微生物遺傳變異與育種(1)-閱讀頁(yè)
2025-01-29 00:15本頁(yè)面
【正文】 條件） ● 大小： 每一轉(zhuǎn)化 DNA片段分子量約 1 107， 約 占染色體組 %，平均 15個(gè)基因。 ●轉(zhuǎn)化頻率： ～ 1%（很低），最高 10%，質(zhì)粒 為良好的轉(zhuǎn)化因子。 If DNA from a virus is used as the cloning vector, the process is called transfection. (Introduction to microbiology, John L. Ingraham ) （ 二 ） 轉(zhuǎn)導(dǎo) (Lederberg,1952) 完全缺陷或部分缺陷噬菌體為媒介 ,使受體細(xì)胞獲得供體細(xì)胞部分遺傳性狀的現(xiàn)象。 ● 完全轉(zhuǎn)導(dǎo) (形成轉(zhuǎn)導(dǎo)子 ) 感染復(fù)數(shù)：感染的噬菌體數(shù) /被感染細(xì)胞數(shù) ● 流產(chǎn)轉(zhuǎn)導(dǎo)： (僅形成一個(gè)轉(zhuǎn)導(dǎo)子 , 產(chǎn)生小菌落 ) ● 經(jīng)轉(zhuǎn)導(dǎo)進(jìn)入受體菌的供體菌 DNA片段 ， 在受體菌內(nèi)不交換、整合、復(fù)制，也不迅速消失，僅進(jìn)行轉(zhuǎn)錄、翻譯、性狀表達(dá)轉(zhuǎn)導(dǎo)現(xiàn)象。 A、低頻轉(zhuǎn)導(dǎo)（ＬＦＴ） １） 噬菌體感染 ２）誘導(dǎo)裂解 ３）不正常切離（低頻轉(zhuǎn)導(dǎo)裂解物） （ ?dgal、 ?dbio） ４）形成局限轉(zhuǎn)導(dǎo)子 B、高頻轉(zhuǎn)導(dǎo)（ＨＦＴ） 條件 :雙重溶源菌 ●低頻轉(zhuǎn)導(dǎo) (LFT)裂解物：溶源 噬菌體感染后， 帶少數(shù)局限轉(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體 的細(xì)胞 裂解物。 (來(lái)源： LFT裂解物以高的感染復(fù)數(shù) () 感染宿主 ) ● 雙重溶源菌 2）高頻轉(zhuǎn)導(dǎo)：在局限轉(zhuǎn)導(dǎo)中，用雙重溶源 菌誘導(dǎo)裂解后產(chǎn)生的 高頻轉(zhuǎn)導(dǎo)裂解物 轉(zhuǎn)導(dǎo)受 體菌可獲得的高達(dá) 50% 的轉(zhuǎn)導(dǎo)子，稱(chēng)之 ?。 ●白喉毒素： 白喉?xiàng)U菌的 223。 ● 存在方式 :四種接合型菌株 F F+ 菌株 Orit：起始子 Hfr菌株： 高頻重組菌株， F+整合在染色體上 成為附加體的狀態(tài)，若與 F 接合，有很高 的重組頻率。 ● 主要步驟： 1）選擇親本 2）制備原生質(zhì)體 3）促融 4）原生質(zhì)體再生 5）融合子檢出 6）篩選 Metabolic engineering by genome shulffling Nature biotechnology 2022, 20, 666 建議讀物： 總結(jié)： 167。 菌種 衰退的防止： 1）減少傳代次數(shù) 2）良好培養(yǎng)條件 3）利用不易衰退 的細(xì)胞傳代 4） 菌種的有效保藏 ● 菌種保藏相關(guān)問(wèn)題： 1．保藏條件：低溫、干燥、無(wú)氧、低 營(yíng)養(yǎng)、保護(hù)劑 菌種的有效管理 保藏機(jī)構(gòu)： ATCC、 CCTCC 、 DSMZ 有效的保藏方法 ● 常用保藏方法比較： 微生物同源重組的一般概念和模型 補(bǔ)充材料 同源重組： 兩條同源的 DNA分子，通過(guò)配對(duì)、鏈的斷裂和再連接，而產(chǎn)生片斷交換的過(guò)程。 ABC abc 可以看作先發(fā)生 a b一次交換 －－ Ab－－－ c－－－ －－ a－－ BC 然后 b c間再發(fā)生一次交換 －－ A b－－－ C a－－ B－－－ c－－ 基因重組的 Holliday 模型 4. 連接 5. 分支遷移 18017
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