分子生物學復習題-閱讀頁
2025-05-01 23:40本頁面
【正文】 析mRNA的方法，基本原理是通過熒光染料標記后獲得熒光強度就可以計算模板DNA或者是mRNA的含量。 二 擴增完后不需要將PCR產(chǎn)物從管中取出，可以減少污染的機會，降低假陽性結果；而傳統(tǒng)PCR產(chǎn)物需要凝膠電泳。PCRSSCP：是一種基于DNA單鏈構象多態(tài)性的基因診斷技術，原理：首先利用PCR擴增目的DNA，然后將擴增產(chǎn)物進行非變性 PAGE，可測定DNA堿基序列有無變異，具有簡便，快速，靈敏的優(yōu)點，易于大量樣本的篩選，可以檢測，診斷突變基因的有無。問答題 1蛋白質的超二級結構與結構域的異同？ 蛋白質的超二級結構是指多肽鏈內順序上互相靠近的二級結構單元在空間上進一步靠近，彼此相互作用，形成有規(guī)則的二級結構聚集體。 超二級結構可形成緊密、穩(wěn)定而且在蛋白質分子構象上明顯可分的區(qū)域，稱為結構域，而結構域之間的肽鏈松散、彎曲，形成分子內裂隙結構，這種結構常常是蛋白質活性中心和變構中心所在處，他有利于酶和底物結合并產(chǎn)生應力，也有利于與調節(jié)物的結合，產(chǎn)生變構效應。 2糖蛋白分子中糖鏈的主要連接方式？ 一 O連接型：糖在多肽鏈上的連接點是: Ser 、 Thr 、 Hyp 、 Hyl殘基上的OH ，有以下幾種： (1)OGalNAc α1Ser/Thr (2)OGlcNAc α1Ser/Thr() (3)OFuc β1Ser/Thr(表皮生長因子樣蛋白) (4)OXyl β1Ser (人甲狀腺球蛋白) (5)OHyl Galβ1Hyl (單糖/) (6)OHyp Araβ1Hyp (植物/) 二N連接型：多肽鏈上的連接點: Asnγ位的酰胺N原子，分為： (1)NGlcNAc（β1位羥基） ，(2)NGalNAc罕見,只見于嗜鹽菌細胞表面 (3)NGlc 理化性質：親水，多羥基，硫酸根，凝膠，負電荷 3 兩例糖蛋白與醫(yī)學的關系？ 一 與腫瘤的關系：研究發(fā)現(xiàn),惡性腫瘤細胞糖蛋白的聚糖鏈有明顯改變，主要變化是NGlcNAc連接型聚糖鏈出現(xiàn)：，(Gal β1→4GlcNAc β1→3)n， 。 4糖胺聚糖結構特點，理化性質？ 糖胺聚糖(GAG)是蛋白聚糖分子中的主要成分,典型結構特點是：具有由氨基己糖與己糖醛酸或半乳糖交替排列形成的二糖重復單位。上述糖基常常被硫酸化修飾。 一 膜受體 1環(huán)狀受體：即配體依賴性離子通道，受體配體結合激活離子通道。 2七個跨膜α螺旋受體：胞漿面第三個環(huán)能與鳥苷酸結合蛋白相偶聯(lián)的受體，比如：磷脂酶C型G蛋白 3單個跨膜α螺旋受體：，本身具有酪氨酸激酶的活性，比如：胰島素受體，表皮生長因子受體。 二 胞內受體 1胞漿受體：受體在胞漿中，與激素結合后將激素轉移到核內發(fā)揮作用，比如：糖皮質激素受體。 6 細胞間信息作用的方式？ 旁分泌——信息分子僅通過組織液擴散作用于臨近的細胞，比如：生長抑素 突觸分泌——神經(jīng)細胞釋放神經(jīng)遞質的方式，比如：乙酰膽堿的釋放 2 Ca離子激活Ca2+CaM依賴性蛋白激酶途徑，Ca2+與CaM結合使CaM構象改變，可以激活 CaM－PK，后者誘導絲/蘇氨酸殘基磷酸化。 不同點：在結構上AC是多個跨膜的α螺旋，而GC是單個跨膜的α螺旋；AC 產(chǎn)生的第二信使是cAMP, GC 則是cGMP；GC在膜靠細胞外有配體結合域，結構類似與酪氨酸蛋白激酶，既是膜受體，同時又具有蛋白激酶的活性，而AC沒有膜靠細胞外的配體結合域，只有催化結構域的催化作用。 二級包裝 螺線管纖維的形成：由6個核小體盤繞形成一種中空螺線管，螺線管的形成使DNA又壓縮6倍。 10 假基因及其特點 在多基因家族中，無功能的基因稱為假基因，假基因是一段重復的DNA序列，與功能基因同源，其功能的喪失可能是由突變造成的。 11 基因克隆常用的工具酶？ 限制性核酸內切酶，DNA聚合酶I 12 基因克隆載體選擇標準？ 1能自主復制；2具有兩個以上的遺傳標記物，便于重組體的篩選和鑒定；3有克隆位點，常具有多個單一酶切位點（多克隆位點）；4分子量小，以容納較大的外
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