實(shí)驗(yàn)三--dna的瓊脂糖凝膠電泳-閱讀頁(yè)
2024-08-23 16:05本頁(yè)面
【正文】 ，整個(gè)分子帶正電； pH8左右時(shí)，整個(gè)分子帶負(fù)電。由于糖 磷酸骨架在結(jié)構(gòu)上的重復(fù)性質(zhì)，相同數(shù)量的雙鏈 DNA幾乎具有等量的凈電荷，因此它們能以同樣的速度向正電極方向遷移。 DNA分子的遷移速度與相對(duì)分子質(zhì)量的對(duì)數(shù)值成反比關(guān)系，可以近似用于估算分子的大小。共價(jià)閉環(huán)超螺旋 DNA＞直線DNA＞開(kāi)環(huán)的雙鏈環(huán)狀 DNA。反之，濃度降低，孔隙就增大，其分辨能力也就隨之減弱。 瓊脂糖凝膠分辨 DNA片段的范圍為 ~50kb之間 7 EB(溴化乙錠 ) 能插入 DNA分子堿基對(duì)之間 ， 導(dǎo)致 EB與 DNA結(jié)合 。 電泳時(shí)所需 DNA樣品量?jī)H ～ 1μg . EB染料優(yōu)點(diǎn)：染色操作簡(jiǎn)便 ， 快速 ， 室溫下1520min；不會(huì)使核酸斷裂；靈敏度高 ， 10ng或更少的 DNA即可檢出；可以加到樣品中或膠中 。 EB廢液要經(jīng)過(guò)處理才能丟棄
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