[小學(xué)教育]1核酸結(jié)構(gòu)_性質(zhì)與功能-閱讀頁
2025-04-06 06:50本頁面
【正文】 NA (snRNA) 參與 hnRNA剪接，包括 U U U UU6 核仁小 RNA small nucleolar RNA (snoRNA) 參與 rRNA核糖 C2’的甲基化 胞質(zhì)小 RNA small cytoplamsic RNA (scRNA) 催化小 RNA small catalytic RNA RNA剪接，包括核酶等 小干擾 RNA small interference RNA(siRNA) 參與轉(zhuǎn)錄后調(diào)節(jié)；對外源入侵 RNA基因的切割 （一）核內(nèi)小 RNA與核糖核蛋白結(jié)合共同參與 mRNA前體加工 snRNA 長度（ nt） 剪接 hnRNA的靶位點(diǎn) U1 U2 U4 U5 U6 U7 165 189 145 115 106 63 5?端 內(nèi)含子腺苷酸分支點(diǎn) 5?端，補(bǔ)充分支點(diǎn) 轉(zhuǎn)酯化反應(yīng)， 3?剪接點(diǎn)， 使外顯子連接 轉(zhuǎn)酯化反應(yīng) 組蛋白 H3前體的 mRNA3?末端裂解 高等真核細(xì)胞 snRNA的特征 （二）催化性小 RNA參與 RNA剪接加工 一些小 RNA分子具有催化特定 RNA降解的活性 ，在 RNA合成后的剪接中具有重要作用 。 （三）核仁小 RNA參與 rRNA甲基化修飾 （四）小干擾 RNA特異阻斷體內(nèi)同源基因的表達(dá) 核酸的理化性質(zhì) The Physical and Chemical Characters of Nucleic Acid ? 核酸的 酸堿及溶解度性質(zhì) – 核酸為多元酸，具有較強(qiáng)的酸性 。 （一）核酸可被酸、堿水解 NHNNHNONH2NHNNNO HNH2GNHNHOONNO HOHUNHNHOOC H3NNO HOHC H3TNNNHNN H2NHNNHNN HANNHN H2ONHNHN HOC（二）核酸是兩性分子 ? 堿基可發(fā)生互變異構(gòu) ? 堿基在體液環(huán)境中以堿性解離為主 ? 核酸分子是酸性化合物 （三）核酸溶液具有高分子性質(zhì) ? 黏滯度 ： DNA 〉 RNA dsDNA 〉 ssDNA ? 沉降系數(shù) ： 溶液中的核酸在離心力場中可下沉。 （四）核酸具有紫外線吸收特性 ? 核酸的紫外吸收（ OD260） 單核苷酸 〉 ssDNA（或 RNA） 〉 dsDNA 腺嘌呤 1. DNA或 RNA的定量 A260= 50μg/ml雙鏈 DNA 40μg/ml單鏈 DNA（或 RNA） 20μg/ml寡核苷酸 2. 判斷核酸樣品的純度 DNA純品 : A260/A280 = RNA純品 : A260/A280 = A260的應(yīng)用 二、核酸 變性、復(fù)性是很多分子生物學(xué)技術(shù)操作的基礎(chǔ) 定義 ： 核酸的變性（ denaturation）指DNA雙螺旋之間的氫鍵斷裂變成單鏈、或 RNA局部氫鍵斷裂變成線性單鏈結(jié)構(gòu)的過程 （一）核酸變性是雙鏈解離為單鏈的過程 方法： 過量酸，堿，加熱，變性試劑如尿素以及某些有機(jī)溶劑如乙醇、丙酮等 變性后其它理化性質(zhì)變化： A260增高 粘度下降 比旋度下降 浮力密度升高 酸堿滴定曲線改變 生物活性喪失 DNA變性的本質(zhì)是雙鏈間氫鍵的斷裂 （二）核酸變性時伴有增色效應(yīng) DNA的紫外吸收光譜 ?增色效應(yīng)： DNA變性時其溶液 A260增高的現(xiàn)象 。 融 解 溫 度 Tm7 6 1 0 0 C9 69 28 88 48 00 . 5 00 . 7 00 . 6 50 . 6 00 . 5 5光密度（260nm）5 0 %5 0 %? Tm： 變性是在一個相當(dāng)窄的溫度范圍內(nèi)完成 ， 在這一范圍內(nèi) ， 紫外光吸收值達(dá)到最大值的 50%時的溫度稱為 DNA的解鏈溫度 ， 又稱 熔 解 溫 度 (melting temperature, Tm)。 Tm值的經(jīng)驗(yàn)公式是： Tm = +（ %G+C） （三）變性的 DNA可以復(fù)性 DNA復(fù)性 (renaturation)的定義 當(dāng)變性條件緩慢地除去后，兩條解離的互補(bǔ)單鏈可重新配對結(jié)合成為雙螺旋結(jié)構(gòu)，或恢復(fù)局部雙螺旋結(jié)構(gòu)。 減色效應(yīng) DNA復(fù)性時，其溶液 A260降低。 （四）利用變性、復(fù)性可進(jìn)行分子雜交 將不同來源的 DNA混合在一起 ， 經(jīng)熱變性后 ， 讓其慢慢冷卻復(fù)性 。 雜化雙鏈可以在不同的 DNA單鏈之間形成 ，也可在 RNA單鏈之間形成 ， 還可以在 DNA單鏈和 RNA單鏈之間形成 ， 其前提條件是兩種單鏈分子之間存在著一定程度的堿基配對關(guān)系 。 DNADNA 雜交雙鏈分子 變性 復(fù)性 不同來源的DNA分子 核酸分子雜交的應(yīng)用 （ 1） Southern印跡 可檢測 DNA （ 2） Northern印跡 用于檢測 RNA 此外， 斑點(diǎn)印跡雜交 (Dot blot)和 DNA芯片 (DNA micray)技術(shù)也是 利用核酸雜交原理設(shè)計的
環(huán)評公示相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號-1