病毒感染的檢查方法與防治原則-閱讀頁
2025-06-10 13:47本頁面
【正文】 增殖， CPE（＋） ＋ 人胚腎細胞 風(fēng)疹病毒 ？ ?？刹《? CPE()—— ?？刹《?() 風(fēng)疹病毒 (+) CPE(+)—— ?？刹《?(+) 風(fēng)疹病毒 () 4. 病毒的分離培養(yǎng)與鑒定 : ? 病毒的分離培養(yǎng) ? 病毒的鑒定 ? 病毒數(shù)量及感染性測定 病毒數(shù)量及感染性測定： 蝕 (空 )斑形成試驗 50%組織細胞感染量 病毒總量 (活病毒 +死病毒 )： 感染性病毒量 : 血凝試驗 蝕 (空 )斑形成試驗 （ plaque assay） 原理： 適當(dāng)濃度的感染性病毒在覆蓋瓊 脂的細胞層上產(chǎn)生可見和可數(shù)的局部病 灶稱為 蝕 斑。 PLAQUE ASSAY PLAQUE ASSAY PLAQUE ASSAY 分別為 10 10 103倍稀釋度的 HCMV病毒液感染的 HEL細胞 蝕 (空 )斑形成試驗 （ plaque assay） 用途： ? 測定感染性病毒量 單位 : PFU (plaque forming unit)/ml 由一個感染性病毒顆粒增殖而形成的一個空斑稱為空斑形成單位。 方法 :一般是將病毒懸液作 10倍的系列稀釋，分 別接種細胞，經(jīng)一定時間后觀察 CPE、血細胞吸 附等指標(biāo)，以能使 50%細胞感染的病毒的最高稀 釋度作為終點。 用途 : 測定感染性病毒的量和毒力 分別為 10 10 10 10 10 106倍稀釋度的 HCMV感染的 HEL細胞 50%組織細胞感染量 (TCID50) ? 香港大學(xué)專家：患者鼻咽標(biāo)本 → Vero細胞培養(yǎng)→ CPE → EM觀察： 冠狀病毒 ? 隨后加拿大和美國 CDC等 SARS國際協(xié)作組的多個實驗室也培養(yǎng)出了 冠狀病毒 ? 利用 ‘ 免疫熒光法 ’ 將分離病毒與 SARS患者血清進行 血清學(xué)檢測 ，反應(yīng)呈 陽性 ? 從冠狀病毒基因組的保守區(qū)設(shè)計引物，采用RTPCR方法從培養(yǎng)上清中擴增出了 冠狀病毒基因 → 測序 → 經(jīng) Genbank數(shù)據(jù)庫同源性比對，収現(xiàn)同源性為 64%左右 SARS冠狀病毒的分離和鑒定 ? 加拿大專家完成了全基因組測序 → 収現(xiàn)與已知人和動物的冠狀病毒的同源性差異較大 → 確定為 一種新的冠
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