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某公司pcr系列產(chǎn)品操作培訓教材-在線瀏覽

2025-04-05 12:57本頁面
  

【正文】 再分裝 對照設置 ?定性試驗 每次試驗都必須設置陰陽性對照 ?定量試驗 個別醫(yī)院要求定量結果,需增加標準品 ( 10 10 10 108 copies) 標準品一般可以反復凍融 34次,超過 5次,則不建議使用 標準品置于 20℃ 中保存 操作注意事項 ?PCR試劑保存配制 ?PCR試劑應放于 20℃ 避光保存 ?PCR試劑應避免反復凍融 ?試劑配制時不能佩戴有粉手套 ?PCR mix與 Taq酶充分混勻 ?加模板時應避免吸到沉淀 漂浮的雜質常粘附于管壁,中間吸樣較安全 ?切勿在 PCR管上做標記,但應注意樣本順序 ?上機前應離心去除氣泡 ?標準品加樣時應盡量避免加樣誤差,影響標準曲線 儀器檢測通道選擇 STD系列產(chǎn)品 ? CT/NG/UU聯(lián)合檢測試劑盒 ? 淋球菌核酸檢測試劑盒 ? 沙眼衣原體核酸檢測試劑盒 ? 解脲脲原體核酸檢測試劑盒 樣本類型 采集方法 ?宮頸脫落細胞 用棉試子擦去宮頸口的分泌物,取宮頸環(huán)狀上皮與柱狀上皮轉化處宮頸脫落細胞。 樣本保存 ?樣本采集后,如若不能馬上檢測,應將樣本置于冰箱 4℃ 存放,并在一周時間內檢測。 ?一周后檢測的標本應保存在 20 ℃ 。 DNA提取 取 800ul樣本離心得沉淀 ↓ 加入細胞裂解液 50ul,煮沸 10min ↓ 12023離心 10min即可上機 若肉眼未見沉淀,可增加取樣量,再次離心收集沉淀; 若沉淀雜質較多,可用細胞保存液洗滌 12次; 血液多樣本,用蒸餾水洗滌 12次; 粘液多樣本,取樣時盡量去除粘液。 缺點 : HPV DNA純度較差,含有血紅素、蛋白、脂類等 PCR抑制劑。 ?血漿樣本 用無菌注射針頭抽取患者靜脈血 2 ml,于 含有 EDTA作為抗凝劑 的無菌收集管中,室溫放置不應超過 4 h, 1500 rpm離心 5 min,吸取血漿轉入 ml離心管中備用 樣本保存 ?樣本采集后,如若不能馬上檢測,應將樣本置于冰箱 28℃ 存放,并在 72h內檢測 ?20℃ 保存不超過 3個月 ?70℃ 下長期保存 ?應避免反復凍融 DNA提取 1)取 200ul樣本于 (血清 /血漿 /陰陽質控品 /陽性標準品 ); 2)加入 20ul蛋白酶 K; 3)加入 200ul溶液 L,混勻, 56℃ 溫浴 1015min; 4)加入 200ul無水乙醇,充分混勻; 5)將全部液體轉移至帶收集管的硅膠柱中; 6) 10000rpm離心 1min,棄廢液; 7)加入 500ul溶液 W1(
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