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微生物實驗論文-閱讀頁

2025-04-19 23:25本頁面
  

【正文】 OD600值大小,評價對菌體生長量的影響。計算各樣品吸光度大小酶活力。 A空白管— A測定管A空白管( )1151510比較各發(fā)酵菌液酶活力,判斷哪種培養(yǎng)條件下酶活力最高。(二) 誘變:取出培養(yǎng)約24h 的搖瓶,分別取1ml菌懸液(吸取前三角瓶要搖勻)于2個離心管中,5000 r/min離心5min,棄去上清液,將菌體用無菌生理鹽水洗滌2次。3. 誘變處理:(1)開啟紫外燈預(yù)熱1020 min。(3)稀釋菌液:在超凈臺內(nèi),將照射后的菌懸液用無菌水按10倍稀釋法依次稀釋成10^110^5(dorf管中稀釋)。以同樣的操作,取未經(jīng)紫外線處理的菌懸液稀釋涂布平板作為對照。 (三)計算成活率和致死率1. 存活率:將培養(yǎng)48 h 后的平板取出進行細胞計數(shù)。2.致死率:將培養(yǎng)48 h 后的平板取出進行細胞計數(shù)。(四)觀察誘變效應(yīng)在平板菌類計數(shù)后,分別向菌落數(shù)在56個左右的平板內(nèi)加入碘液,分別測量透明圈直徑與菌落直徑并計算比值(H/C值),與對照平板進行比較(紫外照射和對照組隨機選出6個算平均值)。2結(jié)果與分析 細菌的分離與鑒定:在10^3的培養(yǎng)基上典型的菌落有12個分別編號1~12;在10^4的培養(yǎng)基中有7個分別編號為13~19;在劃線培養(yǎng)基中有5個分別編號為20~24。計算其H/C值得表如下:菌落號513171821水解圈直徑(H)mm菌落直徑(C)mmH/C值得13號菌株為最佳菌株。革蘭氏染色為紫色,說明為陽性菌。瓊脂凝膠電泳結(jié)果:泳動較慢,說明該菌的DNA分子的分子量較大。:OD600值計算:測得的OD600的值如下:試管號123456OD600值可得試管2、5中的菌體生長量較大。(在測量酶活時由于把寫有編號的試管塞取了下來,導(dǎo)致編號順序錯誤,以上的編號為離心管的編號。)綜合以上兩組數(shù)據(jù)知:該菌株的最佳培養(yǎng)條件是40℃,PH=,氮源為硝酸鈉,碳源為淀粉。紫外線照射處理結(jié)果:稀釋度10^310^4菌落數(shù)218復(fù)篩得到產(chǎn)淀粉酶的高產(chǎn)菌株
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