核醫(yī)學(xué)放射性標(biāo)記化合物-閱讀頁
2025-01-23 10:53本頁面
【正文】 加熱 （ 70℃ ） ， 分為單股 DNA； ③ 用 TLCL3將 Na125I氧化產(chǎn)生 125I2 ④ 調(diào) ， 125I將取代嘧啶環(huán)上第 5位的碳原子 ，形成共價(jià)結(jié)合的 DNA單鏈 。 36 32P、 35P、 33P的標(biāo)記 ： 這三核素主要用于標(biāo)記核苷酸 ， 而標(biāo)記蛋白常用 125I、 3H。 常用測定方法： 紙層析法： 混合樣品中各組分的性質(zhì)不同 ，在固定相上的吸附能力和在流動(dòng)相中的溶解度不同 ， 因此它們各自的移動(dòng)速度不同 ， 可在特殊紙片上分離開 。 意義：某標(biāo)記物的 Rf值在相同條件下穩(wěn)定不變 。 標(biāo)記率圖見 P91 Rf = 待測組分到原點(diǎn)的距離 I 流動(dòng)相前沿到原點(diǎn)距離 L 39 薄層層析 原理 硅膠或氧化鋁 （ 固定相 ） ：根據(jù)混合物各組分的吸附力和分配系數(shù)不同而分開 。 聚酰胺 ：以各組分氫鍵吸附能力不同而分開 。 要求：能把 混合物很好的分開 ， 用時(shí)還要組成簡單 ， 粘度小 ， 展開 快 ， 展開后易揮發(fā) ， 價(jià)格低 ， 易購買 。 ⑷ 點(diǎn)樣斑不能碰到展開劑的液體 。 ⑹ 分段測量 ， 段的大小要一致； ⑺ 起跑點(diǎn)所在段也要測量 。 41 ⑼ 避免反復(fù)點(diǎn)樣，層析紙要自然晾干； ⑽最好能用標(biāo)準(zhǔn)樣品做對照。 標(biāo)記率計(jì)算： P90 （ 三 ） 分離純化 （ 為什么 ） ？？？ 純化方法 凝膠過濾法 —— 分離標(biāo)記蛋白與無機(jī)碘 離子交換法 —— 分離短肽標(biāo)記物 透 析 法 —— 分離標(biāo)記蛋白與小分子 親和層析法 —— 特異性好 ,保持生物活性 ConA吸附法 —— 糖蛋白 標(biāo)記化合物主要質(zhì)量指標(biāo)（ 5個(gè)） 1，放射性核素純度， 2，放化純度、 3，放射性比活度、 4，生物活性 5，免疫活性及標(biāo)記位置 放射性核素純度及其檢查 所需放射性核素的活度 放射性核素純度 （ %） = % 樣品的總放射性活度 43 （ 三 ） 放化純度及鑒定： 特定化學(xué)形態(tài)的放射性活度 放化純度 = % 樣品總放射性活度 放化純度的測定原則 ： 高效的化學(xué)分離與靈敏的放射性測量結(jié)合 。 （ 四 ） 化學(xué)純度及化學(xué)量的測定 如氚標(biāo)記類固醇作 RIA分析試劑 ， 其中的化學(xué)雜質(zhì)會(huì)影響標(biāo)記抗原與抗體的結(jié)合 ，使靈敏度降低 ， 因此須控制化學(xué)雜質(zhì)含量 。 標(biāo)記率 = S1+S2+S3 100% S1 若投入待標(biāo)記物 W， 且 100%成為標(biāo)記物 比活度 = W AY （ A為總放射性） （ 3） 自身取代法 （ 將 Bq/mg換算為 Bq/mol） ： 分三步進(jìn)行 ① 以標(biāo)記品 、 標(biāo)準(zhǔn)品與抗體競爭結(jié)合做一條 B/F對標(biāo)準(zhǔn)品依次遞增的曲線 。 ③ 將兩條曲線放在同一坐標(biāo)系 ， 任取一點(diǎn)對應(yīng)的橫坐標(biāo)即為比活度 。 特異結(jié)合試驗(yàn) （ 標(biāo)記抗原 ， 非標(biāo)記抗原與抗體親和力 ） 。 49 八、放射性標(biāo)記化合物 的穩(wěn)定性與貯存 （一）放射性標(biāo)記化合物的輻射自分解 定義： 用作標(biāo)記的放射性核素放出的射線，能使標(biāo)記化合物本身發(fā)生電離輻射分解，可形成化學(xué)雜質(zhì)及放化雜質(zhì)。 2）與標(biāo)記物比活度有關(guān)； 3）與標(biāo)記物的純度有關(guān)：開始時(shí)緩慢，隨后加速，輻射自分解產(chǎn)物可加速隨后的破壞。 52
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