【正文】
免疫電泳法使得血清應(yīng)用在生物系統(tǒng)分類之研究仍得以持續(xù)。 O39。 (二)巨分子(macromolecules) 從早期用filter paper之diffusion chromatography,到後來以 cellulose membrane, starch, polyacrylamide 製作 gel之電泳(electrophoresis)方法;由單向到雙向(two dimensional separation)將不同電性及大小的蛋白質(zhì)或酵素之分子分離,經(jīng)由組織染色或螢光法予以顯現(xiàn)。電泳方法可應(yīng)用在蛋白質(zhì)、同功異構(gòu)(Isozyme)核 DNA、粒線體 DNA、rRNA等等各種不同之巨分子種類上。例二:Chen (1990) 以 isozymes檢討本省產(chǎn)庫氏天竺鯛之相近種群間的血緣關(guān)係及其生態(tài)區(qū)位,支持資源分配之理論。以魚為例,有人利用巴拿馬兩側(cè)大西洋與東太平洋產(chǎn)兩種相似雀鯛間之遺傳距離因符合巴拿馬隆起隔絕兩洋的地質(zhì)年代,因而支持分子時(shí)鐘之假說。狐馧之傳統(tǒng)分類不易,過去認(rèn)為只有一種,但利用 isozyme目前已知應(yīng)有分大西洋與印度洋兩種。同時(shí)此類方法需有新鮮之標(biāo)本 ,但國外借閱或採集之標(biāo)本常無法作到 。 Davis(1986) 研究 rDNA 之restriction site mapping,推測青蛙 Rana屬之親緣關(guān)係。 (三)蛋白質(zhì)或核酸之序列 比較不同種的同源DNA或RNA上鹼基數(shù)之差異來表示突變的數(shù)目或遺傳的距離(Goodman, 1982)。目前已有許多巨分子之胺基酸序列已知(Dayhoff, 1973, 1976, 1979)。故當(dāng)研究的分類層級(jí)不同,所應(yīng)採用的蛋白質(zhì)亦應(yīng)不同。例二:Beverley and Wilson(1985) 研究夏威夷與北美果蠅hemolymph proteins之免疫距離得知夏威夷果蠅是約在4000萬年前自北美移入。將其中一種生物之DNA(單股)標(biāo)上同位素(探針,probe),去與另一種生物的單股混合,然後逐漸冷卻癒合(混股),看癒合的比例(反應(yīng)在△值上)來推算遺傳距離。 Ahlquist(1983) DNA bp差1%,約表500萬年前分化。mtDNA 具有分子小,簡單,演化快速,種間差異大,族群內(nèi)穩(wěn)定性高 ,母系遺傳及遺傳性狀數(shù)目多( 350 restriction endonucleases)等特性 ,故常被用來以限制內(nèi)切切位片段的多型性(Restriction Fragment Length Polymorphism, RFLP)上來獲得鹼基置換(base substitution),長度變異(length variation )或序列重排(sequence rearrangement)之資料藉以推斷動(dòng)物不同種或族群間之差異。例一:Meyer et al(1990) 非洲 Victoria 湖中之慈鯛Haplochromis屬有近200種,由於 Victoria湖歷史不足百萬年,故比對(duì)14種該湖之慈鯛與其他23種非洲慈鯛之 803個(gè)鹼基對(duì)後,結(jié)果支持 Victoria湖之慈鯛為 monophyly ,且分化時(shí)間與湖泊形成年代相吻合 ,是explosive evolution之最佳例證 。例三: Bowen and Arise(1990) 分析墨西哥灣與大西洋不同族群黑鱸 mtDNA,顯示兩者為同源,隔離時(shí)間在50萬年前左右。例五: Avis et al (1986) 以RFLP方法分析美洲鰻及歐洲鰻,發(fā)現(xiàn)美洲沿岸幾千公里均為同種而與歐洲者屬於完全不同族群,故可推知其產(chǎn)卵場亦不同,推翻過去認(rèn)為它們混合產(chǎn)卵的學(xué)說。它可以適用在福馬林、酒精固定,paraffin 包埋的標(biāo)本(Heller et al, 1991),或者是骨骼的標(biāo)本(Hagelberg et al, 1989)。因此 PCR的技術(shù)已使得mtDNA的分析運(yùn)用得以更加擴(kuò)展。但應(yīng)用 PCR的方法仍是有價(jià)格高,袛能分析mtDNA 的小段,及不同 mtDNA各區(qū)段之突變速率不同等缺點(diǎn)猶待克服。 五、分子生物技術(shù)與系統(tǒng)分類或進(jìn)化有關(guān)的若干書籍Biochemical Systematics and EvolutionAndrew Ferguson 1980. Blackie.Protein polymorphism: Adaptive and taxonomic significance . Oxford and D. Rollinson 1983. Acad. Press.Molecular Approaches to Evolution J. Ninio (R. Long translated) 1983 Princeton Univ.Molecules and Morphology in Evolution: Conflict or Compromise? Colin patterson (ed.) 1987. Cambridge Univ. Press.Population genetics and fishery management Nils Ryman and Fred Utter, (eds.) 1987 Univ. of Wash.?????????魚介類?集圖解析 日本水產(chǎn)資源保護(hù)協(xié)會(huì), 平成元年三月。 . Ashlock 1991, McGrawNIll Inc. NT$550.Biochemicel Genetics and Taxonomy of Fish The Fisheries Society of the Brifish Isles Symposium A. Ferguson amp。s Croft, Killiecrankie Perthshire, Scotland. 六、分子生物技術(shù)與動(dòng)物系統(tǒng)分類或進(jìn)化有關(guān)之主要學(xué)術(shù)期刊Systematic ZoologyJournal of Molecular EvolutionJournal of Systematic Zoology and Evolution ResearchMolecular Biological EvolutionMolecular Biology and EvolutionMolecular Marine Biology and BiotechnologyMolecular Phylogenetics