【正文】 ； ③從致敏淋巴細(xì)胞而來(lái)的嗜酸性細(xì)胞趨化因子； ④從寄生蟲而來(lái)的嗜酸性粒細(xì)胞趨化因子；⑤從某些細(xì)菌而的嗜酸性粒細(xì)胞趨化因子（如乙型溶血性鏈球菌等）； ⑥從腫瘤細(xì)胞而來(lái)的嗜酸性粒細(xì)胞趨化因子。由于嗜酸性粒細(xì)胞在外周血中百分率很低，故經(jīng)白細(xì)胞總數(shù)和嗜酸性粒細(xì)胞百分率換算而來(lái)的絕對(duì)值誤差較大，因此，在臨床上需在了解嗜酸性粒細(xì)胞的變化時(shí)，應(yīng)采用直接計(jì)數(shù)法。它既可以發(fā)生在體內(nèi)，也可以發(fā)生在體外。體外的抗原抗體結(jié)合反應(yīng)主要用于檢測(cè)抗原或抗體，用于免疫學(xué)診斷。血清學(xué)試驗(yàn)具有高度的特異性，廣泛應(yīng)用于微生物的鑒定、傳染病及寄生蟲病的診斷和監(jiān)測(cè)。②炸面包卷樣紅細(xì)胞：紅細(xì)胞膜呈明顯的內(nèi)外兩圈、四周肥厚、形似炸面包卷。④膜缺損紅細(xì)胞：紅細(xì)胞膜不完整，部分血紅蛋白（Hb）丟失。⑥小紅細(xì)胞：胞體小，外膜增厚，折光增強(qiáng)。黃鋒先等關(guān)于畸形紅細(xì)胞分類 ①面包圈樣紅細(xì)胞。③紅細(xì)胞膜呈顆粒樣、串珠樣。⑤殘碎紅細(xì)胞。⑦棘狀樣紅細(xì)胞。其他如紅細(xì)胞呈鋸齒型、固縮型、大小一致的均稱均一型。此型多屬于非腎小球性血尿?；渭t細(xì)胞占80%以上為腎小球性血尿；畸形紅細(xì)胞《20%，均一型紅細(xì)胞》80%以上為非腎小球性血尿；畸形紅細(xì)胞》20%、《80%，為混合型血尿。腎小球性血尿，絕大多數(shù)為畸形紅細(xì)胞，占80%以上；非腎小球性血尿絕大多數(shù)為均一型紅細(xì)胞，占80%以上；以及以畸形紅細(xì)胞為主（》50%）的混合型和以均一型紅細(xì)胞為主（》50%）的混合型?；渭t細(xì)胞的形成：一般認(rèn)為，紅細(xì)胞通過(guò)腎小球基底膜時(shí)受損和經(jīng)腎小球毛細(xì)血管壁漏出時(shí)受擠壓而變形，同時(shí)還與尿滲透壓、pH等因素有關(guān)。采用顯微鏡觀察檢查尿內(nèi)紅細(xì)胞形態(tài)的變化，對(duì)診斷腎小球疾病引起的血尿和鑒別診斷是有一定價(jià)值和臨床意義的。2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試質(zhì)量管理與控制輔導(dǎo)：如何制定允許總誤差（1）Tonks于1963年從理論上研究此問(wèn)題，提出根據(jù)參考值與參考值范圍而設(shè)定，其公式是：允許總誤差（%）=（1/4）［（參考值上界參考值下界）/參考值均值］100%（2）目前國(guó)際上常推薦根據(jù)生物學(xué)變異制定不精密度標(biāo)準(zhǔn)。生物學(xué)變異可用來(lái)導(dǎo)出臨床實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)項(xiàng)目的不精密度、不準(zhǔn)確度和總誤差的分析質(zhì)量。也可用TE=+Bias表示（95%允許誤差限）。2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試臨檢基礎(chǔ)輔導(dǎo)：精液的精子活動(dòng)率檢測(cè)【正常參考值】正常精子活力一般在Ⅲ級(jí)（活動(dòng)較好，有中速運(yùn)動(dòng)，但波形運(yùn)動(dòng)的較多）以上，射精后1小時(shí)內(nèi)有Ⅲ級(jí)以上活動(dòng)能力的精于應(yīng)》.