氨基酸生產(chǎn)(3)-閱讀頁
2025-03-08 12:22本頁面
【正文】 氨基酸的生物合成 谷氨酸的生物合成途徑與代謝調(diào)節(jié)161。 生成谷氨酸的主要酶反應161。 谷氨酸發(fā)酵的代謝途徑 Glu發(fā)酵常用菌種 谷氨酸棒桿菌 () 北京棒桿菌 ( ) 黃色短桿菌 (Brevibacterium flavum) 乳糖發(fā)酵短桿菌 ()谷氨酸發(fā)酵的代謝途徑161。161。161。 優(yōu)先合成與反饋調(diào)節(jié)161。 谷氨酸對谷氨酸脫氫酶存在著反饋抑制和反饋阻遏216。 Glu產(chǎn)生菌主要生理生化特性 需氧，生物素缺陷型 bio,有乙醛酸循環(huán)，羧化酶活性強（ bio作為輔酶） 檸檬酸、異檸檬酸、谷氨酸脫氫酶活性高， Glu合成中存在正常反饋阻遏和反饋抑制。（ 2）生物素對代謝的調(diào)控作用l 生物素對 CO2固定反應的影響 生物素是丙酮酸羧化酶的輔酶，參與 CO2固定反應，據(jù)報道，生物素大過量時（ 100?g/L以上）， CO2固定反應可提高 30%。在低濃度生物素條件下，因琥珀酸氧化能力降低而積累的琥珀酸就會反饋抑制該酶的活性，并阻遏該酶的合成，乙醛酸循環(huán)基本上是封閉的，代謝流向異檸檬酸 →α 酮戊二酸 → 谷氨酸的方向高效率地移動。 使用生物素缺陷型菌株進行谷氨酸發(fā)酵，通過限制發(fā)酵培養(yǎng)基中生物素的濃度控制脂肪酸生物合成，從而控制磷脂的合成252。當磷脂合成減少到正常量的一半左右時，細胞變形，谷氨酸向膜外漏出，積累于發(fā)酵液中161。低濃度 bio降低裂解酶活性，使菌體生長后關閉乙醛酸循環(huán)，使底物流向 Glu合成，低濃度 bio使膜磷脂合成缺陷，增加膜通透性，利于 Glu胞外分泌，解除反饋調(diào)節(jié)，利于Glu合成并大量積累。8hrGlu非積累型細胞 Glu積累型細胞 培養(yǎng)中后期， bio濃度漸低，乙醛酸途徑減弱直至關閉，膜磷脂合成缺陷，膜透性增強，分泌 Glu，解除反饋調(diào)節(jié)，大量積累Glu，細胞形態(tài)異常，未溶解。 特殊調(diào)控：代謝互鎖調(diào)控機制 互鎖調(diào)節(jié)： Lys合成受其它氨基酸合成途徑產(chǎn)物反饋調(diào)節(jié)Lys生產(chǎn)菌種遺傳標記和產(chǎn)量：Hse－ AECRLeu－ 110g/L（加 Hse，限量加 Leu，免除 Leu對 DDP合成酶反饋阻遏互鎖調(diào)節(jié)）Hse－ AECRLeu－ αTARAla－ 110g/L（加 Hse、 Leu，限量加 Ala， αTA是 Leu結構類似物 噻唑丙氨酸 ）AspAsp激酶AspPAspβ –半醛HseMet Thr LysIleDDP協(xié)同反饋抑制DDP還原酶DDP合成酶反饋抑制 AlaLeu反饋阻遏賴氨酸生物合成途徑大腸桿菌的賴氨酸生物合成途徑：圖 232三、異亮氨酸、亮氨酸生產(chǎn)工藝 異亮氨酸、亮氨酸和纈氨酸的生物合成途徑： 圖 234 異亮氨酸發(fā)酵兩種方法：添加前體發(fā)酵法和直接發(fā)酵法添加前體發(fā)酵法： 蘇氨酸脫水酶受異亮氨酸的反饋抑制； 添加前體物質(zhì) D蘇氨酸、 α酮 基異戊酸； 繞過 異亮氨酸對蘇氨酸脫水酶的反饋抑制。亮氨酸發(fā)酵亮氨酸高產(chǎn)菌株的選育：1） 選育 α酮 基異丁酸 抗性突變株，解除對異亮氨 酸、亮氨酸和纈氨酸生物合成酶系的阻遏作用；2）選育異亮氨酸缺陷型回復突變株， 其 α異丙基蘋果酸合成 酶 不再受 亮氨酸的反饋抑制；3） α噻唑 抗性兼蛋氨酸、 異亮氨酸雙重缺陷型突變株，用于亮氨酸的發(fā)酵生產(chǎn)。 培養(yǎng)基161。 溫度161。 培養(yǎng)基 碳源： 淀粉水解糖、糖蜜、醋酸、乙醇、烷烴 碳源濃度要適當，避免碳源濃度過高，否則對菌體生長不利，氨基酸的轉(zhuǎn)化率降低。 培養(yǎng)基 氮源： 銨鹽、尿素、氨水；同時調(diào)整 pH值。 需生物素和氨基酸，以玉米漿作氮源。 氨水用 pH自動控制連續(xù)流加 氨基酸發(fā)酵的工藝控制161。 氨基酸發(fā)酵的工藝控制161。 合成菌體使用 3～ 6％的氮源；合成谷氨酸用去 30～ 80％氮源。 培養(yǎng)基 NH4+濃度： 過低增加 α 酮戊二酸積累，過高使谷氨酸轉(zhuǎn)化為谷酰胺。不足時糖代謝受抑制。鉀： 促進糖代謝。161。 二月 21二月 21Monday, February 01, 2023161。 03:07:0003:07:0003:072/1/2023 3:07:00 AM161。 二月 2103:07:0003:07Feb2101Feb21161。 03:07:0003:07:0003:07Monday, February 01, 2023161。 二月 21二月 2103:07:0003:07:00February 01, 2023161。 01 二月 20233:07:00 上午 03:07:00二月 21161。 。 1行動出成果，工作出財富。 1做前，能夠環(huán)視四周；做時，你只能或者最好沿著以腳為起點的射線向前。 沒有失敗，只有暫時停止成功！。 很多事情努力了未必有結果，但是不努力卻什么改變也沒有。 1成功就是日復一日那一點點小小努力的積累。 1世間成事，不求其絕對圓滿，留一份不足，可得無限完美。 1不知香積寺，數(shù)里入云峰。 1意志堅強的人能把世界放在手中像泥塊一樣任意揉捏。 1楚塞三湘接，荊門九派通。 二月 213:07 上午 二月 2103:07February 01, 2023161。 2023/2/1 3:07:0003:07:0001 February 2023161。 3:07:00 上午 3:07 上午 03:07:00二月 21161。 二月 21二月 21Monday, February 01, 2023161。 03:07:0003:07:0003:072/1/2023 3:07:00 AM161。 二月 2103:07:0003:07Feb2101Feb21161。 03:07:0003:07:0003:07Monday, February 01, 2023161。勝人者有力，自勝者強。 1意志堅強的人能把世界放在手中像泥塊一樣任意揉捏。 1最具挑戰(zhàn)性的挑戰(zhàn)莫過于提升自我。 1業(yè)余生活要有意義，不要越軌。 1一個人即使已登上頂峰，也仍要自強
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