【正文】 生乳化現(xiàn)象，導(dǎo)致部分有機(jī)層與濃硫酸層不能有效分離，而加鹽會與濃硫酸發(fā)生化學(xué)反應(yīng)釋放出氣體。方法4 結(jié)合法。凝膠色譜分離法與濃硫酸法相結(jié)合除脂，先用凝膠色譜除去大量脂肪，接收液再加入濃硫酸去除剩余脂肪，回收率在40%70%之間，結(jié)果較為理想，但操作復(fù)雜，費(fèi)時(shí)費(fèi)力，不便于大量處理樣品。通過理論分析發(fā)現(xiàn) TBBPA 的結(jié)構(gòu)中有兩個(gè)活潑的酚羥基，屬于強(qiáng)極性物質(zhì)，TBBPA 與硅膠會緊密結(jié)合，若洗脫液的極性不足以將其洗脫下來，則目標(biāo)物 TBBPA 損失很大。試驗(yàn)結(jié)果證明，采用這個(gè)凈化方法，HBCD和 TBBPA 均取得了較為理想的絕對回收率 (50%80%)；而且此方法簡單快捷，油脂可以完全去除，能滿足后續(xù)液質(zhì)分析的需要，故采用自制酸化硅膠固相萃取柱進(jìn)行凈化處理。在將加標(biāo)的空白基質(zhì)上柱之后，每次加入 10 mL 洗脫液，分動(dòng)物性食品中六溴環(huán)十二烷和四溴雙酚 A 含量的測定編制說明1015 次加入，編號為 115，進(jìn)樣后測定 115 號濃縮液中目標(biāo)物的含量。 流動(dòng)相的選擇根據(jù)相關(guān)資料，選擇了 Waters BEH C18 柱（ mm . 50 mm， μm）色譜柱。從而影響目標(biāo)化合物的檢測靈敏度。結(jié)果表明，當(dāng)流動(dòng)相為甲醇/乙腈水時(shí)，響應(yīng)值明顯高于乙腈 水流動(dòng)相時(shí)的響應(yīng)值(約為 2～4 倍)。除了考察了流動(dòng)相組成外，還比較了流動(dòng)相為甲醇/乙腈(V/V: 1/1)水和分別在此流動(dòng)相中加入一定量的醋酸銨和氨水等添加劑對目標(biāo)化合物離子化效率的影響。 質(zhì)譜條件的優(yōu)化分析 TBBPA，需要用到多反應(yīng)監(jiān)測（ MRM）模式。在正離子和負(fù)離子模式下進(jìn)行全掃描以選擇適當(dāng)?shù)姆肿与x子峰和電離方式。因此選用 TBBPA 的[M H] 作碰撞誘導(dǎo)解離的母離子。其中 m/z 碎片離子是[M BrOH ]，m/z 離子是[MBrOHCO ] 。在正離子和負(fù)離子模式下進(jìn)行全掃描以選擇適當(dāng)?shù)姆肿与x子峰和電離方式。但是本著高效的原則，希望和四溴雙酚 A 同時(shí)檢測，所以選擇了 m/z 和 m/z 作為其子離動(dòng)物性食品中六溴環(huán)十二烷和四溴雙酚 A 含量的測定編制說明11子，與四溴雙酚 A 一起使用多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）模式。 線性范圍以 、 ng/mLHBCDs 與 TBBPA 混合標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)樣，根據(jù)待測物和內(nèi)標(biāo)的峰面積比（y）和對應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)溶液中待測物的質(zhì)量（x）進(jìn)行線性回歸，得出線性方程為：TBBPA：y = +；相關(guān)系數(shù)：R 2= ；αHBCD ：y = ；相關(guān)系數(shù)：R 2= ；βHBCD：y = ；相關(guān)系數(shù)：R 2= ；γHBCD：y = +；相關(guān)系數(shù)： R2= 。表 1 HBCDs 與 TBBPA 混合標(biāo)準(zhǔn)系列溶液相對響應(yīng)因子f1 f2 f3 f4 f5 f 平均 RSD%TBBPA αHBCD β HBCD γ HBCD 檢出限與定量限檢測限根據(jù)對基質(zhì)空白的測定確定噪聲，以3倍噪聲峰高對應(yīng)的濃度為檢測限(LOD)。而以10倍噪聲峰高對應(yīng)的濃度為定量限(LOQ) 。結(jié)果如表2所示。表 2 檢測限和定量限測定結(jié)果(ng/g，以脂肪計(jì))αHBCD βHBCD γHBCD TBBPA檢出限 定量限 檢出限 定量限 檢出限 定量限 檢出限 定量限平行 1 平行 2 平行 3 均值 回收率與精密度采用市售的金龍魚植物油為空白基質(zhì)，在樣品中添加低、中、高三個(gè)不同質(zhì)量濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行 HPLCMS 分析，每個(gè)添加水平平行測定 6 次。結(jié)果顯示三種 HBCD 與 TBBPA 的平均回收率在 %%之間，RSD 范圍為 %%之間。