mcab單克隆抗體ppt課件-在線瀏覽
2025-06-22 18:19本頁面
【正文】 離心 5－ 6min 用含 20％ NCS或 FCS的培養(yǎng)液懸浮，調(diào)整細胞數(shù)至 1 105 加入 96孔板， 100ul每孔 放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng) ? 制備免疫脾細胞 ：最后一次加強免疫 3天后處死小鼠 無菌取脾臟，培養(yǎng)液清洗 脾臟研碎，過不銹鋼篩網(wǎng) 離心，細胞用培養(yǎng)液洗 2次 取 108脾臟細胞備用 ? 制備骨髓瘤細胞 ：取對數(shù)生長骨髓瘤細胞離心 用無血清培養(yǎng)液洗 2次 取107細胞備用 融合 ： ⑴ 將骨髓瘤細胞與脾臟細胞按 1： 10或 1：5的比例混合，在 50ml離心管中用無血清培養(yǎng)液洗 1次，離心 1200rpm,8min， 棄上清； ⑵ 90s內(nèi)加入 37℃ 預(yù)溫的 1ml45％PEG溶液，邊加邊搖， 37℃ 水浴 90s； ⑶加 37℃ 預(yù)溫的不完全培養(yǎng)液以終止 PEG作用，每隔 2min分別加入 1ml、 2ml、3ml、 4ml、 5ml和 6ml； 聚乙二醇（ PEG） 可沉淀蛋白質(zhì) ? ⑷ 離心， 800rpm,6min； ⑸ 棄上清，用含20％小牛血清 HAT選擇培養(yǎng)液重懸； ⑹將上述細胞加入已有飼養(yǎng)細胞的 96孔培養(yǎng)板內(nèi)，每孔 100ul ， 放
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