31菊花的組織培養(yǎng)-在線瀏覽
2025-02-16 00:58本頁面
【正文】 C保存配制好的培養(yǎng)基母液來制備 . 配置各種母液 23 ① 無機(jī)物中大量元素濃縮 10倍，微量元素濃縮 100倍，常溫保存 . ② 激素類、維生素類以及用量較小的有機(jī)物一般可按 1mg/ml的質(zhì)量濃度單獨(dú)配制成母液 . ③ 用母液配制培養(yǎng)基時(shí)，需要根據(jù)各種母液的濃縮倍數(shù)，計(jì)算用量 . 24 配置培養(yǎng)基 分裝到錐形瓶中，每瓶分裝 50ml或 100ml. ① 配制培養(yǎng)液 ② 調(diào) PH ③ 培養(yǎng)基的分裝 由于菊花的莖段的組織培養(yǎng)比較容易，因此不必添加植物激素 . 25 滅菌 分裝好的培養(yǎng)基連同其他器械一起進(jìn)行高壓蒸汽滅菌 . 選材 ：菊花莖段，取生長(zhǎng)旺盛的嫩枝 . （二）外植體消毒 消毒 ① 流水沖洗 菊花莖段用流水沖洗后可少許洗衣粉，用軟刷輕輕刷洗，刷洗后在流水下沖洗 20min左右 . 26 ② 酒精處理 用無菌吸水紙吸干外植體表面的水分，放入體積分?jǐn)?shù)為 70％ 的酒精中搖動(dòng) 2－ 3次 ，持續(xù) 6－7s，立即將外植體取出，在無菌水中清洗 . ③ 消毒液處理 取出后用無菌吸水紙吸干外植體表面的水分，放入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 ％ 的 氯化汞 溶液中 1－ 2min，取出后在無菌水中至少清洗 3次，漂凈 消毒液 . 27 （三）接種 污染的主要來源是空氣中的細(xì)菌和孢子，接種室消毒是至關(guān)重要的。 材料的切取和接種 28 29 接種注意事項(xiàng) ① 每接種一塊外植體前，鑷子需放入體積分?jǐn)?shù)為 75％的酒精溶液中消毒一次，然后在酒精燈火焰上燒一遍，冷卻后再接種 . ② 外植體在培養(yǎng)基中要分布均勻，放置外植體數(shù)量根據(jù)錐形瓶的大小確定，一般胡蘿卜 3－ 4塊，菊的莖或葉 6－ 8塊，也不要太少，以充分利用培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分和光照條件 . ③ 插入時(shí)應(yīng)注意方向， 不要倒插 。設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)可以取用一個(gè)經(jīng)過滅菌的裝有培養(yǎng)基的錐形瓶，與接種操作后的錐形瓶一同培養(yǎng)，用以說明培養(yǎng)基制作合格，沒有被雜菌污染。 2周之內(nèi)可以看到外植體上逐漸長(zhǎng)出乳白色或黃白色的瘤狀愈傷組織。 2周后，培養(yǎng)基成分接近耗盡，必須更換培養(yǎng)基，進(jìn)行繼代培養(yǎng) . 32 在愈傷組織繼代培養(yǎng)期間，將恒溫箱的門打開，讓愈傷組織見光，愈傷組織見光后顏色可以轉(zhuǎn)為綠色 . 試管苗的培養(yǎng) 當(dāng)愈傷組織長(zhǎng)到一定大小后，可以更換培養(yǎng)基，進(jìn)行試管苗的 見光培養(yǎng) . （五）移栽 移栽生根的菊花試管苗之前，應(yīng)先打開培養(yǎng)瓶的封口膜，讓試管苗在培養(yǎng)間生長(zhǎng)幾日 . 打開封口膜 清洗轉(zhuǎn)移 用流水清洗根部的培養(yǎng)基， 將幼苗移植到消過毒的蛭石或珍珠巖等環(huán)境下 生活一段時(shí)間 . 33 （六）栽培 移栽 珍珠巖： 固體基質(zhì)型，含水量高、蓄水性強(qiáng)、透性好，適合栽培 . 幼苗長(zhǎng)壯后，移栽到土壤中 . 幼苗移栽后，每天觀察并記錄幼苗的生長(zhǎng)情況，適時(shí)澆水、施肥，直至開花 . 34 35 三、課題延伸 一般來說，容易進(jìn)行無性繁殖的植物，也容易進(jìn)行組織培養(yǎng) . 實(shí)例：蘆薈、豆瓣綠、秋海棠、月季 . 36 (1)、培育無病毒植株 (2)、誘導(dǎo)離體的植物組織形成具有生根發(fā)芽能力的胚狀結(jié)構(gòu)，包裹上人造種皮，制成人工種子，可以解決 有些作物品種繁殖能力差，結(jié)子困難或發(fā)芽率低等問題 . (3)、基因工程中亦需用到植物組織培養(yǎng)的方法 植物組織培養(yǎng)的應(yīng)用： 37 人工種子 38 同常規(guī)的無性繁殖方法相比，組織
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