【正文】 織，特別是對局部治療的效果特別好。）第五節(jié)第五節(jié) 反義療法與反義療法與 RNA干涉干涉223。達到治療的目的。 反義療法通過引入目的基因的反義療法通過引入目的基因的 mRNA的反義序列的反義序列而達到上述目的。當引入的反義 RNA與與 mRNA相相配對后，用于翻譯的配對后，用于翻譯的 mRNA的量就大大減少，因的量就大大減少，因而合成的蛋白質(zhì)的量也相應大大減少。引入的反義序列也可能與基因組義序列也可能與基因組 DNA雜交，從而阻遏雜交，從而阻遏mRNA的產(chǎn)生，這兩種情況都會使細胞中靶基因的產(chǎn)生，這兩種情況都會使細胞中靶基因編碼的蛋白合成大大減少。一、反義療法中亟待解決的問題：一、反義療法中亟待解決的問題：223。技術(shù)。 在原核細胞、體外培養(yǎng)細胞和植物中較成在原核細胞、體外培養(yǎng)細胞和植物中較成功，而在動物上應用基因治療的難度還存功，而在動物上應用基因治療的難度還存在非常大的困難。①① 安全性問題安全性問題? 副作用，影響蛋白質(zhì)的正常功能。223。同時，注射寡核昔酸后，可引起受試動物的白細胞總數(shù)暫時性下降，血壓、心率發(fā)生變化。另外反義藥物容易在受試動物的肝、腎和骨髓中聚集、沉積，其長期效應目前尚不能確定。干擾正常的基因表達調(diào)控。? 要考慮到人體內(nèi)要考慮到人體內(nèi) RNA酶和酶和 DNA酶的降解作酶的降解作用。二、二、 反義藥物的轉(zhuǎn)移方法：反義藥物的轉(zhuǎn)移方法：①① 直接注射法：注射到靶細胞。②② 載體導入法：附加體（載體導入法：附加體（ episome）載體系統(tǒng)。③③ 受體介導法：受體介導的胞吞作用，具特異性、受體介導法：受體介導的胞吞作用，具特異性、專一性強、轉(zhuǎn)移效率高。三、三、 干擾干擾 RNA分子分子223。而且這種所謂的基因 “ 沉默 ” 是可逆的，因為DNA并沒有發(fā)生變化。 導人雙鏈 RNA分子后，雙鏈RNA分子被切成 2123個核昔酸長的單鏈RNA片段，這些短的 RNA片段結(jié)合在目的mRNA分子上并導致其分子斷裂。 核酶（核酶（ ribozyme）） ———— 是指具有催化裂解活性的是指具有催化裂解活性的RNA分子。223。年獲得諾貝爾化學獎。 催化功能：催化功能：①① 催化催化 RNA的裂解；的裂解；②② 催化催化 RNA分子間的轉(zhuǎn)核苷酰反應（核苷酸轉(zhuǎn)移酶活分子間的轉(zhuǎn)核苷酰反應（核苷酸轉(zhuǎn)移酶活性）；性）；③③ 催化催化 RNA的水解反應（的水解反應（ RNA限制性內(nèi)切酶活性）；限制性內(nèi)切酶活性）；④④ 催化催化 RNA的連接反應（的連接反應（ RNA聚合酶活性）；聚合酶活性）；⑤⑤ 催化淀粉的分枝反應（分枝酶活性）；催化淀粉的分枝反應（分枝酶活性）；⑥⑥ 具有肽轉(zhuǎn)移酶活性；具有肽轉(zhuǎn)移酶活性；⑦⑦ 催化氨基酸與催化氨基酸與 tRNA之間的酯鍵的水解。二、核酶在基因治療中的作用：二、核酶在基因治療中的作用：223。由于錘頭結(jié)構(gòu)的結(jié)構(gòu)較為簡單，設計基因治療。應用最廣的核酶。 由于核酶本身是一個由于核酶本身是一個 RNA分子，非常容易被體內(nèi)分子，非常容易被體內(nèi)的的 RNase所破壞，所以核酶不能直接作為藥物來所破壞，所以核酶不能直接作為藥物來使用，因而只能通過分子生物學的方法將其轉(zhuǎn)入使用，因而只能通過分子生物學的方法將其轉(zhuǎn)入細胞。223。具。 從理論上講，利用核酶可以區(qū)別正?；蚝桶┗鶑睦碚撋现v，利用核酶可以區(qū)別正?；蚝桶┗蛑g小到一個核苷酸的區(qū)別。體外實驗表明，核酶能破壞突變的癌基因核酶能破壞突變的癌基因 ras的轉(zhuǎn)錄，因此如果能的轉(zhuǎn)錄，因此如果能找到合適的載體，核酶應用于癌癥的基因治療是找到合適的載體，核酶應用于癌癥的基因治療是大有希望的。223。好。 核酶的本質(zhì)是核酶的本質(zhì)是 RNA，其表達過程不涉及到翻譯過，其表達過程不涉及到翻譯過程，因此傳統(tǒng)的表達載體就不再適用了。在核酶的表達載體中常利用核內(nèi)小的表達載體中常利用核內(nèi)小 RNA（（ snRNA）的轉(zhuǎn)）的轉(zhuǎn)錄單位來啟動核酶的轉(zhuǎn)錄。這種轉(zhuǎn)錄單位可以保證核酶大量連續(xù)轉(zhuǎn)錄，每個細胞中可積累高達證核酶大量連續(xù)轉(zhuǎn)錄，每個細胞中可積累高達 106拷貝的核酶。223。