【正文】 l→ 顯色劑 1ml→ 混勻 → 定容靜置 15分鐘 → 于580nm測定 → 根據(jù)樣品的波長從標準曲線查相應(yīng) SO2含量 。 食品分析與檢驗 （ 4） 注意事項 ? ① 此反應(yīng)的最適反應(yīng)溫度為 2025℃ ， 溫度低靈敏度低 ，并保證標準系列管和樣品在相同溫度下顯色； ? ② 反應(yīng)溫度如果為 1516℃ ， 靜置時間需延長為 20分鐘； ? ③ 鹽酸副玫瑰苯胺中的鹽酸用量對顯色有影響 ， 加入鹽酸量多 ， 顯色淺；加入量少 ， 顯色深 ， 所以配制試劑時一定要按操作進行； 食品分析與檢驗 ? ④ 甲醛濃度在 %時 ， 顏色穩(wěn)定 ， 所以應(yīng)選擇%甲醛溶液； ? ⑤ 測定樣品顏色較深的樣品 ， 可用 10%活性炭脫色； ? ⑥ 樣品加入 Na2HgCl4吸收液于 100ml容量瓶中加水至刻度 ，搖勻 ， 此液在 24小時內(nèi)很穩(wěn)定 ， 否則于 4℃ 可使用一周； ? ⑦ 此法測 SO2采用 HgCl2毒性很強 ， 故實驗時應(yīng)注意安全 。 在密閉容器中對樣品進行酸化并加熱蒸餾 ， 蒸出二氧化硫 ， 然后用乙酸鉛溶液吸收 ， 用濃鹽酸酸化 ， 再用碘標準溶液滴定 。 食品分析與檢驗 離子色譜法原理 ?樣品中的亞硫酸鹽在弱酸性條件下加熱溢出 ，用 pH6的水承接 ， 然后以淀粉作指示劑 ， 用碘標準溶液滴定至終點 ， 根據(jù)碘標準溶液消耗量計算出樣品中二氧化硫的含量 。 合成類色素中還包括色淀 。 六、合成著色劑的測定 食品分析與檢驗 高效液相色譜法 ?原理 ?食品中的合成著色劑經(jīng)聚酰胺吸附法或液一液分配法提取后 ， 制成水溶液 ， 注入高效液相色譜儀 ， 經(jīng)反相色譜分離 ， 根據(jù)保留時間定性和與峰面積比較進行定量 。 ? ③ 淀粉 、 軟糖 、 硬糖 、 蜜餞類：稱取粉碎樣品5～ 10g加水 30mL， 加熱溶解 ， 用 20％ 檸檬酸溶液調(diào) PH至 4左右 。 ? ⑤ 蛋糕類：稱取樣品 10g， 粉碎 ， 加放少量海砂或無水硫酸鈉 ， 混勻 ， 用電吹風吹干 ， 加入 30mL石油醚攪拌靜置片刻 ，傾出石油醚 ， 如此重復(fù) 2～ 3次以除去油脂 ， 再吹干研細 ， 然后轉(zhuǎn)入漏斗中 ， 用乙醇一氨溶液提取色素直至色素提取完全 ，以下按 （ 4） 自 “ 置水浴上加熱濃縮至 20mL左右 ” 起依法操作 。 經(jīng)濾膜 （ ） 過濾 ， 取 10 181。 食品分析與檢驗 ? ② 液一液分配法 （ 適用于含赤蘚紅的樣品 ） ：將制備好的樣品溶液放入分液漏斗中 ， 加 2mL鹽酸 ， 三正辛胺十正丁醇溶液 （ 5十 95） 10～ 20mL， 振搖 ， 提取 ， 分取有機相 ， 重復(fù)此操作 ， 合并有機相 ， 用飽和硫酸鈉溶液洗 2次 ， 每次10mL分取有機相 ， 放蒸發(fā)皿中 ， 水浴加熱濃縮至 10mL， 轉(zhuǎn)移到分液漏斗中 ， 加 60mL正己烷 ， 混勻 ， 加氨水 （ 2＋ 98）提取 2～ 3次 ， 每次 5ml， 合并氨水層 （ 含水溶性 酸性色素 ） ， 用正己烷洗 2次 ， 氨水層加乙酸調(diào)成中性 ， 水浴加蒸發(fā)至近干 ， 加水溶解 ， 定容至 5mL。 L進高效液相色譜儀 。m， C18不銹鋼柱 。 ? 