(fù)值分光光度計(jì)的設(shè)計(jì)原理和工作原理，允許吸光值在一定范圍內(nèi)變化，即儀器有一定的準(zhǔn)確度和精確度。某些操作因素也會(huì)影響吸光度的測(cè)定，如混合要充分，否則吸光值太低，甚至出現(xiàn)負(fù)值；混合液不能存在氣泡，空白液無懸浮物，否則讀數(shù)漂移劇烈；必須使用相同的比色杯測(cè)試空白液和樣品，否則濃度差異太大；換算系數(shù)和樣品濃度單位選擇一致；不能采用窗口磨損的比色杯；樣品的體積必須達(dá)到比色杯要求的最小體積等多個(gè)操作事項(xiàng)。樣品在加了鄰苯二甲醛之后，產(chǎn)生了紫紅色物質(zhì)。全血清電泳圖譜為什么只有兩條區(qū)帶正常的實(shí)驗(yàn)結(jié)果應(yīng)該是通過纖維素薄膜電泳可將血清蛋白質(zhì)分為5條區(qū)帶，從正極端依次分為清蛋白、α1球蛋白、α2球蛋白、β球蛋白和γ球蛋白（如上圖所示）而我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果卻只有兩條區(qū)帶。這次實(shí)驗(yàn)還應(yīng)該注意的地方是放薄膜的時(shí)候毛面朝下，要注意放平，與濾網(wǎng)充分接觸，但不要接觸點(diǎn)樣端，一定要將點(diǎn)樣的一端放在接近負(fù)極的一方為什么在谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性鑒定中，丙氨酸與谷氨酸爬得距離不同，又是為什么同是谷氨酸或者同是丙氨酸在紙面上爬的距離也不同由于丙氨酸比谷氨酸在層析液的溶解度要大，所以丙氨酸在紙面跑得速度比谷氨酸快一些，遠(yuǎn)一些，也正因?yàn)槿绱宋覀儾拍苡^察到肝臟谷丙轉(zhuǎn)氨酶的轉(zhuǎn)氨作用。其他原因可能就是點(diǎn)樣出現(xiàn)了問題，沒有均勻等量的點(diǎn)樣，于是不同濃度的同一種物質(zhì)在同一種層析液中擴(kuò)散速度顯然也會(huì)存在些許的差別。②實(shí)驗(yàn)的始終要讓凝膠上殘留生理鹽水，不然凝膠會(huì)喪失作用了③控制好流速谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性的鑒定：①提取酶液時(shí)，一定要在低溫研磨成漿，使酶不易失活②要使酶液在煮沸時(shí)不那么快蒸干，應(yīng)放在試管而不是燒杯里，最好再加上脫脂棉塞③時(shí)時(shí)振蕩水浴試管，使之充分反映紙層析法：層析液強(qiáng)腐蝕性要注意安全實(shí)驗(yàn)結(jié)論： 經(jīng)過此次實(shí)驗(yàn)，我們了解并掌握鄰苯二甲醛法測(cè)定血清總膽固醇的原理和方法，熟悉了鹽析、透析、濃縮、凝膠層析及其醋酸纖維薄膜電泳的原理與過程，也對(duì)紙層析法測(cè)酶活力有了進(jìn)一步的了解，對(duì)血清有了比較全面的了解
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