發(fā)酵培養(yǎng)基滅菌ppt課件-在線瀏覽
2025-06-19 12:08本頁(yè)面
【正文】 依據(jù)。 一般取 N = ，即 1000次滅菌中有 1 次失敗。 原污染程度為每 1mL有 2*105個(gè)耐熱細(xì)菌芽孢， 121度時(shí)滅菌速 度常數(shù)為 。 解： N0=40 106 2 105=8 1012（個(gè)） Ns=（個(gè)） K= NsNKNsNKt00 lg3 0 ??( m i n ))108l g ( 150 ???? NsNKt24 連續(xù)滅菌（連消） 連續(xù)滅菌的滅菌時(shí)間，仍可用滅菌公式計(jì)算，但培養(yǎng)基中的含菌數(shù)，應(yīng)改為每單位體積 (1mL)培養(yǎng)基的含菌數(shù)，則滅菌公式變換為下式 式中 c0—單位體積培養(yǎng)基滅菌前的含菌數(shù)，個(gè)／ mL 。 NtNKNtNKt00 ??25 【 例 】 若將上例中的培養(yǎng)基采用連續(xù)滅菌，滅菌溫度為 131℃ ，此溫度下滅菌速率常數(shù)為 15min1，求滅菌所需的維持時(shí)間。因此，必須選擇一個(gè)既能滿足滅菌需要，又可使培養(yǎng)基的破壞盡可能養(yǎng)活的滅菌工藝條件。K)] e — (exp) 28 ?′= A′ e R T E′ － — A ′— 比例常數(shù)； E′ — 分解活化能， (?E′) （ J/mol） 。K)] e — (exp) 滅菌時(shí)，培養(yǎng)基成分分解速率常數(shù) K`與溫度之間的關(guān)系 也可用阿累尼烏斯公式表示： 29 ?1= A e R T1 E － — ?2= A e － — E R T2 相除取對(duì)數(shù) ln ?2 ?1 = E 1 1 R T1 T2 － 〔 〕 在滅菌時(shí)，當(dāng)溫度變化，菌死亡速率常數(shù) ?和培養(yǎng)基成分破壞速率常數(shù) ?′都變化。 ```lnln1212EEKKKK???）（）（33 從上述的分析可知，在熱滅菌過程中，同時(shí)會(huì)發(fā)生微生 物死亡和培養(yǎng)基破壞這兩種過程，且這兩種過程的進(jìn)行 速度都隨溫度的升高而加速，但微生物的死亡速率隨溫 度的升高更為顯著。 滅菌溫度 ℃ 滅菌時(shí)間 （ 分 ） 營(yíng)養(yǎng)成分破壞量 % 100 400 110 36 115 15 120 4 130 145 150 再看表滅菌溫度、時(shí)間與營(yíng)養(yǎng)成分破壞 量的關(guān)系（ N/No=） 據(jù)測(cè)定，每升高 10℃ 時(shí)一般化學(xué)反應(yīng) 的反應(yīng)速率的增加倍數(shù)是 ， 而殺死芽孢為 510，殺死微生物細(xì)胞 為 35左右。 結(jié)論 2：在滅菌時(shí)選擇較高的溫度、較短的時(shí)間，這樣便 既可達(dá)到需要的滅菌程度，同時(shí)又可減少營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的損失。哪一種方 法好，為什么？ 答：從理論研究和生產(chǎn)實(shí)踐都可證明，在滅菌過程中，同時(shí)會(huì)發(fā)生微生物死亡和培養(yǎng)基破壞這兩種過程，且這兩種過程的進(jìn)行速度都隨溫度的升高而加速，但微生物的死亡速率隨溫度的升高更為顯著。 35 影響滅菌的因素 ?培養(yǎng)基中氫離子濃度對(duì)滅菌的影響 培養(yǎng)基中氫離子濃度直接影響滅菌的效果。 溫度 /℃ 孢子數(shù) /（個(gè)/ml） 滅菌時(shí)間 /min pH值 pH值 pH值 pH值 pH值 120 10000 8 7 5 3 3 115 10000 25 25 12 13 13 110 10000 70 65 35 30 24 100 10000 740 720 180 150 150 pH ～ ，微生物最耐熱； pH ＜ ，氫離子易滲入微生物細(xì)胞內(nèi)，從而改變細(xì)胞的生理反應(yīng)，促使其死亡。 