分子生物學(xué)復(fù)習(xí)題-免費(fèi)閱讀
【正文】 11 基因克隆常用的工具酶？ 限制性核酸內(nèi)切酶，DNA聚合酶I 2 Ca離子激活Ca2+CaM依賴性蛋白激酶途徑，Ca2+與CaM結(jié)合使CaM構(gòu)象改變，可以激活 CaM－PK，后者誘導(dǎo)絲/蘇氨酸殘基磷酸化。 2七個(gè)跨膜α螺旋受體：胞漿面第三個(gè)環(huán)能與鳥(niǎo)苷酸結(jié)合蛋白相偶聯(lián)的受體，比如：磷脂酶C型G蛋白 3單個(gè)跨膜α螺旋受體：，本身具有酪氨酸激酶的活性，比如：胰島素受體，表皮生長(zhǎng)因子受體。 2糖蛋白分子中糖鏈的主要連接方式？ 一 O連接型：糖在多肽鏈上的連接點(diǎn)是: Ser 、 Thr 、 Hyp 、 Hyl殘基上的OH ，有以下幾種： (1)OGalNAc α1Ser/Thr (2)OGlcNAc α1Ser/Thr() (3)OFuc β1Ser/Thr(表皮生長(zhǎng)因子樣蛋白) (4)OXyl β1Ser (人甲狀腺球蛋白) (5)OHyl Galβ1Hyl (單糖/) (6)OHyp Araβ1Hyp (植物/) 二N連接型：多肽鏈上的連接點(diǎn): Asnγ位的酰胺N原子，分為： (1)NGlcNAc（β1位羥基） ，(2)NGalNAc罕見(jiàn),只見(jiàn)于嗜鹽菌細(xì)胞表面 (3)NGlc 理化性質(zhì)：親水，多羥基，硫酸根，凝膠，負(fù)電荷 3 兩例糖蛋白與醫(yī)學(xué)的關(guān)系？ 一 與腫瘤的關(guān)系：研究發(fā)現(xiàn),惡性腫瘤細(xì)胞糖蛋白的聚糖鏈有明顯改變，主要變化是NGlcNAc連接型聚糖鏈出現(xiàn)：，(Gal β1→4GlcNAc β1→3)n， 。 二 擴(kuò)增完后不需要將PCR產(chǎn)物從管中取出，可以減少污染的機(jī)會(huì)，降低假陽(yáng)性結(jié)果；而傳統(tǒng)PCR產(chǎn)物需要凝膠電泳。它是檢測(cè)特定基因表達(dá)水平的主要方法之一，也是用于鑒別，診斷RNA病毒的重要技術(shù)。G蛋白：是一類能和GDP或GTP結(jié)合、位于細(xì)胞膜胞漿面的蛋白質(zhì)，可分為GS（活化型）, Gi（抑制型），磷脂酶C型G蛋白，視覺(jué)傳導(dǎo)G蛋白，小G蛋白等。它廣泛分布與人和哺乳動(dòng)物的基因組中，是哺乳動(dòng)物基因組中含量最豐富的一種中度重復(fù)順序家族，在人基因組中重復(fù)達(dá)30萬(wàn)50萬(wàn)次。（二）、乳糖操縱子的作用機(jī)制？答：乳糖操縱子的組成：大腸桿菌乳糖操縱子含Z、Y、A三個(gè)結(jié)構(gòu)基因，分別編碼半乳糖苷酶、透酶和半乳糖苷乙酰轉(zhuǎn)移酶，此外還有一個(gè)操縱序列O，一個(gè)啟動(dòng)子P和一個(gè)調(diào)節(jié)基因I。4核酸探針：探針是指能與某種大分子發(fā)生特異性相互作用，并在相互作用之后可以檢測(cè)出來(lái)的生物大分子。 核酶：是一種可以催化RNA切割和RNA剪接反應(yīng)的由RNA組成的酶，可以作為基因表達(dá)和病毒復(fù)制的抑制劑。3病毒癌基因：存在于病毒（大多是逆轉(zhuǎn)錄病毒）基因組中能使靶細(xì)胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化的基因。3RFLP：即限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性，個(gè)體之間DNA的核苷酸序列存在差異，稱為DNA多態(tài)性。3癌基因：是細(xì)胞內(nèi)控制細(xì)胞生長(zhǎng)的基因，具有潛在的誘導(dǎo)細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化的特性。2定量PCR：基因表達(dá)涉及的轉(zhuǎn)錄水平的研究常需要對(duì)mRNA進(jìn)行定量測(cè)定，對(duì)此采用的PCR技術(shù)就叫定量PCR。1轉(zhuǎn)導(dǎo)：指以噬菌體為載體，在細(xì)菌之間轉(zhuǎn)移DNA的過(guò)程，有時(shí)也指在真核細(xì)胞之間通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)移和獲得細(xì)胞DNA的過(guò)程。1受體：是存在于靶細(xì)胞膜上或細(xì)胞內(nèi)能特異識(shí)別生物活性分子并與之結(jié)合，進(jìn)而發(fā)生生物學(xué)效應(yīng)的的特殊蛋白質(zhì)。包括啟動(dòng)子、上游啟動(dòng)子元件、增強(qiáng)子、加尾信號(hào)和一些反應(yīng)元件等。分子生物學(xué)復(fù)習(xí)題一、 反式作用因子：是指真核細(xì)胞內(nèi)含有的大量可以通過(guò)直接或間接結(jié)合順式作用元件而調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄活性的蛋白質(zhì)因子。1分子克隆：在體外對(duì)DNA分子按照即定目的和方案進(jìn)行人工重組，將重組分子導(dǎo)入合適宿主，使其在宿主中擴(kuò)增和繁殖，以獲得該DNA分子的大量拷貝。轉(zhuǎn)染：指病毒或以它為載體構(gòu)建的重組子導(dǎo)入真核細(xì)胞的過(guò)程。2基因打靶：是指通過(guò)DNA定點(diǎn)同源重組，改變基因組中的某一特定基因，從而在生物活體內(nèi)研究此基因的功能。當(dāng)癌基因結(jié)構(gòu)或表達(dá)發(fā)生異常時(shí)，其產(chǎn)物可使細(xì)胞無(wú)限制增殖，導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生。若因此而改變了限制性內(nèi)切酶的酶切位點(diǎn)則可導(dǎo)致相應(yīng)的限制性片段的長(zhǎng)度和數(shù)量發(fā)生變化，稱為RFLP
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