培養(yǎng)基滅菌與空氣凈化-在線瀏覽
2025-03-06 05:38本頁(yè)面
【正文】 lg(k′2/ k′1)= E / E ′, …… (3 高溫短時(shí) 滅菌理論根據(jù) ? 根據(jù)營(yíng)養(yǎng)成分為破壞的反應(yīng)的活化能 E 、菌體死亡的活化能 E （芽孢 或無(wú)芽孢 ）的比值， ? （ 3）式的比值 〉 1 ? 說(shuō)明提高溫度對(duì)于第一個(gè)平行反應(yīng)，即菌體死亡的反應(yīng)是有利的。 ? （ 3）上述滅菌時(shí)間，通常稱之為 理論滅菌時(shí)間， 只可以用于工程計(jì)算中，在實(shí)踐過(guò)程中，因蒸汽的壓力問(wèn)題（不穩(wěn)定）、蒸汽的流量問(wèn)題有很大差別，甚至培養(yǎng)基中的固體顆粒的大小、培養(yǎng)基的粘度等因素，都會(huì)影響滅菌效果，因此在實(shí)際生產(chǎn)中， 通常采用經(jīng)驗(yàn)數(shù)值： ? 間歇滅菌， 121℃ ， 2030分鐘 （四）培養(yǎng)基 滅菌溫度的選擇 滅菌溫度的選擇應(yīng)考慮的因素主要有： ? 。 ? 通常取 Nt = 103，這個(gè)數(shù)值如何理解？滅菌 1000次，有一次是失敗的，殘留了一個(gè)活菌體。 例如：芽孢，在 121℃ 時(shí)， K=60/s 營(yíng)養(yǎng)體，在 121℃ ， k=606*1010/s (2)在計(jì)算過(guò)程中， N0， Nt如何取值？ N0 = 芽孢性細(xì)菌總數(shù) + 芽孢數(shù) 滅菌時(shí)溫度升高，營(yíng)養(yǎng)體即可變成芽孢。 三、理論滅菌時(shí)間 ? 微生物的濕熱滅菌過(guò)程，其本質(zhì)上就是微生物細(xì)胞內(nèi) 蛋白質(zhì)的變性的過(guò)程。 ? 主要操作：將培養(yǎng)基在發(fā)酵罐外連續(xù)不斷地進(jìn)行加熱、維持和冷卻，然后才進(jìn)入發(fā)酵罐。 （ 2）連續(xù)加壓滅菌法 ? 在發(fā)酵行業(yè)里也稱 “連消法”。 加壓法 （ 1）常規(guī)加壓滅菌法 盛有適量水的 加壓蒸汽滅菌鍋 加熱煮沸， 徹底驅(qū)盡冷空氣 后將鍋密閉，再繼續(xù)加熱至 121℃ ，時(shí)間維持 1530分鐘。適用于不耐熱培養(yǎng)基的滅菌。 巴氏消毒法有 2種： ? 低溫維持法：在 63℃ 下保持 30分鐘 可進(jìn)行牛奶消毒； ? 高溫瞬時(shí)法： 用于牛奶消毒時(shí)只要在 72℃ 下保持 15秒鐘 即可。 常用條件為 115℃ ～ 121℃ ，壓力 1 105Pa，維持1530分鐘。 （ 4）蒸汽濕熱滅菌 濕熱滅菌效果優(yōu)于干熱滅菌， 原因在于濕熱狀態(tài)下， 蒸汽穿透力強(qiáng)，蒸汽冷凝時(shí)釋放出大量能量，使蛋白質(zhì)、核酸等內(nèi)部的化學(xué)鍵破壞、降解，導(dǎo)致生物體死亡。原理在于 核酸和蛋白質(zhì)在紫外區(qū)有強(qiáng)烈的吸收， DNA吸收紫外線后，會(huì)形成嘧啶二聚體，如胸腺嘧啶二聚體，分子之間的交聯(lián)改變了 DNA的功能，從而導(dǎo)致生物細(xì)胞死亡。 （ 2）火焰滅菌法 常用于 接種工具如接種針、接種環(huán) 等的滅菌。干熱滅菌效果沒(méi)有濕熱滅菌好，是實(shí)驗(yàn)室常用的器皿的方法。 （ 1）干熱滅菌 在高溫 120℃ 以上， 蛋白質(zhì)、酶、核酸、生物膜等生物大分子變性、凝聚破壞， 甚至是降解，生物細(xì)胞破裂，生物體死亡。使蛋白質(zhì)變性，酶失活，破壞細(xì)胞膜透性，細(xì)胞死亡。 