【臨床意義】如果0級(jí)（死精子，無(wú)活動(dòng)能力，加溫后仍不活動(dòng)）和Ⅰ級(jí)（活動(dòng)不良，精子原地旋轉(zhuǎn)、擺動(dòng)或抖動(dòng)，運(yùn)動(dòng)遲緩），常為男性不育癥的重要原因之一。這種提高低能分子達(dá)到活化狀態(tài)的能量，稱為活化能。酶能顯著地降低活化能，故能表現(xiàn)為高度的催化效率。二、中間復(fù)合物學(xué)說(shuō)目前一般認(rèn)為，酶催化某一反應(yīng)時(shí)，首先在酶的活性中心與底物結(jié)合生成酶－底物復(fù)合物，此復(fù)合物再進(jìn)行分解而釋放出酶，同時(shí)生成一種或數(shù)種產(chǎn)物，此過(guò)程可用下式表示： ES的形成，改變了原來(lái)反應(yīng)的途徑，可使底物的活化能大大降低，從而使反應(yīng)加速。底物的結(jié)合可誘導(dǎo)酶分子構(gòu)象發(fā)生變化，比底物大得多的酶分子的三、四級(jí)結(jié)構(gòu)的變化，也可對(duì)底物產(chǎn)生張力作用，使底物扭曲，促進(jìn)ES進(jìn)入活性狀態(tài)。某些酶能與底物形成極不穩(wěn)定的、共價(jià)結(jié)合的ES復(fù)合物，這些復(fù)合物比無(wú)酶存在時(shí)更容易進(jìn)行化學(xué)反應(yīng)。變性蛋白質(zhì)只有空間構(gòu)象的破壞，一般認(rèn)為蛋白質(zhì)變性本質(zhì)是次級(jí)鍵，二硫鍵的破壞，并不涉及一級(jí)結(jié)構(gòu)的變化。引起蛋白質(zhì)變性的原因可分為物理和化學(xué)因素兩類。在臨床醫(yī)學(xué)上，變性因素常被應(yīng)用于消毒及滅菌。變性并非是不可逆的變化，當(dāng)變性程度較輕時(shí)，如去除變性因素，有的蛋白質(zhì)仍能恢復(fù)或部分恢復(fù)其原來(lái)的構(gòu)象及功能，變性的可逆變化稱為復(fù)性。在β巰基乙醇和8M尿素作用下，發(fā)生變性，失去生物學(xué)活性，變性后如經(jīng)過(guò)透析去除尿素，β巰基乙醇，并設(shè)法使疏基氧化成二硫鍵，酶蛋白又可恢復(fù)其原來(lái)的構(gòu)象，生物學(xué)活性也幾乎全部恢復(fù)，此稱變性核糖核酸酶的復(fù)性。2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試血液檢驗(yàn)輔導(dǎo)：異型淋巴細(xì)胞在傳染性單核增多癥、病毒性肺肝炎、流行性出血熱等病毒感染或過(guò)敏原則刺激下，可使淋巴細(xì)胞增生，并出現(xiàn)某些形態(tài)學(xué)變化，稱為異型淋巴細(xì)胞。胞體比正常淋巴細(xì)胞稍大，多為圓形、橢圓形或不規(guī)則形。染色質(zhì)粗糙，呈粗網(wǎng)狀或小塊狀，排列不規(guī)則。Ⅱ型（幼稚型）：胞體較大，核圓形或卵圓形。Ⅲ型（不規(guī)則型）：胞體較大，外形常不規(guī)則，可有多數(shù)足。胞質(zhì)量豐富，染色淡藍(lán)或灰藍(lán)色，有透明感，邊緣處著色較深藍(lán)色。2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試生化檢驗(yàn)輔導(dǎo)：胎兒血型的預(yù)測(cè)羊水中存在ABH（O）血型物質(zhì)，故可在妊娠期預(yù)測(cè)胎兒的血型，以便對(duì)母體胎兒血型不合者進(jìn)行圍生期監(jiān)護(hù)、治療和對(duì)新生兒的作好搶救準(zhǔn)備。