高效液相色譜法：特指一種用液體為流動(dòng)相的色譜分離分析方-閱讀頁
2024-10-18 06:16本頁面
【正文】 PLC80%問題 ） （三）正相鍵合相色譜 1． 分離機(jī)制：溶質(zhì)分子與固定相之間定向作用力 、 誘導(dǎo)力 、 或氫鍵作用力 2． 固定相：極性大的氰基或氨基鍵合相 3． 流動(dòng)相：極性小 （ 同 LSC） 底劑 + 有機(jī)極性調(diào)節(jié)劑 ? 例：正己烷 + 氯仿 甲醇 ， 氯仿 乙醇 4． 流動(dòng)相極性與 k的關(guān)系： 流動(dòng)相極性 ↑ ， 洗脫能力 ↑ ， 組分 tR↓ ， k↓ 5． 出柱順序：結(jié)構(gòu)相近組分 ， 極性小的組分先 出柱極性大的組分后出柱 6． 適用： ? 氰基鍵合相與硅膠的柱選擇性相似 （ 極性稍小 ） 分離物質(zhì)也相似 ? 氨基鍵合相與硅膠性質(zhì)差別大 ， 堿性 分析極性大物質(zhì) 、 糖類等 1．反相離子對(duì)色譜法（ IPC或 PIC） 反相色譜中 ， 在極性流動(dòng)相中加入離子對(duì)試劑 ， 使被測組分 與其中的反離子形成中性離子對(duì) ， 增加 k和 tR， 以改善分離 1） 離子對(duì)試劑：烷基磺酸鈉 → 分析堿 四丁基季胺鹽 → 分析酸 2） 影響 k的因素 a． 與 m的極性有關(guān) （ 同反相色譜 ） b． 與 R的鏈長有關(guān)： R↑ 長 ， 極性 ↓ 小 ， tR↑ ， k↑ 3） 適用：較強(qiáng)的有機(jī)酸 、 堿 ? 三、離子色譜法（ IC） 2．反相離子抑制色譜 在反相色譜中 ， 通過加入緩沖溶液調(diào)節(jié)流動(dòng)相 pH值 ， 抑制 組分解離 ， 增加其 k和 tR， 以達(dá)到改善分離的目的 1） 離子抑制劑：弱酸 、 弱堿性物質(zhì) pH一定的緩沖溶液 2） k的影響因素： 與流動(dòng)相極性有關(guān) ， 還與 pH值有關(guān) ? 選擇流動(dòng)相：應(yīng)同時(shí)考慮極性及 pH值 酸性物質(zhì) —— 加入酸 HAc tR↑ ， k↑ 堿性物質(zhì) —— 加入堿 NH3 24 高效液相色譜儀 1． 泵： 恒壓泵：流量精度不穩(wěn) 恒流泵：常用 2． 進(jìn)樣裝置 1） 隔膜進(jìn)樣 （ 高分子有機(jī)硅膠墊 → 進(jìn)樣室 ） GC系統(tǒng)壓力較小 ， 可以 HPLC系統(tǒng)壓力太大 ， 必須停泵進(jìn)樣 （ 早期 ） 2） 閥進(jìn)樣：不必停泵 ， 六通閥 液相色譜 3． 色譜柱：直徑 4~6mm,柱長 10~30cm 柱效評(píng)價(jià)：色譜系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn) R， n， fs（ 拖尾因子 ） 柱再生：維護(hù) 、 保養(yǎng) 、 柱子的沖洗 4． 檢測器 1） 紫外檢測器：適于吸收紫外光的物質(zhì) 2） 熒光檢測器：只能分析自身發(fā)光的物質(zhì) 靈敏度高 3） 示差折光檢測器：利用折光率的差別 靈敏度低 ， 溫度要求嚴(yán)格 4） 電化學(xué)檢測器 5） 化學(xué)發(fā)光
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