化學(xué)滅菌 化學(xué)滅菌是指用 化學(xué)物質(zhì)殺滅生物細(xì)胞的滅菌操作。 滅菌（ sterilization） ? 滅菌（ sterilization）：是指用物理或化學(xué)方法殺滅或清除物料或設(shè)備中 所有生命物質(zhì) 的技術(shù)或工藝過(guò)程，達(dá)到 無(wú)活微生物存在 的過(guò)程。第四章 滅菌與空氣凈化 滅菌是十分重要的工序，包括培養(yǎng)基、發(fā)酵設(shè)備及局部空間的徹底滅菌、通入空氣的凈化除菌。 第一節(jié) 滅菌方法及工業(yè)用培養(yǎng)基的滅菌 ? 控制有害微生物主要有以下幾種措施 消毒 (disinfection)：指用物理或化學(xué)方法殺滅 或清除病原微生物（ pathogen），達(dá)到無(wú)害化 程度的過(guò)程， 只能殺死營(yíng)養(yǎng)體，而不能殺滅芽 孢體。 一、滅菌的方法 ? 常用的滅菌方法主要有化學(xué)滅菌、物理滅菌兩類。 常用化學(xué)滅菌劑有 氧化劑類 如高錳酸鉀、過(guò)氧化氫等， 鹵化物類 如漂白粉、氯氣等， 有機(jī)化合物 如 70％～ 75％乙醇、甲醛、戊二醛、環(huán)氧乙烷、 2％新潔爾滅、 3%～ 5％石炭酸等。 化學(xué)滅菌主要適合用于皮膚表面、器具、實(shí)驗(yàn)室和工廠的無(wú)菌區(qū)域的臺(tái)面、地面、墻壁及局部空間或某些器械的消毒。對(duì)于干熱滅菌，足夠長(zhǎng)的時(shí)間和足夠高的溫度，都可以殺滅生物體。 工業(yè)采用 160℃ 、 2h，或 170℃ 、 1h干熱空氣， 物理滅菌： 包括使用各種物理?xiàng)l件如 高溫、 輻射、超聲波及過(guò)濾等 進(jìn)行滅菌，效果好， 操作方便，廣泛使用。 （ 3）輻射滅菌 各種物理射線對(duì)生物細(xì)胞具有殺傷能力，其中以紫外線最常用 。 但紫外線穿透力極低，只適宜于表面滅菌，常用于一定空間的空氣滅菌，如無(wú)菌室、超凈工作臺(tái)等的滅菌。 由于蒸汽價(jià)格低廉，來(lái)源方便，效果可靠，操作控制簡(jiǎn)便，因此濕熱滅菌常 用于培養(yǎng)基和設(shè)備容器的滅菌。 二、濕熱滅菌方法 常壓法 （ 1）巴氏消毒法（ pasteurization）： 用于 牛奶、啤酒、果酒和醬油等不能進(jìn)行高溫滅菌 的液體的一種消毒方法，其主要目的是殺死其中 無(wú)芽孢的病原菌 （如牛奶中的結(jié)核桿菌或沙門(mén)氏菌），而又不影響它們的風(fēng)味。 （ 2）間歇滅菌法 又稱丁達(dá)爾滅菌法或分段滅菌法。 方法是：將待滅菌的培養(yǎng)基 在 80100℃下蒸煮 1560分鐘， 以殺死其中所有微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞， 然后置室溫或 37℃ 下保溫過(guò)夜，誘導(dǎo)殘留的芽孢發(fā)芽，第二天再以同法蒸煮和保溫過(guò)夜，如此連續(xù)重復(fù) 3天，即可在較低溫度下達(dá)到徹底滅菌的效果。 此法適合于一切微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室、醫(yī)療保健機(jī)構(gòu)或發(fā)酵工廠中對(duì)培養(yǎng)基及多種器材、物料的滅菌。 此法只在大規(guī)模的 發(fā)酵工廠中作 培養(yǎng)基滅菌用。培養(yǎng)基一般在 135～ 1
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