動(dòng)物細(xì)胞工程(使用)-在線瀏覽
2025-04-09 16:15本頁(yè)面
【正文】 體細(xì)胞核移植過程 示動(dòng)物克隆 無(wú)性繁殖 1.）克隆羊多利培育過程： 黑面綿羊去核卵母細(xì)胞 白面綿羊乳腺細(xì)胞核 細(xì)胞核移植 重組細(xì)胞 電脈沖刺激 早期重組胚胎 胚胎移植 另一頭綿羊的子宮 妊娠、出生 克隆羊多利 ◆ 特別注意： 克隆動(dòng)物性狀與供體動(dòng)物完全一樣嗎？ 不可能！ 因?yàn)椋? 一、供體動(dòng)物只提供細(xì)胞核，而細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)（如線粒體 DNA）來(lái)自于受體卵母細(xì)胞 . 二、生物的性狀不僅與遺傳物質(zhì)有關(guān)，還受環(huán)境的影響。含有促使細(xì)胞核表達(dá)全能性的物質(zhì)和營(yíng)養(yǎng)條件。 若黑面綿羊的基因型為 AA,白面綿羊的基因型為 aa，則克隆羊的基因型為 核移植 胚胎移植 白色 多利全部的核基因都來(lái)自白面綿羊 aa ◆ 取供體細(xì)胞傳代培養(yǎng) 10代以內(nèi)的細(xì)胞 .為什么？ ◆ 用的是去核的減數(shù)第二次分裂中期細(xì)胞（ MⅡ 中期 ）為什么？ ◆ 激活方法： ◆ 激活目的： ◆ 促融方法：電刺激 ◆ 胚胎移植至代孕受體內(nèi) 妊娠、分娩 2.）核移植流程 供體：優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)奶牛 受體：普通奶牛（卵母細(xì)胞的采集與培養(yǎng)） ，易操作。 有人說(shuō)它三個(gè)母親，對(duì)嗎？ 核移植流程 : 供體細(xì)胞的采集與培養(yǎng) 用物理或化學(xué)方法激活受體細(xì)胞，使其完成減數(shù)分裂進(jìn)程。 將供體細(xì)胞注入去核卵母細(xì)胞 顯微操作去除卵母細(xì)胞中的核 受體卵母細(xì)胞的采集與體外培養(yǎng) 胚胎移植入代孕母牛體內(nèi) 妊娠分娩與供體遺傳物質(zhì)基礎(chǔ)相同的犢牛。 。 一、動(dòng)物細(xì)胞融合 ◆ 細(xì)胞雜交： 不同基因型的細(xì)胞之間的融合就是細(xì)胞雜交 。 細(xì)胞融合是正常的生命活動(dòng) 兩個(gè)細(xì)胞正在融合 受精作用 動(dòng)物細(xì)胞融合 誘導(dǎo)融合的因素 ? 生物法： 滅活的病毒 誘導(dǎo)融合 .(利用滅活仙臺(tái)病毒是動(dòng)物細(xì)胞融合所特有的。病毒外殼上的某些糖蛋白可能還有促進(jìn)細(xì)胞融合的功能。 ? 利用雜交瘤技術(shù)，制備單克隆抗體。 ? 人們獲得抗體的傳統(tǒng)方法是 ? – 將抗原注入動(dòng)物體 ,然后從動(dòng)物血清中提取抗體 ? 這種方法的缺點(diǎn)是什么 ? – 效率低，產(chǎn)量有限，純度低，動(dòng)物抗體注入人體可能產(chǎn)生嚴(yán)重的過敏反應(yīng)。 二：動(dòng)物細(xì)胞融合的成功應(yīng)用 —— 單克隆抗體的制備 思考 單克隆抗體的制備 — 極富創(chuàng)造性的方案 將能夠產(chǎn)生特定抗體的 B淋巴細(xì)胞 和具有無(wú)限增殖能力的 骨髓瘤細(xì)胞 融合在一起，形成雜交瘤細(xì)胞。這種 單一類型的只針對(duì)某一特定抗原決定簇的抗體分子，就是單克隆抗體。 雜交 細(xì)胞 滅活的病毒等手段 小鼠骨髓瘤細(xì)胞 B淋巴細(xì)胞 經(jīng)免疫 的小鼠 提取 雜交瘤 細(xì)胞 第一次篩選 用特定的 選 擇性培養(yǎng)基 第二次篩選 能產(chǎn)生特定抗體、培養(yǎng)條件下能無(wú)限增殖的雜交瘤細(xì)胞 體外培養(yǎng) 注射到小鼠腹腔 提取單克隆抗體 3）、為何要進(jìn)行兩次篩選？ 4）、如何進(jìn)行第 2次篩選？ 培養(yǎng)在多孔培養(yǎng)板上，每孔只有一個(gè)雜交瘤細(xì)胞。第 2次篩選得到能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞群。 ? 生物導(dǎo)彈： 抗癌細(xì)胞的單克隆抗體 +放射性同位素 +化學(xué)藥物或細(xì)胞毒素 。準(zhǔn)確找到癌細(xì)胞位置，原位殺死癌細(xì)胞。 單克隆抗體的應(yīng)用 [例題 2] （ 1）在用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)
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