【正文】 751例，陽性503例，%。區(qū)域性病理診斷中心的申請情況，我科積極申請，同時加強科內(nèi)設施建設現(xiàn)已滿足硬件條件，并加快人才培養(yǎng)步伐，爭取早日達到區(qū)域性病理診斷中心的標準。提高了工作效率,方便臨床病理結果查詢，正逐步實現(xiàn)電子申請單的普及。自動染色封片儀的投入使用，滿足了我科與日俱增的制片工作量，并避免了制片質量穩(wěn)定性欠佳等問題。開展了cervista hpv分子病理。共檢測95例，陽性為31例，創(chuàng)收33250元，tct聯(lián)合hpv共58例，共同陽性者22例陽性，22例中做活檢10例，陽性3例，檢出率：%，其中單獨做hpv37例，陽性9例，9例中取活檢4例，陽性1例，檢出率：%。成立了海拉爾區(qū)讀片會。加強臨床溝通協(xié)作工作。不足：科室技術人員嚴重不足，人才梯隊出現(xiàn)斷層，成熟的技術人員少，僅兩名并已到退休年齡，且我科工作量較為繁重，其引起的直接后果是，甲級切片率低，達不到等級醫(yī)院要求的標準。重點?？莆赐瓿傻娜蝿帐牵海?）指導研究生開展結合臨床病理的科研設計，完成課題及論文答辯，學習診斷病理并達到一般進修醫(yī)師的水平；（2）進行國際合作，與國際先進水平接軌。皮膚、細胞學等病理亞專業(yè)缺少專業(yè)人員相關的培養(yǎng)。，最常用的標記抗體的酶為＿＿。常用的抗原修復方法有＿＿、＿＿、＿＿。℃ ℃ ℃ ℃＿ （） ，金屬離子沉淀反應常用的底物有（）A．萘酚 ，（）酶用偶氮鹽偶聯(lián)反應法顯示 （） （）℃ ℃ ℃ ℃ （） （）倍。第一章 病理檢驗技術概述病理學的作用：研究疾病的病因、發(fā)病機制，認識疾病的發(fā)生發(fā)展規(guī)律為臨床診斷疾病、治療疾病、分析預后提供依據(jù)等。一、病理檢驗的主要任務（一）確定疾病的診斷（二）為臨床選擇治療方案提供依據(jù)（三）提供有關預后因素的信息。病理檢驗技術的質量和水平是臨床病理診斷工作中至關重要的因素?！钡诙?jié)、病理檢驗技術常規(guī)工作 收發(fā)工作協(xié)助取材和尸體剖檢工作 制作制作切片及細胞學涂片 病理資料管理及檢索藥品、物資的管理及儀器維護 大體標本的收集和制作第六章 組織制片技術 P39 常規(guī)石蠟切片制作程序 組織固定→取材→固定→脫水→透明→浸蠟→包埋→切片→染色→封片→觀察第一節(jié) 組織塊的處理（一）組織切片制作過程中的各種操作：取材與固定：合理取材、及時固定；洗滌、脫水、透明；浸蠟、包埋；切片、貼片（展片、撈片）和染色：封片：長期保存。注意事項：部位、大小、形狀、方向二、固定和固定液生理鹽水或10%甲醛。血液、細胞涂片等；（一）固定目的：（三）固定液的特性：（1）防止組織、細胞的自溶與腐??；滲透力強，迅速滲入組織內(nèi)部（2）凝固或沉淀細胞內(nèi)物質；不會使組織過度收縮或膨脹（3）增加組織硬度，便于制片；能硬化組織，保持細胞形態(tài)和位置（4）產(chǎn)生不同的折光率，有利于染色后觀使組織對染料產(chǎn)生親和力，產(chǎn)生折光率 察辨認。微波固定介質確定恰當?shù)墓潭〞r間 可用（五）組織固定液 常用固定液： 4%甲醛（福爾馬林）：配置為市售的40%甲醛1份加水9份混合即成；酒精（乙醇）：高濃度組織硬化顯著，先用80%固定數(shù)小時，再用95%固定；中性緩沖甲醛液：可提高免疫組化陽性率。