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甲醛降解細菌的分離鑒定和降解效果測定-在線瀏覽

2024-09-14 18:28本頁面
  

【正文】 理生化特性測定,并提取并純化其基因組DNA,通過PCR擴增菌株的16SrDNA,測序結(jié)果表明該菌株和蘇云金芽孢桿菌的同源性為100%。甲醛降解去除率達到72%以上。大量文獻記載,甲醛對人體健康的影響主要表現(xiàn)在嗅覺異常、刺激、過敏、肺功能異常、肝功能異常和免疫功能異常等方面。目前,治理甲醛污染的方法主要有化學反應方法、物理吸附技術、臭氧負離子技術、納米光催化技術、低溫等離子技術、植物凈化和生物降解等方法。生物法降解甲醛具有降解效果好、投資費用低、占地面積小、工藝流程簡單、無二次污染等優(yōu)點而迅速成為國內(nèi)外研究的熱點。1. 材料與方法 實驗材料(1)試劑及試劑盒草酸銨結(jié)晶紫染液、盧氏碘液、番紅復染液、孔雀綠染液、番紅染液、1%結(jié)晶紫染液、20%硫酸銅水溶液、硝酸銀鞭毛染色液、甲基紅試劑、吲哚試劑、PCR產(chǎn)物純化試劑盒(2)16S rDNA 基因的擴增用試劑:10buffer (including Mg2+)、dNTP、PCR引物(正向引物Pf : 5′AGAGTTTGATCCTGGCTCAG3′;反向引物Pr : 5′ACGGCTACCTTGTTACGACT3′)、MgClTaq Plus DNA Polymerase(3)培養(yǎng)基和溶液Ⅰ、 LB培養(yǎng)基:胰化蛋白胨10g、NaCl 10g、酵母提取物50g、H2O 1000mL、Ⅱ、MS培養(yǎng)基:MgSO4 KH2PO4 g K2HPO4 NH4NO4 ,H2O 1000mL。Ⅱ、取菌懸液,稀釋涂布于LB平板上,30℃恒溫培養(yǎng)24h。分別取樣,測定其溶液中的甲醛濃度,選出甲醛濃度最低的搖瓶,用棉簽接種于LB斜面上,30℃恒溫培養(yǎng)24h,分離出菌株。(2)進行DNA提取,16S rDNA 序列的擴增(PCR反應條件為:95 ℃ 4min ;95 ℃ 1min ,48 ℃1min ,72 ℃ 1min ,30 個循環(huán);72 ℃ 10min),瓊脂糖凝膠電泳及PCR產(chǎn)物純化、測序,確立同源性。;將離心管放在12000r/min的高速離心機中離心10min;取出后,取上清夜5μL于比色管中,加5mL水將其稀釋1000倍,并加入1mL的顯色劑;最后放入58℃的水浴鍋中顯色30min。2. 結(jié)果與分析 菌株分離純化結(jié)果,得到一株降解甲醛效果較好的菌株,命名為9號菌。所以初步
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