36 ?微生物細(xì)胞中水分對(duì)滅菌的影響 細(xì)胞含水越多，蛋白質(zhì)變性的溫度越低 ?微生物細(xì)胞菌齡對(duì)滅菌的影響 老細(xì)胞水分含量低、低齡細(xì)胞水分含量高 ?培養(yǎng)基的物理狀態(tài)對(duì)滅菌的影響 ?培養(yǎng)基中微生物數(shù)量對(duì)滅菌的影響 37 為什么說培養(yǎng)基中脂肪、糖分和蛋白質(zhì)的含量越 高，滅菌溫度就得相應(yīng)高些 ？ 問題 問題 滅菌的徹底與否應(yīng)以殺死營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞為準(zhǔn)還是殺死細(xì)菌孢為標(biāo)準(zhǔn)，為什么？ 環(huán)境 耐熱性 大腸桿菌 水 60～ 65℃ 便死亡 10％糖液 70℃ ， 4～ 6min 30％糖液 70℃ ， 30min 答：培養(yǎng)液中油脂、糖類及一定濃度的蛋白質(zhì)會(huì)增加微生物的耐熱性， 高濃度有機(jī)物會(huì)包于細(xì)胞周圍形成一層薄膜，影響熱的傳遞；因此，在固形物含量高的情況下，滅菌溫度可高些。 38 答：泡沫中的空氣形成隔熱層 ,使傳熱困難，熱難穿透過去殺滅微生物。 問題 在滅菌過程中，為什么說培養(yǎng)基發(fā)生泡沫對(duì)滅菌很不利？ 液膜 空氣 空氣 39 問題 答：蒸汽滅菌過程中，溫度的控制是通過控制罐內(nèi)的 蒸汽壓力 來實(shí)現(xiàn)。但是如果罐內(nèi)空氣排除不完全，壓力表所顯示的壓力就不單是罐內(nèi)蒸汽壓力， 還包括了空氣分壓 ，因此，此時(shí)罐內(nèi)的實(shí)際溫度就低于壓力表顯示壓力所對(duì)應(yīng)的溫度，以致造成滅菌溫度不夠而滅菌不徹底 在滅菌過程中，為什么要排除罐內(nèi)空氣？ 蒸汽壓力與溫度的關(guān)系 蒸汽壓力(atm) 相 應(yīng) 的 溫 度（ ℃ ） 空氣完全驅(qū)除程度 罐內(nèi)實(shí)際溫度（ ℃ ） 完全驅(qū)除 驅(qū)除 2/3 驅(qū)除 1/2 驅(qū)除 1/3 全未驅(qū)除 40 培養(yǎng)基的 PH值越低，滅菌所需的時(shí)間就愈短。（ ） 微生物含水量越多，滅菌時(shí)間就得越長(zhǎng)。（ ） 在滅菌過程中，充分?jǐn)嚢韪欣跍缇? 若已先行空罐滅菌，此步可不進(jìn)行 預(yù)熱 向夾套或蛇管中通入蒸汽，間接將培養(yǎng)基加熱至70℃ 左右。 罐壓達(dá) 1kg/cm2 ( MPa)時(shí)，按裝在發(fā)酵罐封頭的接種管、補(bǔ)料管、消泡劑管等應(yīng)排汽。 在保溫階段，凡進(jìn)口在培養(yǎng)基液面下的各管道都應(yīng)通入蒸汽；在液面上的其余管道則應(yīng)排放蒸汽，這樣才能保證滅菌徹底，不留死角。 通入無菌空氣的作用： 加速降溫；保持罐內(nèi)正壓 46 事故 ? 2022年 9月 5日衡陽(yáng)市某啤酒廠釀造車間一臺(tái)容積 100m3的不銹鋼發(fā)酵糖在清洗過程中發(fā)生收縮變形而吸癟，造成直接經(jīng)濟(jì)損失 22萬元的重大設(shè)備事故。無傷亡事故，直接經(jīng)濟(jì)損失 20余萬元。冷卻水閥門敞開。 2. 許用壓力計(jì)算 100℃ 以下罐體就會(huì)承受外壓。 70℃ 以下水的飽和蒸汽壓與罐內(nèi)負(fù)壓值見附表。 比較上表不難看出，當(dāng)罐內(nèi)溫度降到 60
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