細菌內(nèi)毒素的簡介ppt課件-在線瀏覽
2025-06-29 12:51本頁面
【正文】 細菌外毒素是一種由活菌合成并釋放出來，對熱敏感的蛋白質(zhì)。 外毒素與內(nèi)毒素的主要區(qū)別 區(qū)別要點 外毒素 內(nèi)毒素 來源 G+、部分 G G 存在不位 胞漿內(nèi)合成分泌至菌體外 細胞壁成分 化學(xué)成分 蛋白質(zhì) 脂多糖 穩(wěn)定性 不穩(wěn)定， 6080℃ 破壞 160240℃ 破壞 毒性作用 強，有選擇性 弱 抗原性 強，可制成類毒素 弱 舉例 肉毒毒素，白喉外毒素 大腸桿菌內(nèi)毒素 ? 內(nèi)毒素的主要生物活性： 1 發(fā)熱反應(yīng) 2 白細胞反應(yīng) 3 代謝性酸中毒 4 感染性休克 5 彌漫性血管內(nèi)凝血（ DIC) ? 細菌內(nèi)毒素標準品分為細菌內(nèi)毒素國際標準品、國家標準品和工作標準品。 ? 1996年 WHO 建立第二批國際內(nèi)毒素標準品（ 94/580， 10000IU），規(guī)定 1IU=IEU。 ? 細菌內(nèi)毒素工作品分為凍干品和液體兩種劑型，均可用于鱟試劑復(fù)核、干擾試驗和實驗中的陽性對照。 ? 2022年版中國藥典規(guī)定細菌內(nèi)毒素檢查用水系指與靈敏度 的鱟試劑 24h不產(chǎn)生凝集反應(yīng)的滅菌注射用水。多糖部分又可進一步分為 O特異性多糖鏈、核心寡聚糖。 核心寡聚糖分為內(nèi)核和外核。類脂 A是 LPS的毒性及生物活性中心。不同種屬細菌合成的類脂 A的分子組成及其骨架上的取代基團性質(zhì)有差異。 我國國家標準品 981是用 IS2為基準標定的我國第 6批國家標準品。 ? 細菌內(nèi)毒素的限值 供試品細菌內(nèi)毒素限值按一下公式確定L=K/M，式中 L為供試品內(nèi)毒素限值，以EU/ml、 EU/mg、 EU/U表示。 M為人用最大劑量，以ml/kg/hr,mg/kg/hr,U/kg/hr表示，中國人均體重按 60kg計算。 4中國藥典 2022年版細菌內(nèi)毒素檢查法的修訂內(nèi)容 2022年版定義為：利用鱟試劑與細菌內(nèi)毒素產(chǎn)生凝集反應(yīng)的機理，以判斷供試品中細菌內(nèi)毒素的限量是否符合規(guī)定。 ：凝膠法和光度測定法，供試品檢測時，可用其中任意一種方法進行試驗，只有當測定結(jié)果有爭議時，以凝膠法結(jié)果為準。 ? ，明確了供試品溶液的 PH 值在 ~，配制酸、堿及緩沖鹽的容器應(yīng)去除內(nèi)毒素，水用細菌內(nèi)毒素檢查用水。 ，陰性對照和陽性對照的平行管數(shù)都增加為 2支。 。 250 ℃ 至少 30 Min,或 180 ℃至少 2h,也可用其他適宜的方法。 1℃ 保溫 60177。按公式計算 當 s＜ λ=log1(Σx/4) 計算鱟試劑的靈敏度； s≥時，測定無效。 S 標準差 X 4個連續(xù)內(nèi)毒素稀釋液最低陽性結(jié)果濃度的對數(shù)值。 樣品稀釋到 MVD， 1支 NC, 1支 PC,1支PPC 2支供試品。 結(jié)果判斷 PC為陽性 NC為陰性 樣品均為陰性，合格 PC為陽性 PPC為陽性 NC為陰性 樣品均為陰性，合格 PC為陽性 PPC為陽性 NC為陰性 樣品均為陰性，合格 其他 鱟試劑靈敏度供試品細菌內(nèi)毒素限量不超過 樣品溶液不稀釋，當結(jié)果出現(xiàn)陽性時，1→2 稀釋， 4支， 1支陽， 無熱原注射用水 為浸提介質(zhì) 細菌內(nèi)毒素檢查用水內(nèi)毒素含量小于三、試驗操作 ? ? 鱟試劑靈敏度復(fù)核項的目的不僅是考察鱟試劑靈敏度和細菌內(nèi)毒素工作標準品的效價是否準確，也是考察檢驗人員操作方法是否正確和試驗條件是否符合規(guī)定。 ? 檢查方法以及供試品陽性對照結(jié)果呈陰性時確定供試品是否存在抑制作用。 ? 2試驗材料及用具 天平、電熱干燥
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