【正文】 δ 和 ε 五種 DNA聚合酶 。 （ 二 ） 引發(fā)酶 —— 催化合成 RNA引物 。 （ 三 ） DNA連接酶 —— 連接岡崎片斷 。 （ 五 ） 解鏈酶 —— 解開 DNA雙鏈 。 三 、 DNA復(fù)制的一般過程 （一） DNA復(fù)制的起始 （二） DNA復(fù)制的延伸 DNA復(fù)制叉 前移 （二） DNA復(fù)制的延伸 后隨鏈的合成 （三） DNA復(fù)制的終止 ? 環(huán)狀 DNA單向復(fù)制終止于復(fù)制起點附近。 ? RNA引物切除 ? 缺口補齊 ? 岡崎片段連接 ? 恢復(fù)超螺旋 四 、 原核生物和真核生物 DNA的復(fù)制特點 （ 一 ） 復(fù)制的起點和速率 通常細(xì)菌等原核生物只要一個復(fù)制起點 ， 真核生物有很多個復(fù)制起點 。 轉(zhuǎn)錄與復(fù)制的差別： 。 ， 稱為模板鏈或反義鏈 ， 而另一條稱為有意義鏈或編碼鏈 。 ， 不需要引物的參與 ， 而 DNA復(fù)制一定要引物的存在 。 而復(fù)制的底物是 dNTP， 堿基互補配對關(guān)系為 GC和 AT。 6. 轉(zhuǎn)錄時 DNARNA雜合雙鏈分子是不穩(wěn)定的 ， RNA鏈在延伸過程中不斷從模板鏈上游離出來 ， 模板 DNA又恢復(fù)雙鏈狀態(tài)；而 DNA復(fù)制叉形成之后一直打開 ， 不斷向兩側(cè)延伸 ， 新合成的鏈與親本鏈形成子鏈 。 大腸桿菌 RNA聚合酶 大腸桿菌中只有一種 RNA聚合酶負(fù)責(zé)所有 mRNA、 rRNA和tRNA的合成 ， 它是一種復(fù)合酶 ， 由 5個亞基組成 (α2ββ’σ)，α2ββ’四個亞基構(gòu)成核心酶 ， 核心酶與 σ亞基構(gòu)成全酶 ， σ亞基無催化活性 ， 但能識別啟動子 ， 并與 DNA形成穩(wěn)定的起始復(fù)合物 ，參與轉(zhuǎn)錄的起始 。 其中 RNA聚合酶 II為 mRNA合成的主力酶 ， 催化合成 mRNA和核內(nèi)小 RNA。 與模板形成 AU配對 ， 使 RNA易于釋放 。若沒有其他蛋白質(zhì)因子的幫助，聚合酶將會越過終止子繼續(xù) “ 通讀 ” 下去。這種終止方式稱為 ρ因子依賴性終止 。 Noncoding RNA ? Messenger RNA, mRNA 4% ? Ribosomal RNA, rRNA 80% ? Transfer RNA, tRNA ? Small nuclear RNA, snRNA ? Small nucleolar RNA, snoRNA ? Small cytoplasmic RNA, scRNA RNA 前體 ? Endmodification5’cap amp。 真核生物 mRNA的加工主要包括在 mRNA的 5’ 末端加 “ 帽子 ” ，在 3’ 端加上多聚腺苷酸 （ polyA） 尾巴以及進(jìn)行 RNA的剪接 。 5’帽子至少具有兩種功能：一是使 mRNA避免受到磷酸酶和核酸酶的攻擊 ， 穩(wěn)定 mRNA一級結(jié)構(gòu)；二是提供核糖體結(jié)合位點 。 ? 核酶自我剪接 (rRNA) ? 蛋白質(zhì)（酶）促剪接 (tRNA) ? 小分子核糖核蛋白參與剪接 (mRNA) RNA 的時空性 ? 在某一特定時間，細(xì)胞內(nèi)的 RNA組成代表了轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的新 RNA和降解除去的 RNA之間的平衡。 一、原核生物基因表達(dá)調(diào)控 1． 操縱子及其結(jié)構(gòu) 在原核生物的調(diào)控中 ， 結(jié)構(gòu)基因 ， 操縱基因和調(diào)節(jié)基因 ， 組成操縱子的基本骨架 。 正調(diào)控和負(fù)調(diào)控 正調(diào)控 —— 加入調(diào)節(jié)蛋白后基因表達(dá)活性開啟 負(fù)調(diào)控 —— 加入調(diào)節(jié)蛋白后基因表達(dá)活性關(guān)閉 誘 導(dǎo) —— 可誘導(dǎo)操縱子中加入小分子 ， 使轉(zhuǎn)錄活性開啟 阻 遏 —— 可誘導(dǎo)操縱子中加入小分子 ， 使轉(zhuǎn)錄活性開啟 第三節(jié) 基因表達(dá)調(diào)控 3．