血庫作業(yè)指導書(sop)doc-在線瀏覽
2024-08-28 14:22本頁面
【正文】 用手指末梢血作血型檢測時，最少樣品量為100ul，如手指有凍瘡，則主張采耳垂血。4. 標本運輸：室溫運輸5. 標本拒收標準：細菌污染、溶血標本不能作測定6. 試劑 試劑名稱：ABO血型檢測試劑 試劑生產(chǎn)廠家：南京華欣藥業(yè)生物工程有限公司 試劑組成試劑1：抗A分型試劑（藍色），效價1：128，2℃8℃避光保存，室溫放置不宜過久。試劑3：5％A、B及O型紅細胞鹽水懸液，自制。紅細胞懸液的配制懸液濃度（％）壓積紅細胞（滴）鹽水（滴）25102011112ml（40）（16）（8）（4）為了防止紅細胞懸液敏感性不一致，可隨機采取3個或以上的健康成人血液，按A、B、O型分別混合后，按上法制備。將抗A試劑、抗B試劑各一滴分別滴于玻片（或瓷盤）上A、B處。 另取潔凈玻片1張（或白瓷板1塊），用蠟筆劃成方格，標明A細胞、B細胞和O細胞，用滴管各加受檢者血清1滴，再分別用滴管滴加A、B和O型試劑紅細胞懸液1滴。如以玻片做試驗時，也可用低倍鏡觀察結(jié)果。向B管滴加抗B分型試劑1滴。 另取潔凈小試管（內(nèi)徑10mm60mm）3支，分別標明A、B和O細胞。 搖勻后以1000轉(zhuǎn)/分的速度離心1分鐘判定結(jié)果。如肉眼不見凝集，應(yīng)將反應(yīng)物倒于玻片上，再以低倍鏡檢查。 凝集強度判斷標準：4＋＝紅細胞凝集成一大塊，血清清晰透明。2＋＝紅細胞凝塊分散成許多小塊，見到游離紅細胞。177。MF＝混合凝集外觀是指鏡下可見少數(shù)紅細胞凝集，而絕大多數(shù)紅細胞仍呈分散分布。 按下表報告受檢者紅細胞ABO血型ABO血型正反定型結(jié)果分型血清＋受檢者紅細胞受檢者受檢者血清＋試劑紅細胞抗－A＋——＋抗－B—＋—＋抗－A＋B＋＋—＋血型ABOABA細胞—＋＋—B細胞＋—＋—O細胞————9. 臨床意義：輸血、器官移植與親子鑒定10. 操作性能：快速簡便、特異性強、靈敏度高、重復(fù)性好。應(yīng)用37℃40℃的生理鹽水洗滌紅細胞可去除紅細胞表面附著的導致紅細胞凝集的冷集素。如抗—A血清效價不高，可將A亞型誤定為O型，AB型誤定為B型。 受檢者紅細胞上抗原位點過少（如亞型）或抗原性減弱（見于白血病或惡性腫瘤）以及B類或cisAB等。 受檢者血清中缺乏應(yīng)有的抗—A和抗—B抗體，如丙種球蛋白缺乏癥。 由細菌污染或遺傳因素引起多凝集或全凝集往往是正反定型不符的原因。 老年人血清中抗體水平大幅度下降。 將紅細胞洗滌數(shù)次，配成2％鹽水細胞懸液，用抗—A、抗—B、抗—AI，抗—A＋B及抗—H做試驗可以得到其它有用的信息。 用AAB、O紅細胞從自身紅細胞檢查受檢血清。 如果試驗結(jié)果未見凝集，應(yīng)將細胞及血清試驗至少在室溫和4℃放置30min，用顯微鏡檢查核實。后者只對80％HAB分泌型的人有用。往往可使緡錢現(xiàn)象消失。 如受檢者為A型血而疑為有類B抗原時，可用下列方法進行鑒別： 觀察細胞與抗—A及抗B的凝集強度，與抗A的反應(yīng)要比抗—B的反應(yīng)強。 用受檢者紅細胞與自身血清作試驗，血清中的抗—B不凝集自身紅細胞上的類B抗原。 核對患者的診斷，類B抗原的形成與結(jié)腸癌、直腸癌、革蘭陰件桿菌感染有關(guān)。 試管、滴管和玻片必須清潔干燥，防止溶血。 按理IgM抗—A和抗—B與相應(yīng)紅細胞的反應(yīng)溫度以4℃為最強，但為了防止冷凝集現(xiàn)象干擾，一般仍在室溫（20℃24℃）內(nèi)進行試驗，37℃可使反應(yīng)減弱。 觀察時應(yīng)注意紅細胞呈特異性凝集、繼發(fā)性凝固以及緡錢狀排列的區(qū)別。 試劑一旦發(fā)現(xiàn)渾濁不得使用。13. 參考文獻中國人民共和國衛(wèi)生部醫(yī)政司編. 全國臨床檢驗操作規(guī)程（第二版）. 1997，8992Rh（D）血型鑒定 實驗原理 紅細胞與抗D抗體發(fā)生凝集反應(yīng)表明該細胞有D抗原，反之，無凝集現(xiàn)象表明試驗的紅細胞缺少正常強度的D抗原。如果不能立即實驗,應(yīng)將樣品貯存于28C。 儀器、試劑、校準品、質(zhì)控品、培養(yǎng)基、以及其他所需物品： Rh(IgM)血型定型試劑（單克隆抗體）：上海血液生物醫(yī)藥有限責任公司，產(chǎn)品注冊號：國藥準字S20060018,包裝、規(guī)格：每盒內(nèi)裝有1支試劑，10ml/支，儲存要求：存放2—8℃，有效期內(nèi)使用。 再加入1滴40%50%的被檢紅細胞懸液。 在圓形的玻片區(qū)域中混勻，前后緩慢搖晃玻片。不要將試劑的干燥與凝集相混淆。 鹽水試管法 加一滴抗D試劑于預(yù)先標記好的試管中 再加1滴約3%—5%紅細胞生理鹽水懸液于試管中。 離心，速度和時間可選擇以下二種之一： 轉(zhuǎn)速1000rpm，時間一分鐘1分鐘或3400rpm，時間15秒。 觀察凝集狀況，并立即記錄結(jié)果。 若是陰性結(jié)果，需在37℃孵育15分鐘30分鐘，然后再離心觀察結(jié)果。 微量板法（U型板） 加一滴抗D試劑于U型底的微孔中。 用機械的方法將U型板混勻。不同的離心機，不同的微量板所需要的離心條件有所區(qū)別，正確實驗的結(jié)果需要適當?shù)碾x心，使反應(yīng)板產(chǎn)生清晰的細胞扣及透亮的上清液。 結(jié)果判斷：用機械震蕩U型板，再懸浮細胞，根據(jù)懸浮情況來判斷凝集。 可用肉眼和自動化判讀結(jié)果。 參考值范圍 陽性反應(yīng)：出現(xiàn)紅細胞凝集，為RhD陽性。 產(chǎn)品性能指標 抗D（IgM）效價大于等于1：64（ccDeeO型） 方法的局限性 本實驗不能凝集CategoryDVI細胞，對于陰性和弱陽性結(jié)果，按有關(guān)安全輸血規(guī)范進行確認實驗，必要時送血型參比實驗室進行確認。 試劑如出現(xiàn)混濁則不能使用，若開瓶使用時間較
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