馮分作用10min后，便血型物質(zhì)將抗體中和完全，再于各管加入相對(duì)應(yīng)的2%標(biāo)準(zhǔn)A型，B型，充分混勻。本試驗(yàn)最關(guān)鍵的部分是要選擇好抗血清的最適稀釋度。：11：256倍比稀釋后，將2%A，B，置室溫1小時(shí)后觀察結(jié)果，以出現(xiàn)4+凝塊的最高稀釋度定為最適稀釋度。二、ABH（O）血型酶的測(cè)定羊水ABH血型物質(zhì)的測(cè)定，無(wú)法預(yù)測(cè)非分泌型胎兒的血型。當(dāng)有糖供體、二價(jià)錳離子與O型紅細(xì)胞共同孵育時(shí)，羊水中的轉(zhuǎn)移酶可在紅細(xì)胞膜上合億A或B物質(zhì)，利用血型測(cè)定的方法可檢測(cè)埋分泌型胎兒的血型。2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試臨檢基礎(chǔ)知識(shí)輔導(dǎo)：精液的男性生育力指數(shù)測(cè)定【計(jì)算公式】I=M（NV）/（A106）式中I為男性生育力指數(shù)；M為活動(dòng)精子百分率；N為每毫升的精子數(shù)；V為精子運(yùn)動(dòng)的速度；A為畸形精子的百分率。，表明有不同程度的生育障礙。其中對(duì)病毒抗體的檢測(cè)是最常規(guī)使用的方法，這不但是由于這類檢測(cè)特異性、敏感性較高，方法相對(duì)簡(jiǎn)便、成熟，更重要的原因是HIV抗體在病毒感染后除早期短暫的“窗口期”外的整個(gè)生命期間長(zhǎng)期穩(wěn)定地存在并可被檢測(cè)到。2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試血液檢驗(yàn)復(fù)習(xí)輔導(dǎo)：HIV抗體確認(rèn)實(shí)驗(yàn)免疫印跡試驗(yàn)（WB）、條帶免疫試驗(yàn)（LIATEKHIVⅢ）、放射免疫沉淀試驗(yàn)（RIPA）及免疫熒光試驗(yàn)（IFA）。確認(rèn)試驗(yàn)流程：有HIV1/2混合型和單一的HIV1或HIV2型。如果出現(xiàn)HIV2型的特異性指示條帶，需用HIV2型免疫印跡試劑再做HIV2的抗體確認(rèn)試驗(yàn)，呈陰性反應(yīng)，報(bào)告HIV2抗體陰性；呈陽(yáng)性反應(yīng)則報(bào)告HIV2抗體血清學(xué)陽(yáng)性，并將樣品送國(guó)家參比實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行核酸序列分析，WB的敏感性一般不低于初篩實(shí)驗(yàn)，但它的特異性很高，這主要是基于HIV不同抗原組分的分離以及濃縮和純化，能夠檢測(cè)針對(duì)不同抗原成分的抗體，因而能夠用WB方法鑒別初篩實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性。（二）免疫熒光實(shí)驗(yàn)（IFA）IFA法經(jīng)濟(jì)、簡(jiǎn)便、快速，曾被FDA推薦用于WB不確定樣品的診斷。2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試臨檢基礎(chǔ)知識(shí)輔導(dǎo)：重視血常規(guī)的復(fù)檢工作目前血細(xì)胞分析儀己經(jīng)普及到縣醫(yī)院或衛(wèi)生院，這對(duì)提高血細(xì)胞常規(guī)的準(zhǔn)確性和重復(fù)性，減輕工作人員勞動(dòng)強(qiáng)度起促進(jìn)作用。