種子擴大培養(yǎng)ppt課件-在線瀏覽
2025-06-19 05:41本頁面
【正文】 但其原則為采用易被菌利用的成分如葡萄糖、玉米漿、磷酸鹽等，如果是需氧菌，同時還需供給足夠的無菌空氣，并不斷攪拌，使菌（絲）體在培養(yǎng)液中均勻分布，獲得相同的培養(yǎng)條件。 14 ? 2，種子罐級數(shù)的確定 ? 種子罐級數(shù)：是指制備種子需逐級擴大培養(yǎng)的次數(shù)，生產上只有一級發(fā)酵不合算，故生產上至少要用二級發(fā)酵，但種子罐級數(shù)多，則設備多，污染的機會也多，工藝就復雜了，故也不可太多級種子罐（實驗室用一級發(fā)酵） ? 1．種子罐級數(shù)的決定 ? （ 1）根據(jù)生產菌的特性：生產繁殖快慢，產孢子能力大小。 ? 如生長繁殖快，孢子多，發(fā)芽率高，發(fā)時時間短，則級數(shù)少 ? （ 2）根據(jù)發(fā)酵罐的接種量： ? （ 3）發(fā)酵罐與種子罐的體積比 V發(fā)酵罐 /V種子罐 ? 比數(shù)越大，種子級數(shù)越大。 ? ，有相當部分的特別是抗生素的生產，種子液中就有抗生素，可利用之抑菌。 ? 具體接種多少要經(jīng)過實驗和生產檢驗。 ? 茄子瓶 → 種子罐 → 發(fā)酵罐 ? 霉菌：生長較慢，如青霉菌，三級發(fā)酵 ? 孢子懸浮液 → 一級種子罐（ 27?C,40小時孢子發(fā)芽，產生菌絲 ） → 二級種子罐（ 27?C,10~24小時，菌體迅速繁殖，粗壯菌絲體） → 發(fā)酵罐 ? 放線菌：生長更慢，采用四級發(fā)酵 ? 酵母：比細菌慢，比霉菌，放線菌快，通常用一級種子 。但也與所選用工藝條件有關。 19 第二節(jié) 種子質量的控制 一、影響孢子質量的因素及控制 ? 培養(yǎng)基 ? 培養(yǎng)條件 ? 培養(yǎng)時間和冷藏時間 20 1，培養(yǎng)基 ? 生產過程中經(jīng)常出現(xiàn)種子質量不穩(wěn)定的現(xiàn)象，其主要原因是原材料質量波動。 ? 蛋白胨加工原料不同如魚胨或骨胨對孢子影響也不同。磷含量太多或太少也會影響孢子的質量。 ? 菌種在固體培養(yǎng)基上可呈現(xiàn)多種不同代謝類型的菌落，氮源品種越多，出現(xiàn)的菌落類型也越多，不利于生產的穩(wěn)定。如土霉素生產菌種在高于 37?C培養(yǎng)時，孢子接入發(fā)酵罐后出現(xiàn)糖代謝變慢，氨基氮回升提前，菌絲過早自溶，效價降低等現(xiàn)象。 24 （ 2）濕度 制備斜面孢子培養(yǎng)基的濕度對孢子的數(shù)量和質量有較大的影響。在氣溫高含濕度大的地區(qū)，斜面孢子長得慢，主要由于試管下部冷凝水多而不利于孢子的形成。 25 3，培養(yǎng)時間和冷藏時間 （ 1）培養(yǎng)時間 ? 一般來說，衰老的孢子不如年輕的孢子，因為衰老的孢子已在逐步進入發(fā)芽階段，核物質趨于分化狀態(tài)。 ? 措施：孢子培養(yǎng)的時間應該控制在孢子量多、孢子成熟、發(fā)酵產量正常的階段終止培養(yǎng)。如土霉素生產菌種孢子斜面培養(yǎng) 4天左右即于4?C冰箱保存，發(fā)現(xiàn)冷藏 7~8天菌體細胞開始自溶。 ? 冷藏時間對孢子的生產能力也有影響。 27 4，接種量 ? 接種量大小影響到培養(yǎng)基中孢子的數(shù)量，進而影響菌體的生理狀況。 30 2，培養(yǎng)條件 （ 1）溫度 （ 2）通氣量 在種子罐中培養(yǎng)的種子除保證供給易被利用的培養(yǎng)基外，有足夠的通氣量可以提高種子質量。但也有例外，例如土霉素生產菌，一級種子罐的通氣量小對發(fā)酵有利。 ? 通常種齡是以處于生命力極旺盛的對數(shù)生長期，菌體量還未達到最大值時的培養(yǎng)時間較為合適。 ? 不同菌種或同一菌種工藝條件不同，種齡是不一樣的，一般需經(jīng)過多種實驗來確定。 32 4，接種量 33 三、種子質量的控制措施 ? 種子質量的最終指標是考察其在發(fā)酵罐中所表現(xiàn)出來的生產能力。 ? 菌種穩(wěn)定性的檢查 ? 無（雜菌）檢查 34 四、種子質量標準 1，細胞或菌體 ? 菌絲形態(tài)、菌絲濃度和培養(yǎng)液外觀（色素、顆粒等） ? 單細胞：菌體健壯、菌形一致、均勻整齊，有的還要求有一
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