紫光光譜法測(cè)定生姜中黃酮的含量畢業(yè)論文-閱讀頁(yè)
2025-07-07 08:00本頁(yè)面
【正文】 原料內(nèi)部，提取效果好于水提取法；超聲波提取法效果也很好，但設(shè)備不常用，實(shí)驗(yàn)時(shí)受到限制。本實(shí)驗(yàn)采用單因素試驗(yàn)來(lái)確定生姜中黃酮的最佳提取工藝條件。黃酮類(lèi)物質(zhì)是以2一苯基并吡喃酮為母核的多基化合物，可與糖甙類(lèi)物質(zhì)遇堿變成明顯黃色，其機(jī)制是黃酮類(lèi)物質(zhì)在堿性條件下其苯吡喃酮的１，２碳之間的Ｃ—Ｏ鍵打開(kāi)成查爾酮的檢測(cè)方法常用分光光度計(jì)法或液相色譜法。黃色的深淺與黃酮含量呈一定的比例關(guān)系，可以蕓香葉苷（標(biāo)準(zhǔn)樣）作標(biāo)準(zhǔn)，于507nm波長(zhǎng)處比色定量測(cè)定。取待測(cè)溶液5mL于容量瓶中，加入5%，加入10%，再加入4%的氫氧化鈉溶液10ml，用30%乙醇溶液稀釋至刻度，搖勻，10min后于最大吸收波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，試劑作為空白參比。因此，在不同濃度下，不同溫度下，不同時(shí)間分別測(cè)定其吸光度。 標(biāo)準(zhǔn)工作曲線(xiàn)的繪制 g。用30%乙醇稀釋至刻度，13 min后用紫外分光光度法得到最大吸收波長(zhǎng)后，再在最大吸收波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，試劑為空白參比。 生姜中黃酮單因素實(shí)驗(yàn) 生姜中黃酮提取參數(shù)的確定固定其它因素的條件下，以乙醇濃度為60%、70%、80%、90%；料液比為1：11：1：21：30；浸提時(shí)間為2 h、3 h、4 h、5 h；浸提溫度為40℃、50℃、60℃、70℃做四個(gè)單因素試驗(yàn)，再根據(jù)各個(gè)單因素試驗(yàn)得出最佳條件，進(jìn)行比對(duì)，得出最佳提取工藝條件。每個(gè)都重復(fù)測(cè)定三次。每個(gè)都重復(fù)測(cè)定三次。每個(gè)都重復(fù)測(cè)定三次。每個(gè)都重復(fù)測(cè)定三次。參照單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果，以影響黃酮提取率的乙醇濃度、固液比、提取溫度、提取時(shí)間為四個(gè)影響因素，進(jìn)行比對(duì)，最后取乙醇為提取劑的生姜黃酮的最佳提取工藝條件是乙醇濃度為80%，固液比為1：25。 重現(xiàn)性實(shí)驗(yàn)精確稱(chēng)取4份生姜粉（ g）分別加入到80%的乙醇溶液75mL（固液比為1：25），在70℃的恒溫水浴鍋中提取5 h，過(guò)濾冷卻之后， mL提取液置于50mL容量瓶中，然后分別加入5%的亞硝酸鈉溶液、10%的硝酸鋁溶液、4%的氫氧化鈉溶液，定容之后進(jìn)行測(cè)定。 加標(biāo)回收率實(shí)驗(yàn)分別取80%的乙醇75 g生姜粉在恒溫60℃下回流5 mL于三只容量瓶中，%的亞硝酸鈉溶液， mL10%的硝酸鋁溶液，再加入10mL4%的氫氧化鈉溶液，用30%的乙醇定容，測(cè)定其吸光度。3 結(jié)果與分析 顯色劑對(duì)吸光度的影響 顯色劑的濃度對(duì)吸光度的影響 在不同的濃度的硝酸鋁的顯色劑條件下測(cè)定蕓香葉苷的吸光度，如圖1： 圖1 不同濃度的硝酸鋁下的吸光度由圖1表明：顯色劑硝酸鋁在5%的條件下吸光度最大。 不同濃度的氫氧化鈉的條件下對(duì)吸光度的影響 在不同濃度的氫氧化鈉的條件下測(cè)得的吸光度如圖3： 圖3 不同濃度的氫氧化鈉下測(cè)得的吸光度 由圖3表明：在4%的氫氧化鈉的條件下測(cè)得的吸光度最大。 吸收曲線(xiàn)用配制好濃度的蕓香葉苷用于測(cè)定其最大吸收波長(zhǎng)，如圖5： 圖5 蕓香葉苷的吸收曲線(xiàn) 圖1 表明，最大吸收波長(zhǎng)為507 nm. 