據(jù)我所知有的醫(yī)院有了血細(xì)胞分析儀，把人工操作的工具、試劑全丟棄，基本上不再?gòu)?fù)檢了?，F(xiàn)就此問(wèn)題談?wù)剛€(gè)人看法。尤其是白細(xì)胞形態(tài)學(xué)分類與血細(xì)胞分析儀的白細(xì)胞分類有本質(zhì)上的不同，三分群僅僅是根據(jù)細(xì)胞大小來(lái)分而己，即使先進(jìn)的五分類也與形態(tài)學(xué)也有很大差異，又如中性粒細(xì)胞毒性病變、變異淋巴細(xì)胞、瘧原蟲等臨床需要的指標(biāo)無(wú)法顯示；有的幼稚細(xì)胞、有核紅細(xì)胞也不能區(qū)分；各參數(shù)之間有時(shí)還存在互相干擾。根據(jù)1987年我赴日本考察時(shí)，日本對(duì)三分群儀器白細(xì)胞分類是不收費(fèi)的，而且每一例仍然需要涂片染色，在顯微鏡下重新分類后才能報(bào)告。最近日本名古屋大學(xué)醫(yī)學(xué)部附屬醫(yī)院報(bào)告，他們用SysmexXE2100（五分類）%.再次證明當(dāng)前最先進(jìn)血細(xì)胞分析儀也不能完全替代人工檢查。二、復(fù)檢內(nèi)涵尚待統(tǒng)一有人認(rèn)為“復(fù)檢”就是要在鏡下重新進(jìn)行白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)而己，這是偏面的。因此血常規(guī)手工操作不能丟；2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試臨檢基礎(chǔ)知識(shí)輔導(dǎo)：精液檢查的具備條件受檢者，經(jīng)歷一段經(jīng)常排精過(guò)程后，禁房事5－7天（上次排精到取標(biāo)本間隔時(shí)間至少不得少于100小時(shí)）；備大口有蓋清潔干燥容器一個(gè)，以手淫方式獲取精液，一次全部射入容器，蓋上蓋，記錄標(biāo)本離體時(shí)間；貼身保溫，30分鐘內(nèi)送到化驗(yàn)室，并向檢驗(yàn)員提供標(biāo)本取出時(shí)間。見不動(dòng)精子，須染色方可區(qū)分：不活動(dòng)的精子、死精子、未成熟精子等。經(jīng)三次取樣化驗(yàn)，結(jié)果仍然找不到精子方可確認(rèn)無(wú)精子癥。人體含有27503300毫升血漿，約占血液總體積的55%.血漿的絕大部分是水（體積的90%），其中溶解的物質(zhì)主要是血漿蛋白，還包括葡萄糖、無(wú)機(jī)鹽離子、激素以及二氧化碳。將新鮮血液離心，使血細(xì)胞沉降，上層淡黃色清液即是血漿。2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試免疫檢驗(yàn)輔導(dǎo)：血漿的主要作用提供基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：氨基酸、維生素、無(wú)機(jī)物、脂類物質(zhì)、核酸衍生物等，是細(xì)胞生長(zhǎng)必須的物質(zhì)。生長(zhǎng)因子如成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、表皮生長(zhǎng)因子、血小板生長(zhǎng)因子等。結(jié)合蛋白在細(xì)胞代謝過(guò)程中起重要作用。對(duì)培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用：有一些細(xì)胞，如內(nèi)皮細(xì)胞、骨髓樣細(xì)胞可以釋放蛋白酶，血清中含有抗蛋白酶成分，起到中和作用。