高分子雜質(zhì)的檢查ppt課件-在線瀏覽
2025-06-24 12:07本頁面
【正文】 分離純化的。分子越小，進入凝膠內(nèi)部越深，所走的路程越多，故小分子最后流出柱外，而大分子先從柱中流出。這樣樣品經(jīng)過凝膠層析后，分子便按照從大到小的順序依次流出，達到分離的目的。但后來報道中指出了 Sephadex G－ 25 對一些青霉素類藥物 (如 PL－ 385)有強吸附作用 ,青霉噻唑酸的峰出現(xiàn)在聚合物峰的區(qū)域 ,氨基 (amide) 共價體二聚物與青霉噻唑酸有相同的 Kav 值 ,因此可干擾測定。 Kav值的大小和凝膠柱床的總體積（ Vt）、外水體積（ V0）以及分離物本身的洗脫體積（ Ve）有關(guān)： Kav = (Ve－ V0)/(Vt－ V0) 在限定的層析條件下， Vt和 V0都是恒定值，而 Ve是隨著分離物分子量的變化而改變。反之，分子量小 Ve值大， Kav值大。 總之，以上報道的分離、分析方法因操作繁瑣 ,實驗誤差大等原因 ,難于滿足質(zhì)量控制的需要。 Sephadex G10 葡聚糖凝膠 分子結(jié)構(gòu) (1)葡聚糖凝膠 葡聚糖凝膠是指由天然高分子－葡聚糖與其它交聯(lián)劑交聯(lián)而成的凝膠。常見的有兩大類，商品名分別為 Sephadex 和 Sephacryl。Sephadex 的主要型號是 G10 ~ G200，后面的數(shù)字是凝膠的吸水率 (單位是 mL / g 干膠 )乘以 10。Sephadex 的親水性很好，在水中極易膨脹，不同型號的 Sephadex 的吸水率不同，它們的孔穴大小和分離范圍也不同。 Sephadex 中排阻極限最大的 G200為 8 105。 Sephadex 穩(wěn)定工作的 pH 一般為2~10。 Sephadex G25和 G50中分別加入羥丙基基團反應(yīng)，形成 LH 型烷基化葡聚糖凝膠，主要 型號為 Sephadex LH20和 LH60，適用于以有機溶劑為流動相，分離脂溶性物質(zhì)，例如膽固醇、脂肪酸激素等。 ② 緩沖液中的陰離子種類 ,陰離子所帶的負電荷越多 ,溶質(zhì)的 Kav 值相對越大 ,色譜峰越易拖尾 。 ④ 流動相的 pH 也可通過影響溶質(zhì)的解離狀態(tài)來影響溶質(zhì)的保留行為。在酸性條件下氨基主要以 NH3+ 的形式存在 ,在堿性條件下氨基主要以 NH2 的形式存在 , 報道中還指出了 β－內(nèi)酰胺抗生素在Sephadex G－ 10 凝膠色譜系統(tǒng)中，色譜行為的定量關(guān)系 。 同時其利用在特定情況 (純 水、 0. 5 % 葡萄糖溶液
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