電化學(xué)免疫傳感器的應(yīng)用-在線瀏覽
2025-03-05 19:20本頁面
【正文】 ，40(8） :445449） 酶標(biāo)記電流型免疫傳感器 酶標(biāo)記電流型免疫傳感器 酶標(biāo)記電流型免疫分析 ? 原理 ：主要是競爭法和夾心法 ? 前者是用酶標(biāo)抗原與樣品中的抗原競爭結(jié)合電極上的抗體，催化氧化還原反應(yīng)，產(chǎn)生電活性物質(zhì)而引起電流變化，從而可測得樣品中抗原濃度。 電流型酶標(biāo)記免疫傳感器的工作原理 ? 第一代酶標(biāo)記電流型免疫傳感器以非電活性物質(zhì)如 O2作為氧化還原的電子受體為代表。 ? 以過氧化氫酶作為標(biāo)記酶來說明 ? 其工作原理 (圖 10— 56)： ? (1)在測定溶液中加人標(biāo)記過氧化氫酶抗原 ， 然后將抗體膜免疫傳感器插入上述溶液中 ， 未標(biāo)記抗原 (被測物 )和標(biāo)記抗原與膜上的抗體發(fā)生競爭結(jié)合； ? (2)洗去未反應(yīng)的抗原； ? (3)將傳感器插人測定酶活性的溶液中 ， 這時(shí)傳感器顯示的電流值是由測定液中溶存氧量決定的； ? (4)向溶液中加人定量的 H2O2， 結(jié)合在膜上的過氧化氫酶使 H2O2分解產(chǎn)生 O2,傳感器的電流值增大 。 易受樣品 溶解氧及 pH的影響 ,工作電位較高 ,背景較差。 ? 第二代酶標(biāo)記電流型免疫傳感器使用電活性物質(zhì)替代分子 O2 , 這些電活性物質(zhì)包括二茂鐵衍生物、苯醌、氯醌、亞甲基藍(lán)、血紅素等。(Ciana L D ,Bernacca G,Nitti C D , et al . Highly sensitive amperometric enzyme immunoassay for α fetoprotein in human serum[ J ] . J Immunol Methods ,1996 ,193(1) :5162.) ? 優(yōu)點(diǎn) ? 酶促反應(yīng)放大， 靈敏度高 ? 不足 ? 多次洗滌分離操作、 ? 酶標(biāo)容易失活、 ? 費(fèi)時(shí)和重現(xiàn)性較差等 電導(dǎo)型免疫傳感器 ? 原理 化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生或消耗的離子 ,能使溶液的導(dǎo)電能力發(fā)生改變。 (Diiksma M, Kamp B , Hoogvliet J C , et al . Development of an electrochemical immunosensor for direct detection of interferonγ at the attomolar level [J ] . Anal Chem,2022 ,73 (3) :901907) ? 電導(dǎo)法易受被測樣品離子強(qiáng)度和緩沖液容積的影響 ,并且難以克服非特異吸附 determination of MA in the concentration range 110 μ g/ml was possible within about 15 min for each
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