固定陳舊多血臟器如肝脾，易產(chǎn)生黑色色素，叫甲醛色素。中性甲醛液配置：40%甲醛150200ml，蒸餾水800850ml，磷酸二氫鈉4g，磷酸氫二鈉13g。選擇性固定液：丙酮：廣泛用于組織化學中酶的固定；戊二醛固定液：廣泛用于電鏡標本的固定，應采用緩沖液配制固定液醋酸：不能保存糖，也不能固定脂肪及類脂，5%醋酸pH2～3可抑制細菌和酶的活性；苦味酸：強酸，易燃易爆，酒精溶液可固定糖類；氯化汞：只宜固定薄片組織，2mm～3mm厚的組織需固定6～18小時；重鉻酸鉀：固定高爾基體、線粒體，對酸性染料著色良好；鋨酸：濃度為1%～2%水溶液用于電鏡制片；骨組織脫鈣液：在脫鈣前，先將骨或鈣化組織鋸成4mm～5mm厚的簿片，按常規(guī)充分固定，然后進行脫鈣。對組織無明顯損害，迅速、安全；（4）5%～10%甲酸水溶液：甲酸5ml～10ml，蒸餾水加至100ml（5）甲酸酒精液：脫鈣速度較硝酸慢，但破壞組織也輕。Jenkins混合酸脫鈣液、鹽酸氯化鈉液、枸櫞酸鈉、甲酸脫鈣液等脫鈣方法：骨片懸于脫鈣液中，敞開瓶口，每日更換一次新液，最好早晚各一次。用于免疫組化染色較理想。EDTA與鈣可形成一種可溶性非離子化的復合物。一般致密骨脫鈣需要6～8周，含有少量骨渣的組織約需一周。電解脫鈣液配制：25%鹽酸50ml，25%甲酸200ml，蒸餾水750ml；脫鈣方法：直徑30cm電解槽內(nèi)盛大量電解液，將骨組織放在一個四周多孔的塑料小容器內(nèi)放入電解液內(nèi)，此容器通入白金絲或鎢絲作陽極，在電解液內(nèi)再放一白金絲或鎢絲作陰極，通入6V直流電，電流強度1A～2A，調節(jié)兩電極的距離來控制。脫鈣后的處理脫鈣后的組織經(jīng)流水沖洗4～12小時，除去殘留的脫鈣劑；修去鋸面的薄層組織，切成適當大小的組織塊，進行常規(guī)脫水、透明、浸蠟及包埋；用酸性液脫鈣后的組織，蘇木素染色時間應適當延長，在伊紅中的時間應該縮短；脫鈣后組織切片在染色中較易脫落，充分烤片，染色前滴加2%～5%的火棉膠液，以使之粘貼牢固。大組織沖洗24小時，小組織沖洗2～4小時。（二）組 織 脫 水脫水的目的及原則：用某些溶劑逐漸將組織內(nèi)吸收的水分置換出來，以利于透明劑和石蠟或火棉膠的滲入。脫水能力強，但易使組織收縮、脆。異丙醇：可代替無水酒精使用。脫水兼透明劑：脫水后即可直接浸蠟。用于植物標本的處理效果較好。電鏡標本制作時常用作中間脫水劑。二甲苯：最常用的透明劑，有毒、易揮發(fā)，透明力強，但組織易收縮變脆，小塊組織以30分鐘。氯仿：即三氯甲烷。香柏油：為柏樹樹脂，收縮小，透明時間長，常用于染色后切片的透明。（二）浸蠟劑的種類：石蠟：經(jīng)56℃～58℃石蠟浸蠟的組織包埋，有利于組織切片的連續(xù)性，對蠟塊資料保存可靠，一般為34小時。碳蠟；明膠。常規(guī)石蠟包埋法:包埋過程、包埋面的選擇；體液標本一般不做包埋和切片。（1）取材、固定：薄片1cmⅹⅹ,在快速固定液（95%酒精、40%甲醛、冰醋酸）內(nèi)加熱煮沸1～2分鐘。（3）透明：加二甲苯加熱1～2分鐘。碳蠟包埋法：即聚乙烯二醇。適用于脂肪及脂類組織的制片。樹脂包埋法：適用于不脫鈣骨髓活檢組織、肝、腎穿刺活檢和淋巴結組織等。（一）切片機的種類及使用：石蠟切片機：能將石蠟包埋的組織切出一定厚薄的切片。最常用的為旋轉式?；鹈弈z切片機：多用于眼球、內(nèi)耳、脊髓和腦的切片，切片厚度可達20181。二、組織切片刀 P58（一）切片刀的種類： 其長度一般有 4cm、8cm、14cm、18cm、20cm、24cm等。