【正文】
LIA 具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、線性范圍寬、操作簡(jiǎn)便、不需要十分昂貴的儀器設(shè)備等特點(diǎn)。CLIA與放射免疫分析(RIA)、熒光免疫分析(IFA)及酶免疫分析(EIA)相比,具有無輻射、標(biāo)記物有效期長(zhǎng)并可實(shí)現(xiàn)全自動(dòng)化等優(yōu)點(diǎn)?;瘜W(xué)發(fā)光免疫分析法根據(jù)標(biāo)記物的不同可分為三大類,即化學(xué)發(fā)光免疫分析、化學(xué)發(fā)光酶免疫分析和電化學(xué)發(fā)光免疫分析法。不同類型的化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)原理和方法各異,都要求方法、儀器、試劑三位一體,故在研究和生產(chǎn)上的應(yīng)用難度較大。但這種分析方法在農(nóng)藥快速檢測(cè)中尚未得到廣泛應(yīng)用。其基本原理為:待測(cè)物質(zhì)和分子識(shí)別元件特異性結(jié)合,發(fā)生生物化學(xué)反應(yīng),產(chǎn)生的生物學(xué)信息通過信號(hào)轉(zhuǎn)換器轉(zhuǎn)化為可以定量處理的電、光等信號(hào),再經(jīng)儀表放大和輸出,從而達(dá)到分析檢測(cè)的目的。它是在固定化酶的催化作用下,生物分子發(fā)生化學(xué)變化后,通過換能器記錄變化從而間接測(cè)定出待測(cè)物濃度。為了提高乙酰膽堿酯酶生物傳感器的靈敏度,使其更有效地應(yīng)用于有機(jī)磷農(nóng)藥的快速檢測(cè),可以選擇雞腦中的乙酰膽堿酯酶作為此類生物傳感器的酶源[19]。免疫生物傳感器包括三個(gè)基本部分,固定有抗原或抗體的基體的生物芯片部分,將抗體與被測(cè)物特異性結(jié)合產(chǎn)生的光、熱、壓力等物理化學(xué)信號(hào)轉(zhuǎn)換為電信號(hào)的轉(zhuǎn)換器部分,以及將轉(zhuǎn)換器產(chǎn)生的電信號(hào)進(jìn)行放大和數(shù)字化的電部分。許園園等[21]制備的一種以金為電極根據(jù)抗體與抗原之間特異反應(yīng)前后電極電位的變化定量測(cè)定甲基對(duì)硫磷的免疫傳感器,—15μg/ml,并可以再生、重復(fù)利用。其制備過程是先用功能單體和模板分子以共價(jià)鍵或非共價(jià)鍵形成復(fù)合物,再加入交聯(lián)劑、引發(fā)劑和有機(jī)溶劑,在一定的條件下聚合,使之生成聚合物,最后通過洗脫的方法,將模板分子從聚合物中除去,這樣就在聚合物上留下了和模板分子在空間結(jié)構(gòu)、結(jié)合點(diǎn)位完全匹配的三維空穴,這個(gè)三維空穴可以重新專一地、高選擇地再和模板分子結(jié)合,從而使改聚合物對(duì)模板分子具有專一的識(shí)別功能[22]。分子印跡聚合物具有特異的選擇性和親和力,可以為樣品中農(nóng)藥殘留的分析提供方便,在樣品前處理上應(yīng)用研究最多,形式主要為特異性固相萃取[21, 22]和膜分離[24],農(nóng)藥中研究最多的是三嗪類[25]。 生物活體測(cè)定技術(shù)目前利用生物活體開展農(nóng)藥殘留檢測(cè)的主要是發(fā)光細(xì)菌,已用于檢測(cè)甲胺磷、敵敵畏等常用有機(jī)磷農(nóng)藥。農(nóng)藥殘留的快速檢測(cè)技術(shù)是防止有毒物質(zhì)污染食品和環(huán)境的重要手段,隨著公眾對(duì)食品安全、生態(tài)環(huán)境的重視,對(duì)農(nóng)藥殘留的檢測(cè)技術(shù)顯得越來越重要,發(fā)展各種快速、新型的快速檢測(cè)技術(shù),將會(huì)成為農(nóng)殘檢測(cè)的研發(fā)熱點(diǎn)和發(fā)展趨勢(shì)。(2)隨著人類對(duì)蔬菜食品質(zhì)量要求的提高,加上檢測(cè)技術(shù)的不斷進(jìn)步,使農(nóng)藥殘留檢出的靈敏度大大提高。(3)前處理工作正向著省時(shí)、省力、低廉、減少溶劑、減少對(duì)環(huán)境的污染、系統(tǒng)化、規(guī)范化、微型化和自動(dòng)化方向發(fā)展;各種在線聯(lián)用技術(shù)可避免樣品轉(zhuǎn)移的損失,減少各種人為的偶然誤差,將是農(nóng)藥殘留分析方法研究的重點(diǎn)。(5)現(xiàn)在使用和生產(chǎn)的都是化學(xué)農(nóng)藥,其主要成份都是分子量較小的有機(jī)物,今后生物源農(nóng)藥將代替化學(xué)農(nóng)藥,分析重點(diǎn)將轉(zhuǎn)向與生物組織成份很難區(qū)分的生物大分子農(nóng)藥,因此未來的分析工作者必須掌握細(xì)胞化學(xué)、發(fā)酵化學(xué)、免疫化學(xué)等方面的基礎(chǔ)知識(shí)。 edited by H Ohkawa, H Miyagawa and PW Lee。Co. KGaA, Weinheim, 2007.[4] GB/T —2003 蔬菜中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量的快速檢測(cè)[S].中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部,中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)發(fā)布,2003.[5] GB/T 18630—2002 蔬菜中有機(jī)磷及氨基甲酸酯農(nóng)藥殘留量的簡(jiǎn)易檢驗(yàn)方法 酶抑制法[S].中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局發(fā)布,2002.[6] NY/T 448—2001 蔬菜上有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留毒快速檢測(cè)方法[S].中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部發(fā)布,2001.[7] Macrom P, Gee S, Hammock B D. Immunochemical techniques forenvironmental analysis II. Antibody production and immunoassay development[J]. Trends in Analytical Chemistry,1995,8(14):415425.[8] 徐德武,楊根海,秦鳳