微生物檢測(cè)基礎(chǔ)知識(shí)-在線瀏覽
2025-01-29 15:41本頁(yè)面
【正文】 服、橡膠用品。多數(shù)微生物的營(yíng)養(yǎng)體和病毒在 50~65℃ ， 10分鐘就會(huì)被殺死；但各種孢子、特別是芽孢最能抗熱，其中抗熱性最強(qiáng)的是嗜熱脂肪芽孢桿菌，要在 121℃ ， 12分鐘才被殺死。 ? 效果，數(shù)量越多，熱死時(shí)間越長(zhǎng)。一般地講，蛋白質(zhì)、糖或脂肪存在，則提高抗熱性， pH在 7附近，抗熱性最強(qiáng)，偏向兩極，則抗熱能力下降，而不同的鹽類可能對(duì)滅菌產(chǎn)生不同的影響；固體培養(yǎng)基要比液體培養(yǎng)基滅菌時(shí)間長(zhǎng)。如外科手術(shù)需防止 細(xì)菌 進(jìn)入傷口 . 在各種 生物 實(shí)驗(yàn)中 ,為了防止微生物的生長(zhǎng)和 繁殖 影響實(shí)驗(yàn)的進(jìn)行 ,也要在無(wú)菌的環(huán)境 下進(jìn)行 . ? 無(wú)菌操作的要求是 : 1操作前將界面上的細(xì)菌和 病毒 等微生物殺滅 2操作過(guò)程中是界面與外界隔離 ,避免微生物的侵入 ? 1)實(shí)驗(yàn)前，無(wú)菌室應(yīng)打開(kāi)紫外線燈滅菌30分鐘以上 ,實(shí)驗(yàn)中應(yīng)穿工作衣帽 . ? 2)嚴(yán)格無(wú)菌操作，接種針、接種環(huán)在使用前后都必須火焰灼燒。 ? 4)沾有病原微生物的器材，應(yīng)置于指定地點(diǎn)。 ? 革蘭氏染色法將細(xì)菌分為革蘭氏陽(yáng)性和革蘭氏陰性 ,是由這兩類細(xì)菌細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)和組成不同決定的 . ? G＋菌：細(xì)胞壁厚，肽聚糖網(wǎng)狀分子形成一種透性障，當(dāng)乙醇脫色時(shí)，肽聚糖脫水而孔障縮小，透性降低 ,故保留結(jié)晶紫 碘復(fù)合物不易被洗脫而保留在細(xì)胞膜上。取 菌種培養(yǎng)物常規(guī)涂片 ,干燥 ,固定 . 2）草酸銨結(jié)晶紫染 1分鐘。 4）加碘液覆蓋涂面染 1分鐘。 ? 6）加 95%酒精數(shù)滴，并輕輕搖動(dòng)進(jìn)行脫色， 10秒后水洗，吸去水分。干燥，鏡檢。 （ 1） 姿勢(shì)：使用顯微鏡時(shí)必須端坐 ， 凳和桌高度適宜 。 用顯微鏡觀察標(biāo)本時(shí)要兩眼睜開(kāi) （ 如開(kāi)始不習(xí)慣 ， 可以一手掩目 ， 不可閉眼 ） （ 2） 光源：通常用日光燈或天然光線 ， 不用直射日光 ， 以免眼睛和鏡頭受損 。 光線的強(qiáng)弱可通過(guò)聚光器的升降 、光圈的大小及反光鏡的平面或凹面來(lái)調(diào)節(jié) ， 光線的適當(dāng)運(yùn)用是項(xiàng)重要的基本功 。 ② 高倍境：低倍鏡調(diào)節(jié)清晰后 ， 換上高倍境 ， 稍加調(diào)節(jié) ， 即可進(jìn)行觀察 ， 要避免細(xì)菌懸液等污染鏡頭 。 使用油鏡時(shí)要升高聚光鏡 ， 放大光圈 ， 調(diào)節(jié)反光鏡 ， 使射入鏡筒之光線最強(qiáng) 。 注視目鏡 ， 轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)器 ， 使物鏡上升少許 ， 見(jiàn)到標(biāo)本后 ， 左手轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)調(diào)節(jié)器 ， 使物象清晰；右手掌握移動(dòng)器 ， 檢查標(biāo)本 。 油鏡使用完畢 ， 須用擦鏡紙將鏡頭拭凈 。 因油鏡的折射率和玻片的折射率相近 ， 而與空氣的折射率相差較多 ，所以使用鏡油的目的是將鏡頭的鏡面和玻片之間的空間為鏡油所充滿 ， 這樣絕大部分光線可進(jìn)入鏡面內(nèi) ， 使視野明亮 ，便于觀察 。 （ 2） 顯微鏡要保持清潔 ， 鏡頭上如有油污時(shí) ， 須用擦鏡紙蘸取少許二甲苯輕輕擦拭 ，然后將二甲苯擦凈 ， 以免脫膠 。 酸 、 堿 、 氯仿 、乙醚及乙醇能使油漆脫落 ， 損壞機(jī)件 ， 應(yīng)避免接觸 。 （ 4） 顯微鏡時(shí)很貴重和精密的儀器 ， 使用時(shí)要十分愛(ài)惜 ， 各部件不要拆卸 。 一般計(jì)算顯微鏡的放大倍數(shù)是： 目鏡的放大率 物鏡的放大率＝顯微鏡的放大倍數(shù) 。 ? 二、食品中微生物的檢測(cè)。 ? 2)生理鹽水 %氯化鈉溶液 ? 3)刻度吸管的滅菌 (1ml、 10ml、 25ml) ? 尾部塞 (或不塞 )棉花 ,用舊報(bào)紙包好 ,或者不包全部放入滅菌桶中 . 121℃ 15分鐘高壓蒸汽滅菌 ? 4)9ml的鹽水試管 (18mm 180mm)塞上橡膠塞后， 121℃ 滅菌 15min ? 5)單料乳糖膽鹽發(fā)酵管 ? 按照乳糖膽鹽的使用說(shuō)明，配制成相應(yīng)的溶液，分裝到加有小倒管的試管(18mm 180mm)中，加入量以沒(méi)過(guò)小倒管為宜。 ? 6)雙料乳糖膽鹽發(fā)酵管 ? 只是稱取乳糖膽鹽的量加倍，其它與單料乳糖膽鹽發(fā)酵管相同 ? 7) 滅菌平皿 把多個(gè)平皿用報(bào)紙包好，或加入滅菌桶中， 121℃ 滅菌 15min ? 8)伊紅美藍(lán)瓊脂平板 按照伊紅美藍(lán)瓊脂的使用說(shuō)明配制成相應(yīng)的溶液 ,在高壓蒸汽滅菌鍋中進(jìn)行滅菌 ,115℃ ,在液體狀態(tài)時(shí) ? (無(wú)菌操作 )倒入平板中 ,每個(gè)平板約 15ml,冷卻凝固 ,待用 ? 9） 225ml滅菌生理鹽水（ 121℃ 15分鐘） ? 10）高鹽察氏培養(yǎng)基（按使用說(shuō)明進(jìn)行 配制和滅菌） ? ? 1)在酒精燈火焰周?chē)Q取 25g或吸取 25ml樣品加入到加有 225ml生理鹽水并經(jīng)過(guò)滅菌的三角瓶中，充分振蕩搖勻，制成(1:10)樣品稀釋液。 ?
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