動物細(xì)胞的融合與單克隆抗體-在線瀏覽
2024-09-26 03:19本頁面
【正文】 子重新排布，細(xì)胞膜打開，細(xì)胞發(fā)生融合。 融合后的雜交細(xì)胞經(jīng)過有絲分裂后仍能形成兩個完整的雜交細(xì)胞 細(xì)胞膜的流動性 滅活病毒、 PEG、電激等 融合后的細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂，形成完整的雜交細(xì)胞 誘導(dǎo)的手段？ 融合后細(xì)胞的類型？ AB雜種細(xì)胞遺傳物質(zhì) 有什么特點(diǎn)？ 三種 AA、 AB、 BB（ A、 B） 含兩種生物的遺傳物質(zhì) 動物細(xì)胞融合過程 原理？ 物理法的融合效率較高 ,且對細(xì)胞（原生質(zhì)體）的傷害小 ,易操作、控制和觀察。 、細(xì)胞免疫、腫瘤和生物新品種培育等的重要手段。 獲得雜種植株 物理、化學(xué)方法 （同左） 滅活的病毒 物理（離心、振 蕩、電激） 化學(xué)（聚乙二醇） 直接誘 導(dǎo)細(xì)胞融合 去壁 — 原生質(zhì)體 融合 — 誘 導(dǎo)新壁 — 雜種植株 細(xì)胞膜的流動性 細(xì)胞膜的流動性 結(jié)果 誘導(dǎo)方法 步驟 融合的原理 動物細(xì)胞融合 植物體細(xì)胞雜交 比較項(xiàng)目 植物、動物細(xì)胞融合的比較 獲得雜交細(xì)胞 小結(jié) 1 【 例 1】 能使動物細(xì)胞融合的特有的誘導(dǎo)因子是 （ ） 【 例 2】 融合后的雜交細(xì)胞的遺傳物質(zhì)有何特點(diǎn)（ ） A. 具有原來兩個或多個細(xì)胞的遺傳信息 【 例 3】 動物細(xì)胞融合的作用中最重要的是（ ） B B A 使用相應(yīng)的抗體檢測乙肝病毒 —— 抗原 二、單克隆抗體的制備 醫(yī)院一般怎樣檢測人體內(nèi)是否存在乙肝病毒？ 乙肝病毒模式圖 凡能夠引起機(jī)體產(chǎn)生特異性 免疫應(yīng)答的物質(zhì)叫做抗原 。有時(shí)自身的組織或細(xì)胞也會成為抗原，如癌細(xì)胞等。 各種抗原的決定簇?cái)?shù)目不同，同一抗原的決定簇可能有多種。 抗體分布于血清中，也分布于組織液及外分泌液中。 特點(diǎn)： 產(chǎn)量低、純度低、特異性差、反應(yīng)不夠靈敏。 如果利用單個 B淋巴細(xì)胞進(jìn)行無性繁殖（克隆），形成細(xì)胞群，這樣的細(xì)胞群就有可能產(chǎn)生出 化學(xué)性質(zhì)單一 、 特異性強(qiáng) 的抗體 —— 單克隆抗體 。 我們還是拿不到 McAb,怎么辦 ? 篩選！篩出雜交瘤細(xì)胞。 關(guān)鍵一步 ⑵ 如何誘導(dǎo)融合？ 加入聚乙二醇 （ PEG） ⑴ 如何得到 B淋巴細(xì)胞？ 單克隆抗體的 過程 ⑶ 細(xì)胞兩兩融合后，有哪些類型？ BB B瘤 (雜交瘤細(xì)胞 ) 瘤 瘤 ⑷ 如何篩選出雜交瘤細(xì)胞？ 單克隆抗體制備過程中，總共有兩次篩選，第一次篩選出雜交瘤細(xì)胞，第二次篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞，兩次篩選的原理和方法是不相同的。 ② 人淋巴細(xì)胞中有這兩種 DNA的合成途徑，但一般不分裂增殖。 你想到篩選雜交瘤細(xì)胞的方案了么？ 小資料： 在培養(yǎng)液中加入氨基蝶呤，收集增殖細(xì)胞！ 加入氨基嘌呤后，使 D 合成途徑阻斷，僅有 D 合成途徑的骨髓瘤細(xì)胞及其彼此融合的細(xì)胞就不能增殖， 但人淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合后的雜種細(xì)胞因?yàn)榭梢岳昧馨图?xì)胞中的 S 途徑合成DNA而增殖。最終選出分泌預(yù)定特異抗體的雜交細(xì)胞株進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)。 ⑻ 如何得到大量的單克隆抗體？ 體內(nèi)培養(yǎng) 體外培養(yǎng) 單克隆抗體 —— 化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng) 單克隆抗體 篩 選 雜交細(xì)胞 雜交瘤細(xì)胞 體外或體內(nèi) 細(xì)胞培養(yǎng) 篩選 骨髓瘤 細(xì)胞 誘導(dǎo)細(xì)胞融合 特異性雜交瘤細(xì)胞 雜交瘤細(xì)胞系 提取 經(jīng)過免疫的 B淋巴細(xì)胞 動物細(xì)胞融合技術(shù) 動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù) 單克隆抗體的制備過程： 特點(diǎn)：既能產(chǎn)生專一抗體又能大量繁殖 特點(diǎn)：特異性強(qiáng)靈敏度高可大量制備 注射抗原 免疫 單抗隆抗體的應(yīng)用 ① 作為診斷試劑 ② 定位診斷腫瘤、心血管畸形等疾病 用于體外診斷人類和動植物疾病及病原鑒定， 純度高、特異性強(qiáng) ，具有 準(zhǔn)確、高效、簡易、快速 的優(yōu)點(diǎn)。 單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)： 特異性強(qiáng)，靈敏度高，并可以大量制備。 B 體外培養(yǎng) 骨髓瘤細(xì)胞 雜交瘤細(xì)胞 足夠數(shù)量的細(xì)胞群 注射到 小
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