因?yàn)橐鹊鞍酌敢呀?jīng)被廣泛用于貼壁細(xì)胞的消化傳代。血清還含有一些微量元素和離子，他們?cè)诖x解毒中起重要作用，如SeO3，硒等。離心機(jī)的種類很多，按照使用目的，可兩類，即制備型離心機(jī)和分析型離心機(jī)。兩類離心機(jī)由于用途不同，故其主要結(jié)構(gòu)也有差異。這里的懸浮顆粒往往是指制成懸浮狀態(tài)的細(xì)胞、細(xì)胞器、病毒和生物大分子等。常用的離心機(jī)有多種類型，一般低速離心機(jī)的最高轉(zhuǎn)速不超過(guò)6000rpm，高速離心機(jī)在25000rpm以下，超速離心機(jī)的最高速度達(dá)30000rpm以上。通過(guò)逐步增加相對(duì)離心力，使一個(gè)非均相混合液內(nèi)形狀不同的大小顆粒分步沉淀。離心前，離心管內(nèi)先裝入分離介質(zhì)（如蔗糖、甘油等），使形成連續(xù)的或不連續(xù)的密度梯度介質(zhì)，然后加入樣品進(jìn)行離心，具體又可分為：1）速度區(qū)帶離心法。本法可分離各種細(xì)胞、病毒、染色體、脂蛋白、DNA和RNA等生物樣品。要求在離心前預(yù)先配制管底濃而管頂稀的密度梯度介質(zhì)，常用介質(zhì)有蔗糖、CsCl、Cs2SO4等，待分離樣品一般鋪在梯度液頂上，如需挾在梯度液中間或管底部，則需調(diào)節(jié)樣品液密度。3）自成梯度等密度離心法。需要離心分離的樣品可和梯度介質(zhì)先均勻混合，離心開始后，梯度介質(zhì)由于離心力的作用逐漸形成管底濃而管頂稀的密度梯度，與此同時(shí)，可以帶動(dòng)原來(lái)混合的樣品顆粒也發(fā)生重新分布，到達(dá)與其自身密度相等的梯度層里，即達(dá)到等密度的位置而獲得分離。根據(jù)被分離物質(zhì)的浮力密度差別進(jìn)行分離，所用的介質(zhì)起始密度約等于被分離物質(zhì)的密度，介質(zhì)在離心過(guò)程中形成密度梯度，被分離物質(zhì)沉降或上浮到達(dá)與之密度相等的介質(zhì)區(qū)域中停留并形成區(qū)帶。這里的懸浮顆粒往往是指制成懸浮狀態(tài)的細(xì)胞、細(xì)胞器、病毒和生物大分子等。常用的離心機(jī)有多種類型，一般低速離心機(jī)的最高轉(zhuǎn)速不超過(guò)6000rpm，高速離心機(jī)在25000rpm以下，超速離心機(jī)的最高速度達(dá)30000rpm以上。通過(guò)逐步增加相對(duì)離心力，使一個(gè)非均相混合液內(nèi)形狀不同的大小顆粒分步沉淀。離心前，離心管內(nèi)先裝入分離介質(zhì)（如蔗糖、甘油等），使形成連續(xù)的或不連續(xù)的密度梯度介質(zhì)，然后加入樣品進(jìn)行離心，具體又可分為：1）速度區(qū)帶離心法。本法可分離各種細(xì)胞、病毒、染色體、脂蛋白、DNA和RNA等生物樣品。要求在離心前預(yù)先配制管底濃而管頂稀的密度梯度介質(zhì)，常用介質(zhì)有蔗糖、CsCl、Cs2SO4等，待分離樣品一般鋪在梯度液頂上，如需挾在梯度液中間或管底部，則需調(diào)節(jié)樣品液密度。3）自成梯度等密度離心法。需要離心分離的樣品可和梯度介質(zhì)先均勻混合，離心開始后，梯度介質(zhì)由于離心力的作用逐漸形成管底濃而管頂稀的密度梯度，與此同時(shí)，可以帶動(dòng)原來(lái)混合的樣品顆粒也發(fā)生重新分布，到達(dá)與其自身密度相等的梯度層里，即達(dá)到等密度的位置而獲得分離。