體。治療過程中便于操作。 國際上已批準了國際上已批準了 130多種基因治療方案，其中多種基因治療方案，其中 70%是針對癌癥。目前基因治療中常用的治療性的基因主要有以下因主要有以下 3類：類：①① 直接殺傷或抑制癌細胞生長的基因，包括抑癌基因、癌直接殺傷或抑制癌細胞生長的基因，包括抑癌基因、癌基因的反義序列、編程性細胞死亡基因等；基因的反義序列、編程性細胞死亡基因等；②② 可提高免疫系統(tǒng)能力的基因，如細胞因子的編碼基因等可提高免疫系統(tǒng)能力的基因，如細胞因子的編碼基因等；；③③ 多種藥物的耐藥性基因，轉(zhuǎn)入這種基因的主要目的是提多種藥物的耐藥性基因，轉(zhuǎn)入這種基因的主要目的是提高造血細胞及其他細胞對放療、化療及其他抗癌藥物高造血細胞及其他細胞對放療、化療及其他抗癌藥物的耐受性。一、導入抑癌基因的基因治療一、導入抑癌基因的基因治療223。兩個抑癌基因的的突變或異常表達或異常失活?；蚨既笔Щ蛲蛔?。 在正常細胞中都有原癌基因存在。正常嚴格的精細調(diào)控。223。在反義療法中，癌基因常被可能導致腫瘤發(fā)生。制腫瘤的生長。 將將 “自殺自殺 ”基因?qū)爰毎幕蛑委煹姆椒ㄗ畛跏腔驅(qū)爰毎幕蛑委煹姆椒ㄗ畛跏怯捎?Moolten提出，其原理是將一種基因轉(zhuǎn)入癌細胞提出，其原理是將一種基因轉(zhuǎn)入癌細胞，這種基因編碼的蛋白能把無害的藥物前體（，這種基因編碼的蛋白能把無害的藥物前體（prodrug）轉(zhuǎn)變?yōu)橛卸疚镔|(zhì)，從而將癌變的細胞殺）轉(zhuǎn)變?yōu)橛卸疚镔|(zhì)，從而將癌變的細胞殺死。223。胸苷激酶基因（）。癌癥治療研究中比較活躍的領域。 將編碼細胞因子的基因通過合適的載體導入腫瘤將編碼細胞因子的基因通過合適的載體導入腫瘤細胞并在其中表達，可以增強機體的免疫能力。223。治療人黑色素瘤和腎癌方面有一定療效。 可以提高人免疫系統(tǒng)對于腫瘤細胞的認別能力，可以提高人免疫系統(tǒng)對于腫瘤細胞的認別能力，從而誘導產(chǎn)生針對于腫瘤細胞的免疫反應，達到從而誘導產(chǎn)生針對于腫瘤細胞的免疫反應，達到殺傷腫瘤細胞的目的。六、導入六、導入 MDR 1基因進行基因治療基因進行基因治療223。放療、化療的耐受能力。 腫瘤細胞逃避免疫系統(tǒng)的另一種辦法是它沒有有腫瘤細胞逃避免疫系統(tǒng)的另一種辦法是它沒有有效的抗原呈遞系統(tǒng)，不能給免疫系統(tǒng)提供足夠的效的抗原呈遞系統(tǒng)，不能給免疫系統(tǒng)提供足夠的免疫信號。因此人們設想可以通過把腫瘤細胞與免疫細胞進行融合，從而使腫瘤抗原能夠有效呈免疫細胞進行融合，從而使腫瘤抗原能夠有效呈遞。第八節(jié)第八節(jié) 其他疾病的基因治療其他疾病的基因治療1. 艾滋病的治療艾滋病的治療222。）患者。 致病原因：致病原因：①① 受體的突變，從而使信息傳遞紊亂；受體的突變，從而使信息傳遞紊亂；②② 酶的突變，從而使相關的代謝紊亂或細胞受到酶的突變，從而使相關的代謝紊亂或細胞受到毒害；毒害；③③ DNA結(jié)合蛋白、神經(jīng)髓鞘蛋白、細胞骨架蛋白結(jié)合蛋白、神經(jīng)髓鞘蛋白、細胞骨架蛋白等的突變；等的突變；④④ 原癌基因的激活或抑癌基因的失活；原癌基因的激活或抑癌基因的失活；⑤⑤ 離子通道蛋白突變，導致相關的膜興奮失調(diào)。223。有展而造成的。因而引起的。 是一種發(fā)生于中老年期的慢性神經(jīng)系統(tǒng)退化性疾是一種發(fā)生于中老年期的慢性神經(jīng)系統(tǒng)退化性疾病。病。第九節(jié)第九節(jié) 基因治療的前景基因治療的前景一、基因治療的倫理和社會問題一、基因治療的倫理和社會問題二、基因治療的技術(shù)問題二、基因治療的技術(shù)問題三、基因治療的展望三、基因治療的展望思考題：思考題：4. 目前有哪些基因治療方式？各有什么特點？目前有哪些基因治療方式？各有什么特點？5. 目前基因治療中常用的治療性的基因有哪幾類目前基因治療中常用的治療性的基因有哪幾類？？6. 癌癥的基因治療有哪些方案？癌癥的基因治療有哪些方案？7. 基因治療的前景如何？存在哪些問題？基因治療的前景如何？存在哪些問題？謝謝觀看 /歡迎下載BY FAITH I MEAN A VISION OF GOOD ONE CHERISHES AND THE ENTHUSIASM THAT PUSHES ONE TO SEEK ITS FULFILLMENT REGARDLESS OF OBSTACLES. BY FAITH I BY FAIT