乳糖操縱子 （ 1）乳糖操縱子的結(jié)構(gòu)和功能 三個結(jié)構(gòu)基因： lacZ、 lacY 和 lacA 結(jié)構(gòu)基因的上游依次為操縱基因 lacO、 啟動子 PZYA、 調(diào)節(jié)基因 lacI和啟動子 PI， lacO為阻遏蛋白的結(jié)合位點 lacI編碼阻遏蛋白，能識別操縱基因，并與之相結(jié)合， 阻遏lacZYA基因的轉(zhuǎn)錄表達(dá) 啟動子 PZYA的上游還有 1個代謝產(chǎn)物激活蛋白（ CAP） 的結(jié)合位點。 （ 2） 乳糖操縱子的負(fù)調(diào)控機理 有乳糖或其衍生物，阻遏蛋白發(fā)生構(gòu)象變化，喪失與操縱基因結(jié)合的能力，結(jié)構(gòu)基因正常轉(zhuǎn)錄表達(dá) （ 3）乳糖操縱子的正調(diào)控機理 cAMPCAP的正調(diào)控 。 （二）轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控 1．基因轉(zhuǎn)錄的順式作用元件和反式作用元件 ? 順式作用元件：基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控區(qū)。與順式作用元件相結(jié)合，影響轉(zhuǎn)錄。 二聚體化域是負(fù)責(zé)蛋白與蛋白相互作用形成二聚體的結(jié)構(gòu)域，常見的特征性結(jié)構(gòu)有： 亮氨酸拉鏈（ leucine zipper） 和螺旋 環(huán) 螺旋（ HLH） 結(jié)構(gòu)。 2． mRNA 前體的選擇性拼接 —— 真核基因的初始轉(zhuǎn)錄本有幾種不同的拼接方式 ， 能產(chǎn)生不同的成熟 mRNA， 翻譯產(chǎn)生不同的蛋白質(zhì) 3． 反義 RNA的調(diào)控 反義 RNA的調(diào)控是指真核生物基因組中 ， 某些調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄所產(chǎn)生的 RNA可與基因組 DNA或 RNA序列互補 ， 形成雜交體 ， 阻斷或減弱基因轉(zhuǎn)錄或翻譯的調(diào)控機制 。 （ 三 ） 轉(zhuǎn)錄后水平的調(diào)控 第四節(jié) 蛋白質(zhì)的生物合成 蛋白質(zhì)合成的過程稱為翻譯 。 密碼子特性 ? 簡并性 —— 幾種密碼子編碼同一種氨基酸。 ? 偏好性 —— 簡并密碼子中，不同生物往往偏向于某一種。 ? 除甲硫氨酸和色氨酸對應(yīng)于一種密碼子外，其他氨基酸均由一種以上密碼子編碼 ， 編碼相同氨基酸的密碼子稱為 同義密碼子 。 二、核糖體的結(jié)構(gòu)和功能 A位點 —— 攜帶氨基酸的氨酰 tRNA結(jié)合位點。 核糖體的結(jié)構(gòu)和功能 三、 tRNA的結(jié)構(gòu)與功能 ? 受體臂 （ acceptor arm） 或稱 氨基酸臂 ， 此臂負(fù)責(zé)攜帶特異的氨基酸 。 ? D環(huán) (D arm)，負(fù)責(zé)和氨基酰 tRNA聚合酶結(jié)合 。 四、蛋白質(zhì)生物合成的過程 合成起始： 核糖體大小亞基、 tRNA、 mRNA在起始因子的協(xié)助下組合成起始復(fù)合物的過程。 肽鏈的延伸過程 氨酰 tRNA進(jìn)入 A位 P位的起始 tRNA的甲硫氨酸轉(zhuǎn)移到 A位的氨基酰 tRNA的氨基上（ P位空） 肽基 tRNA從 A位移到 P位（ A位空） 翻譯的終止 終止密碼子出現(xiàn)，核糖體移動停止 釋放因子與核糖體結(jié)合形成復(fù)合物 tRNA與多肽鏈間的鍵被打斷，釋放新生肽鏈 核糖體與 mRNA解離，核糖體的 60S和 40S亞基解離 五、肽鏈的修飾 肽鏈中氨基酸殘基的化學(xué)修飾 肽鏈 N端甲硫氨酸或甲酰甲硫氨酸的切除 信號肽的切除 肽鏈的折疊 切除前體中功能不需要的肽段 二硫鍵的形成 ? 當(dāng)細(xì)胞準(zhǔn)備進(jìn)入分裂期時，蛋白質(zhì)合成加快。 ? 磷酸化調(diào)控 例：蛋白質(zhì)合成加速， eIF4F磷酸化作用增高。 eIF2的磷酸化則對翻譯有抑制作用