根據(jù)被分離物質(zhì)的浮力密度差別進(jìn)行分離，所用的介質(zhì)起始密度約等于被分離物質(zhì)的密度，介質(zhì)在離心過(guò)程中形成密度梯度，被分離物質(zhì)沉降或上浮到達(dá)與之密度相等的介質(zhì)區(qū)域中停留并形成區(qū)帶。每抽血?dú)馇?，?ml注射器抽取肝素稀釋液2ml，完全濕潤(rùn)整個(gè)針管后棄去肝素液，殘留在針頭及針管頭部死腔內(nèi)的肝素液即可起到抗凝作用。二、采血方法的選擇成人：用肝素化的玻璃注射器或一次性注射器穿刺，采血部位首選橈動(dòng)脈，次選股動(dòng)脈小兒：首選用顳淺動(dòng)脈或頭皮小動(dòng)脈，嚴(yán)格消毒后，用肝素化的5號(hào)頭皮針連接2ml注射器，待動(dòng)脈血流至注射器乳頭時(shí)，立即用小止血鉗分別夾住頭皮針?biāo)芰宪浌苁孜矁啥耍ǎ缓蟀纬鲠橆^立即混勻送檢。因技術(shù)條件限制，不能反復(fù)動(dòng)脈穿刺時(shí)，早產(chǎn)兒與小嬰兒可在足后跟用肝素化毛細(xì)管采取動(dòng)脈化毛細(xì)血管的血亦可。未充分動(dòng)脈化的毛細(xì)管血的PO2偏低，對(duì)PH、PCO2和HCO3—的測(cè)定結(jié)果影響不明顯。若不能立即測(cè)定，應(yīng)將血?dú)鈽?biāo)本保存在2～8℃容器內(nèi)，但即使這樣待測(cè)時(shí)間也不宜超過(guò)2小時(shí)。第一次遇到尿糖檢測(cè)失真是在1984年，叢玉隆還是醫(yī)院檢驗(yàn)科的檢驗(yàn)員。急診醫(yī)生一看檢驗(yàn)報(bào)告馬上產(chǎn)生疑問(wèn)：怎么會(huì)是8毫克？人的正常血糖最低是80毫克，如果真是8毫克，那這個(gè)人早就死了。叢玉隆再仔細(xì)檢查后，發(fā)現(xiàn)在抽取病人血樣時(shí)，患者正輸著vc，結(jié)果終于弄明白了，原來(lái)是患者血樣中含有的大量vc還原了檢驗(yàn)試劑中的酶，干擾了病人的血糖檢驗(yàn)結(jié)果。一組人一天吃6片vc，第二天尿含vc90毫克。叢玉隆說(shuō)，假如一個(gè)糖尿病人，沒(méi)吃vc以前的尿糖是2個(gè)加號(hào)，吃了9片vc后，就可能是1個(gè)加號(hào)，甚至?xí)霈F(xiàn)陰性結(jié)果。試驗(yàn)也證明5個(gè)小時(shí)以后，使用vc的病人每毫升尿含vc幾十毫克，已經(jīng)屬于正常值，不再干擾檢驗(yàn)結(jié)果。磷鉬酸法是血清中無(wú)機(jī)磷與鉬酸鹽結(jié)合形成磷鉬酸化合物，再用還原劑將其還原成鉬藍(lán)進(jìn)行比色測(cè)定。雖非常敏感，但影響因素多，顯色不穩(wěn)定，重復(fù)性也較差，不能用于常規(guī)檢驗(yàn)。2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試生化檢驗(yàn)輔導(dǎo)：火焰分光光度法的儀器原始的火焰光度計(jì)由霧化器、火焰燃燒嘴、濾光片和光電池檢測(cè)器組成。反射鏡起聚光作用。不同的燃料氣體和助燃?xì)饨M分，及其配比，稱助/燃比，決定該化學(xué)火焰能達(dá)到的最高溫度和化學(xué)作用性質(zhì)（見表）。2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試生化檢驗(yàn)輔導(dǎo)：火焰分光光度法的簡(jiǎn)史，就是火焰分光光度法的起源，用此法發(fā)現(xiàn)了許多新元素。由于當(dāng)時(shí)使用照相方法記錄譜線，致使準(zhǔn)確定量分析工作