ch6細(xì)胞重組與克隆動(dòng)物-閱讀頁
2025-02-01 05:30本頁面
【正文】 胚胎復(fù)制”。 ☉ 此法成功克隆的動(dòng)物有：小鼠、兔、山羊、綿羊、豬、牛、猴等。理論上，每個(gè)卵裂球經(jīng)過核移植都能發(fā)育成遺傳相同的個(gè)體。 ☉胚胎干細(xì)胞是含正常二倍染色體、具有發(fā)育全能性的細(xì)胞。 ☉目前，僅有小鼠分離克隆出其胚胎干細(xì)胞并成克隆出成體。 （ 4）胎兒成纖維細(xì)胞核移植法 從妊娠早期胎兒中分離出胎兒成纖維細(xì)胞，采用核移植法克隆出胚胎，再移入受體妊娠產(chǎn)仔。維爾穆特 (Ian Wilmut)博士領(lǐng)導(dǎo)的 4人研究小組，于 1996年 7月無性繁殖了一只雌性小綿羊 ——多利。 （ 2）克隆綿羊過程 ☉ 取芬蘭多塞特 (Finn Doret)白品種 6歲母綿羊的乳腺細(xì)胞作核供體細(xì)胞，用“饑餓法”使其進(jìn)入休眠狀態(tài)而全部基因均有活性。 ☉ 核供體乳腺細(xì)胞注射 Gn3436小時(shí)后與無核卵放入同一培養(yǎng)皿中，在微電流作用下，乳腺細(xì)胞融入卵，成為一個(gè)含有新遺傳物質(zhì)的卵細(xì)胞。 ☉ 產(chǎn)下白色的“多利”羊。 （ 4）關(guān)鍵技術(shù) ——饑餓法 正當(dāng)伊爾門澤進(jìn)行的哺乳動(dòng)物核移植試驗(yàn)在困難的停滯時(shí)期，馬薩諸塞大學(xué)年僅 29歲的基恩 ?坎貝爾博士堅(jiān)定地認(rèn)為：“ 如果能在青蛙的試驗(yàn)中做得到的，那么，在哺乳動(dòng)物中也能做得到 ”。 坎貝爾建議采用減慢細(xì)胞活動(dòng)的方法，迫使供體細(xì)胞處于某種休眠狀態(tài)，以期獲得與受體細(xì)胞的同步狀態(tài)，便于二者結(jié)合。 維爾穆特就是采用“饑餓法”減慢生長(zhǎng)速度使二者進(jìn)入 G0期，同步后便于融合。 ☉ 1998年 2月，羅斯林研究所和 PPL公司決定邀請(qǐng)美國(guó)科學(xué)家對(duì)“多利”進(jìn)行遺傳基因檢驗(yàn)。 ☉ 1998年 7月，美國(guó)檀香山大學(xué)的若山輝彥及其導(dǎo)師柳町隆藏宣布，他們已從成年鼠細(xì)胞中克隆出三代鼠 50只。接著，又對(duì)克隆鼠進(jìn)行克隆，三代共 50只。 ☉ 1998年 9月，“多利”經(jīng)與威爾士山羊交配自然懷胎，生下一只健康的小羊，取名“邦尼”。 ☉ 胚胎移植是一項(xiàng)較成熟的技術(shù)，自上世紀(jì) 30年代以來，先后進(jìn)行了鼠、兔、綿羊、山羊、豬、馬、牛等動(dòng)物胚胎移植獲得成功。 ——作為試管動(dòng)物，是轉(zhuǎn)基因動(dòng)物和克隆動(dòng)物的基礎(chǔ)。 ☉ 胚胎移植的關(guān)鍵技術(shù) ——超數(shù)排卵 。可用注射激素進(jìn)行超數(shù)排卵。進(jìn)行胚胎移植，必須使供體和受體同步發(fā)情，也就是有相同的生殖周期，才能使一個(gè)供體超數(shù)排卵所得的胚胎在多個(gè)受體子宮內(nèi)發(fā)育。發(fā)情開始后 37天適宜從供體母牛采集受精卵，最遲不超過 8天。 ——胚胎移植 。 （ 2）試管動(dòng)物 ☉試管動(dòng)物是指利用精、卵體外受精，胚胎體外培養(yǎng)和胚胎移植獲得的動(dòng)物，又稱“體外受精動(dòng)物” ，“體外”源于拉丁文“ in vitro”，有試管內(nèi)的意思，所以又稱“試管動(dòng)物”。 ——卵母細(xì)胞的獲得與體外成熟 最常用的是從屠宰的母畜卵巢中采集卵母細(xì)胞。這些方法采集的都是未成熟的卵母細(xì)胞，需在特殊的培養(yǎng)液中培養(yǎng)成熟，才具備受精和發(fā)育的能力。 ——受精卵的體外培養(yǎng) 受精卵在體外條件下培養(yǎng)發(fā)育一段時(shí)間，再移植到受體子宮內(nèi)。
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