雙平型：刀身兩側均無凹度，兩面是平面。雙凹型：刀身兩側均有凹度，適用于輪轉式石蠟切片。（二）刀背套與刀柄：刀背套供磨刀時用，刀背套有金屬和塑料兩種。（三）磨刀與被刀：手工磨刀法：①磨刀前用軟布試凈磨刀石面塵垢；②裝上刀背和刀柄，滴磨刀油于磨刀石上；③右手緊握刀柄，左手緊按刀背另一端，刀刃向前，逐漸推動刀片至磨刀的一端，從右到左全部磨完。切片撈至載波片上，用酒精燈略加烘烤，再入二甲苯脫蠟，經(jīng)95%酒精后即刻入水水化，隨后即可進行常規(guī)快速蘇木素伊紅染色。一、設備要求：（一）冷凍切片機：一般由轉輪式切片機或推拉式切片機加上制冷裝置而成：二氧化碳制冷器；半導體制冷器；（二）恒冷箱冷凍卻片機：利用壓縮機通過制冷劑循環(huán)制冷。一般病理急診、組織化學顯示酶和免疫病理學進行熒光抗體研究等，多數(shù)都用新鮮組織直接冷凍，切片后再進行固定、染色或直接染色或孵化。（二）冷凍切片方法：恒溫箱冷凍切片法（1）開機預冷：切片前2～3小時，所需溫度如下： 各種新鮮組織冷凍切片參考溫度（℃）腦、淋巴結、肝、腎、脾、睪丸1216 肌肉、腎上腺、甲狀腺、子宮、卵巢1822 乳腺、皮膚、前列腺2228（2）放入、速凍、修整組織，待恒冷箱內(nèi)溫度降至要求溫度后，將組織用OT包埋，再速凍1～2分鐘，裝于機樣本夾上，修平；（3）調節(jié)抗卷板，以與刀刃平行對齊；（4）切片：所需厚度為4181。m，用毛筆展平，貼于潔凈玻片上，晾干或吹干后染色；（5）切片后處理：清潔保養(yǎng)?？靖珊蠹慈〕?，70%酒精和自來水洗后即可染色。酒精明膠粘片法：%%明膠溶液（用40%酒精配制）數(shù)分鐘，用載玻片撈起后，室溫干燥，入氯仿1分鐘，經(jīng)95%和75%酒精洗去氯仿，再經(jīng)蒸餾水洗后即可染色。觀察第七章組織切片染色技術第一節(jié) 病理切片染色概述 P68一、概念：用染液對組織切片進行處理，使組織中的不同成分被染上相應的顏色，產(chǎn)生不同的折射率，以利于顯微鏡觀察和分析。（一）染色的化學反應：組織細胞的酸性物質與堿性染料的陽離子相結合，堿性物質與酸性染料的陰離子相結合。（二）染色的物理作用：滲透作用：染料進入組織；吸附作用：把另一種物質的分子、原子、離子集中在界面上的過程；吸收作用（溶解作用）。（二）染料的分類：據(jù)染料來源：天然、合成染料和無機化合物根據(jù)染料化學反應：酸性、堿性和中性染料據(jù)染色對象：（1）組織染料： 1）結締組織和肌纖維染料：有膠原纖維、網(wǎng)狀纖維、彈力纖維和肌原纖維等染料； 2）神經(jīng)組織的染料：尼氏體、神經(jīng)軸突、神經(jīng)髓鞘、神經(jīng)膠質細胞等染料；（2）細胞染料：細胞核、細胞質染料等常用染色劑簡介見附錄一。二、特殊染色：特染是為了顯示特定的組織結構或其他的特殊成分。四、復染色：用兩種不同性質的染料染色方法。第三節(jié) 染色前后的處理 P74一、染色前的處理：脫蠟至水：必須經(jīng)過二甲苯脫蠟、各級酒精（100%、95%、85%、75%）至水洗的過程。脫甲醛色素：在切片脫蠟至水后，用Verocay液（1%氫氧化鉀水溶液1ml，80%酒精100ml）處理10分鐘，然后流水沖洗5分鐘再常規(guī)染色。藍化作用：分化后，用堿性水使細胞核變成藍色。染色后的透明：透明劑用二甲苯。（用前將甘油明膠置于溫箱內(nèi)融化后即可封片）。優(yōu)良封固劑，可直接封片。