檢測器；紫外檢測器 ， 波長 254nm。 食品分析與檢驗 ? 計算： ?A樣 —— 樣品的峰面積 ?A標 —— 標樣的峰面積 ?C標 —— 標樣的濃度 ?V樣 —— 樣品的定容體積 ?m樣 —— 樣品的質(zhì)量 )/( KgmgmA VCA樣標樣標樣色素含量????食品分析與檢驗 ? 說明及注意事項 ? 樣品在加入聚酰胺粉吸附色素之前 ， 要用 20％ 檸檬酸調(diào)至 PH至 4左右 ， 因為聚酰胺粉在偏酸性 （ PH4～ 6） 條件下對色素吸附力較強 ， 吸附較完全 。 ? 樣液中的色素被聚酰胺粉吸附后 ， 當用熱水洗滌聚酰胺粉以便 除去可溶性雜質(zhì)時 ， 要求水偏酸性 ， 防止吸附的色素被洗脫下來 ， 使定量結(jié)果偏低 。 ? 用 HPLC測定時 ， 測定一個樣品后 ， 將流動相中的甲醇濃度恢復(fù)至 20%， 使之穩(wěn)定 20min后 ， 再開始測定第二個樣品 。 ? 胭脂紅 510nm， 莧菜紅 520nm， 檸檬黃 430nm， 日落黃 482nm，亮藍 627nm） ， 測定吸光度 ， 分別繪制標準曲線比較或與標準色列目測比較 。 ? 按其作用可分為天然抗氧化劑和人工合成抗氧化劑 。 ? 常用的抗氧化劑有叔丁基羥基茴香醚 (BHA)、 2， 6一二叔丁基對甲酚 (BHT)、 沒食子酸丙酯 (PG)、 TBHQ、 茶多酚(TP)等 ， 主要用于油脂及高油脂類食品中 ， 以延緩食品的氧化變質(zhì) 。 PG在食品中單獨最大使用量為 ／ kg， 與 BHA和 BHT混合使用時 ， 不得超過 ／ kg。 食品分析與檢驗 ? 氣相色譜法測定食品中叔丁基羥基茴香醚 (BHA)與 2， 6二叔丁基對甲酚 (BHT) ? 原理 ? 樣品中的叔丁基羥基茴香醚 (BHA)和 2， 6二叔丁基對甲酚(BHT)用石油醚提取 ， 通過層析柱使 BHA與 BHT凈化 ， 濃縮后 ， 經(jīng)氣相色譜分離后用氫火焰離子化檢測器檢測 ， 根據(jù)樣品峰高與標準峰高比較定量 。 用 100mL二氯甲烷分 5次淋洗 ， 合并淋洗液 ， 減壓濃縮近干時 ， 用二硫化碳定容至 2mL， 待測 。 （ 即先提取脂肪 ， 再進行層析 ） 食品分析與檢驗 ? （ 3） 儀器條件： ? 色譜柱：玻璃柱 150mmX3mm， ? 柱溫 140℃ ， 進樣口 、 檢測器溫度 200℃ ． ? 載氣：氮氣 ， 流速： 70mL/min ? （ 4） 測定： ? 同時取 、 BHT混合標準使用液注入氣相色譜儀 ，分別記錄標準液和樣液的峰高或峰面積進行比較定量 。 ? （ 2） BHT穩(wěn)定性較差 ， 易受陽光 、 熱的影響 ， 操作時應(yīng)盡量避光 。 食品分析與檢驗 ? 原理 ? 利用樣品經(jīng)石油醚提取后 ， 根據(jù) BHA石油醚相和含水乙醇相中分配系數(shù)的不同 ， 使 BHA轉(zhuǎn)人 72％ 乙醇相中 ， 再與 2， 6一二氯醌氯亞胺的硼砂溶液作用 ， 生成一種穩(wěn)定的藍色化合物 ， 其顏色深淺與 BHA的量成正比 ， 于620nm處測定吸光度與標準比較定量 。 （三） 2， 6一二叔丁基對甲酚 (BHT)的測定 食品分析與檢驗 ?原理 ?樣品經(jīng)石油醚溶解 ， 用乙酸銨水溶液提取后 ，沒食子酸丙酯 (PG)與亞鐵酒石酸鹽起顏色反應(yīng) ，在波長 540nm處測定吸光度 ， 與標準比