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的繪制測(cè)得的最大吸收波長(zhǎng)為507 nm，然后在最大吸收波長(zhǎng)下測(cè)定不同濃度下的蕓香葉苷的吸光度，如表1： 表1 不同濃度的蕓香葉苷的吸光度序號(hào)吸光度蕓香葉苷濃度g/L 1 0 2 3 4 5 6 以蕓香葉苷濃度為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)畫(huà)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，如圖2： 圖2 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn) 回流生姜最佳工作條件的選擇因只為求得生姜回流得到黃酮的得率最大。 濃度的選擇不同濃度的乙醇溶液60 g生姜粉在磁力攪拌恒溫水浴鍋中60℃回流4個(gè)小時(shí)的條件下測(cè)得的吸光度，結(jié)果見(jiàn)表2：表2 不同乙醇濃度下的吸光度實(shí)驗(yàn)名稱(chēng) 吸光度 平均值60%乙醇 70%乙醇 80%乙醇 90%乙醇表2表明，隨著乙醇濃度的提高，黃酮的吸光度呈上升趨勢(shì)，但大于80%后隨濃度進(jìn)一步的提高，黃酮的吸光度反而有所下降，所以在乙醇濃度為80%時(shí)回流得到的黃酮測(cè)得的吸光度最大。 溫度的選擇80%的乙醇溶液60 g生姜粉在磁力攪拌恒溫水浴鍋中不同恒溫下回流4個(gè)小時(shí)的條件下測(cè)得的吸光度，結(jié)果見(jiàn)表3：表3不同回流溫度下的吸光度實(shí)驗(yàn)名稱(chēng) 吸光度平均值恒溫40℃恒溫50℃恒溫60℃恒溫70℃ 表3表明，隨著提取溫度的提高，黃酮的吸光度呈上升趨勢(shì)，但考慮到提取溫度過(guò)高會(huì)對(duì)提取液中的黃酮類(lèi)化合物的活性造成破壞，同時(shí)高溫提取耗能也較大，因此，提取溫度最好不要超過(guò)80℃。 固液比的選擇不同體積的80% g生姜粉在磁力攪拌恒溫水浴鍋中恒溫60℃下回流4小時(shí)的條件下測(cè)得的吸光度，結(jié)果見(jiàn)表5：表5 同料液比下的吸光度實(shí)驗(yàn)名稱(chēng)吸光度 平均值料液比1：15料液比1：20料液比1：25料液比1：30表5表明，隨著固液比的升高，吸光度也隨之增大，達(dá)到1：20時(shí)黃酮的吸光度增加緩慢。由表11測(cè)定數(shù)據(jù)，%符合測(cè)定要求，試驗(yàn)方法的準(zhǔn)確度令人滿(mǎn)意。在專(zhuān)業(yè)知識(shí)方面，這是我第一次相對(duì)獨(dú)立地完成一個(gè)課題的分析研究，將平日課堂所學(xué)的理論應(yīng)用于實(shí)際的研究中，使我對(duì)理論知識(shí)有了更深刻的認(rèn)識(shí)和見(jiàn)解。在論文的完成中，我對(duì)以前相關(guān)課程所學(xué)的信息收集和處理的方法有了更深的理解體會(huì)，這對(duì)于我們今后的學(xué)習(xí)和生活是很有意義的。一個(gè)個(gè)問(wèn)題分析解決的過(guò)程對(duì)自己都意味著收獲，這些寶貴的經(jīng)驗(yàn)令我再遇到相關(guān)問(wèn)題和困難時(shí)更為從容和自信。首先感謝認(rèn)真、負(fù)責(zé)的何錫輝老師對(duì)本論文從選題、構(gòu)思、資料收集、實(shí)驗(yàn)研究等各個(gè)環(huán)節(jié)給予的細(xì)心指導(dǎo)和建議, 在論文的撰寫(xiě)過(guò)程中又承蒙導(dǎo)師的細(xì)心指導(dǎo)、詳細(xì)審閱和反復(fù)修改，在此特別向我的導(dǎo)師何錫輝副教授致以崇高的敬意和衷心的感謝。另外，在大學(xué)四年的生活中，我不斷得到各位老師、同學(xué)的關(guān)心與幫助，使我在學(xué)習(xí)和生活中得到友誼的溫暖與關(guān)懷，謝謝一直支持我的親人，和所有幫助我的老師、關(guān)心我的朋友，向你們致以衷心的感謝和崇高的敬意！最后，我要向在百忙之中抽時(shí)間對(duì)本文進(jìn)行審閱、評(píng)議和參加本人論文答辯的各位老師，各位同學(xué)表達(dá)我誠(chéng)摯的謝意
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