表 3 HBCDs 和 TBBPA 的回收率和精密度平均回收率(%) RSD%(n=6)加標(biāo)水平 αHBCD βHBCD γHBCD TBBPA αHBCD βHBCD γHBCD TBBPA2ng 5ng 動(dòng)物性食品中六溴環(huán)十二烷和四溴雙酚 A 含量的測定編制說明1320ng 方法的可行性為了驗(yàn)證方法在實(shí)際樣品中的可行性，采用建立的方法，在魚類、肉類、蛋類、乳類這四種實(shí)際的空白樣品(樣品經(jīng)測定不含目標(biāo)物)中添加質(zhì)量濃度為20 ng 的標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行 HPLCMS 分析，每個(gè)添加水平平行測定 6 次。結(jié)果顯示三種 HBCD 與 TBBPA 的平均回收率在 %%之間，RSD 范圍為 %%之間，表明該方法可行，且精密度良好。樣品中α ，β ，γHBCD、TBBPA及相應(yīng)的同位素內(nèi)標(biāo)的色譜圖如圖3所示。采用本方法分析的結(jié)果與國際不同試驗(yàn)室的均值相接近，說明本方法測定結(jié)果準(zhǔn)確，該分析方法可行。動(dòng)物性食品中六溴環(huán)十二烷和四溴雙酚 A 含量的測定編制說明141x100123456789ESI MRM Frag= ( ) 1 1Counts (%) vs. Acquisition Time (min) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 圖 3 挪威鱒魚樣品中 HBCD 異構(gòu)體、TBBPA 及同位素內(nèi)標(biāo)的色譜圖1 13CTBBPA；2 13CαHBCD；3 13CβHBCD；4 13CγHBCD；5 αHBCD ；6 βHBCD ；7 γHBCD 。 TBBPA 的實(shí)測值與 2022 年國際比對考核中鱒魚樣品均值的比較目標(biāo)物質(zhì) 本方法實(shí)測值(pg/g) 國際均值(pg/g)αHBCDβHBCDγHBCDTBBPA1586417642201901419244004. 參考文獻(xiàn)[1] 焦杏春，路國慧，王曉春，等． 環(huán)境中溴系阻燃劑六溴環(huán)十二烷的水平及分析進(jìn)展［J］ ． 巖礦測試，2022，31( 2) : 210217.[2] Birnbaum L S，Staskal D F． Brominated flame retardants: Cause for concern?［J］ ． Environ Health Perspect，2022，112( 1) : 917.[3] 江桂斌. 持久性有機(jī)化學(xué)污染物(POPs) 的定性與定量分析[J]. 分析試驗(yàn)室, 2022, 22.[4] 中國 POPs 科技網(wǎng). [5] 董亮, 張秀藍(lán), 史雙昕, 許鵬軍等. 新型持久性有機(jī)污染物分析方法研究進(jìn)展[J]. 中國科學(xué), 2022, 43(03): 336350.[6] 施致雄. 食品中六溴環(huán)十二烷和四溴雙酚 A 的檢測技術(shù)與暴露評估[D]. 北京: 中國疾病預(yù)防控制中心營養(yǎng)與食品安全所, 2022.123 456 7動(dòng)物性食品中六溴環(huán)十二烷和四溴雙酚 A 含量的測定驗(yàn)證報(bào)告驗(yàn)證報(bào)告方法名稱：動(dòng)物性食品中六溴環(huán)十二烷和四溴雙酚A 的測定驗(yàn)證單位：湖北省農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測中心報(bào)告日期：2022 年 10 月 21 日動(dòng)物性食品中六溴環(huán)十二烷和四溴雙酚 A 含量的測定驗(yàn)證報(bào)告方法名稱：動(dòng)物性食品中六溴環(huán)十二烷和四溴雙酚 A 的測定 一、 樣品與樣品前處理樣品前處理：魚類樣品，取其可食用部分約 50g，經(jīng)勻漿機(jī)勻漿后轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)皿中，于20℃冰箱中冷凍 24h，轉(zhuǎn)移至冷凍干燥機(jī)中干燥 24h，將干燥后的固體樣品切成小塊備用。提取液充分旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)后放置過夜備用。用洗耳球輕震管壁，正己烷倒入管內(nèi)排除氣泡后，用 200mL 正己烷活化柱子。二、 分析條件UPLC 條件：a） 色譜柱：Eclipse Plus C18, 100 mm mm（. ） ，粒度 181。C；c）流速： mL/min；d）進(jìn)樣量：5 μL；e）樣品室溫度：10℃f）流動(dòng)相：A 相：甲醇:乙腈混合溶液 (1:1，v/v)，B 相：超純水。質(zhì)譜條件：a） 離子源：電噴霧離子源；a) 電離方式：ESI ；b) 檢測方式：MRM ；c) 氣體溫度（Gas Temp）： 350℃；d) 氣體流量（Gas Flow）：14 L/min；e) 壓力（Nebulizer）：43 psi；f) 鞘氣溫度（Sheath Gas Temp）