第八章 組織切片常規(guī)染色技術 第一節(jié) 常規(guī)染色的概念一、染色原理（一）蘇木素染色原理：蘇木紅和鋁結合形成帶正電的 藍色色精，帶負電的細胞核與帶正電的藍色色精以離子鍵或氫鍵結合而被染色。（二）伊紅染色原理：伊紅Y是一種化學合成的酸性染料。二、染液的配制 P80（一）蘇木素液：從蘇木素的樹中提煉的天然染料。蘇木素 1g 蒸餾水 200ml 無水酒精 10ml 氧化汞 硫酸鋁鉀 20g 配置方法見書81頁。保存時間為一年。染色時間1～3分鐘。用蒸餾水補足600ml，加入400mg碘酸鈉充分混勻，蘇木素染液呈紫紅色即可。Ehrlich蘇木素液：蘇木素2g，無水酒精100ml，甘油100ml，硫酸鋁鉀15g，蒸餾水100ml，冰醋酸10ml。Gill改良蘇木素液：蘇木素2g，無水酒精250ml，蒸餾水750ml，,冰醋酸20ml。（三）%～1%鹽酸酒精分化液：鹽酸 ～1ml, 75%酒精99ml。（四）藍化液：“藍化”是指蘇木素液染細胞核后，通過鹽酸酒精分化，切片由酸性轉入弱堿性液體，使之變藍的過程。三、染色方法 P83（一）人工操作蘇木素伊紅染色方法：脫蠟至水：（1）二甲苯Ⅰ脫蠟（脫蠟25分鐘）；（2）二甲苯Ⅱ（25分鐘）；（3）無水酒精Ⅰ（12分鐘）；（4）95%酒精1分鐘；（5）85%酒精1分鐘；（6）75%酒精1分鐘；（7）自來水洗2分鐘；蘇木素染色：蘇木素液染色510分鐘；自來水洗1分鐘；分化返藍：%～1%鹽酸酒精分化數(shù)秒至30分鐘呈紫紅色；自來水1分鐘；用溫水(50℃)藍化5～15分鐘(或稀氨水藍化30秒，自來水洗5～10分鐘)；伊紅染色：水溶性伊紅可直接入伊紅液，1分鐘；自來水洗1分鐘；脫水、透明：（1）85%酒精（20秒）；（2）95%酒精Ⅰ（1分鐘）；（3）無水酒精Ⅰ（1分鐘）；（4）二甲苯Ⅰ（1～2分鐘）；（5）二甲苯Ⅱ（1～2分鐘）。（二）冷凍切片HE染色：冷凍切片貼片后，用95%酒精和冰醋酸5ml的混合液固定1分鐘，自來水洗30秒～1分鐘，HE染色。第九章 組織切片特殊染色 P87 為了顯示特定的組織結構或組織細胞特殊成分，采用特定的染料和方法對組織切片進行染色。兩液提前配制，臨用前混合使用。染色結果：膠原纖維紅色,肌纖維黃色, 、膠原纖維染色的應用 P88（1）對梭形細胞腫瘤來源、性質提供診斷和鑒別診斷的依據(jù)；（2）顯示各種組織、器官病變時的修復情況與纖維化程度，如肝穿組織中纖維組織的含量與分布的觀察；（3）鑒定心肌壞死后疤痕的形成；（4）鑒別心內(nèi)膜彈力纖維增生癥與心內(nèi)膜心肌纖維化。染色結果：網(wǎng)狀纖維呈黑色，膠原纖維呈紅色。四、多色染色： P93（一）Masson三色染色法： P93染液配制：（1）麗春紅酸性品紅液：，冰醋酸1ml，蒸餾水99ml（先配好醋酸溶液后，分別溶解麗春紅或酸性品紅）；亮綠液：，冰醋酸1ml，蒸餾水99ml。（3）Weigert鐵蘇木素液：甲液：蘇木素1g，95%酒精或無水酒精100ml；乙液：29%三氯化鐵水溶液4ml，純鹽酸1ml，蒸餾水95ml（臨用前取甲、乙兩液混合即可，24小時內(nèi)使用有效。染色結果：膠原纖維呈藍色（用苯胺藍染）或綠色（用亮綠染），肌纖維、細胞質呈紅色，細胞核呈藍褐色。（先將1%的磷鎢酸溶液配好，一半用于溶解苯胺藍，另一半用于溶解橙黃G，加熱溶解，冷卻后分別過濾，可長期保存。（3）重鉻酸鉀液；染色步驟：（1）切片脫蠟至水；（2）Zenker固定液固定1小時；（3）充分水洗；（4）%碘酒精處理5～10