選修3現(xiàn)代生物科技專題知識點-在線瀏覽
2025-02-28 04:56本頁面
【正文】 合 兩種末端 ，但連接平末端的之間的效率較 低 。coliDNA連接酶和 T4DNA連接酶）的比較： ① 相同點：都縫合 磷酸二酯 鍵。 （ 3）結(jié)果：經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的 DNA片段末端通常有兩種形式： 黏性末端 和 平末端 。 （一）基因工程的基本工具 1.“分子手術(shù)刀 ”——限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶） （ 1）來源：主要是從 原核生物 中分離純化出來的。 第 1 頁 共 83《現(xiàn)代生物科技專題》 知識點 總結(jié) 專題 1 基因工程 基因工程的概念 基因工程是指按照人們的愿望，進行嚴格的設(shè)計，通過 體外 DNA重組和轉(zhuǎn)基因技術(shù) ，賦予生物以 新的遺傳特性 ，創(chuàng)造出 更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品 。基因工程是在 DNA分子水平 上進行設(shè)計和施工的，又叫做 DNA重組技術(shù) 。 （ 2）功能：能夠識別雙鏈 DNA分子的某種 特定 的核苷酸序列，并且使每一條鏈中 特定 部位的兩個核苷酸之間的 磷酸二酯鍵 斷開，因此具有 專一 性。 2.“分子縫合針 ”——DNA連接酶 (1)兩種 DNA連接酶（ E ② 區(qū)別： E (2)與 DNA聚合酶作用的異同 :DNA聚合酶只能將 單個核苷酸 加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯鍵。 DNA連接酶 DNA聚合酶 不同點 連接的 DNA 雙 鏈 單 鏈 模板 不要 模板 要 模板 連接的對象 2個 DNA片段 單個脫氧核苷酸加到已存在的單鏈 DNA片段上 相同點 作用實質(zhì) 形成 磷酸二酯鍵 化學本質(zhì) 蛋白質(zhì) 3.“分子運輸車 ”——載體 （ 1）載體具備的條件： ① 能在受體細胞中復制并穩(wěn)定保存。 ③ 具有標記基因，供重組 DNA的鑒定和選擇。 （ 3）其它載體： λ噬菌體的衍生物、動植物病毒 (二 )基因工程的基本操作程序 第一步 ：目的基因的獲取 ： 編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因 。 基因 （ 1） PCR的含義：是一項在生物體外復制特定 DNA片段的核酸合成技術(shù)。 （ 5）特點：指數(shù) (2n)形式擴增 第二步 ：基因表達載體的構(gòu)建 ：使目的基因在受體細胞中 穩(wěn)定存在 ，并且可以 遺傳至下一代 ，使目的基因能夠 表達和發(fā)揮作用 。 （ 2）終止子：也是一段有特殊結(jié)構(gòu)的 DNA片段 ，位于基因的 尾端 。常用的標記基因是 抗生素基因 。 ： 將目的基因?qū)胫参?細胞：采用最多的方法是 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 ，其次還有 基因槍法 和 花粉管通道法 等。方法的受體細胞多是 受精卵 。 ，篩選含 有基因表達載體受體細胞的依據(jù)是 標記基因是否表達 。 轉(zhuǎn)錄出 mRNA，方法是采用 核酸 分子雜交 (DNARNA)技術(shù)。 個體生物學水平 的鑒定。 （三）基因工程的應(yīng)用 ： 抗蟲、抗病、抗逆轉(zhuǎn)基因植物，利用轉(zhuǎn)基因改良植物的品質(zhì) 。 ： 把正常的外源基因?qū)氩∪梭w內(nèi)，使該基因表達產(chǎn)物發(fā)揮作用。 （四）蛋白質(zhì)工程的概念 蛋白質(zhì)工程是指以 蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系 作為基礎(chǔ)，通過 基因修飾或基因合成 ，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行 改造 ，或制造一種新的蛋白質(zhì) ，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。 （ 3）地位：是培育 轉(zhuǎn)基因植物 、 植物體細胞雜交 培育植物新品種的最后一道工序?；瘜W法一般是用 聚乙二醇（ PEG） 作為誘導劑。 （二）動物細胞工程 1. 動物細胞培養(yǎng) （ 1）概念：動物細胞培養(yǎng)就是從動物機體中取出相關(guān)的 組織 ，將它分散成 單個細胞 ，然后放在適宜的 培養(yǎng)基 中，讓這些細胞 生長和繁殖 。 （ 3）細胞貼壁和接觸抑制：懸液中分散的細胞很快就 貼附在瓶壁上 ，稱為 細胞貼壁 。 （ 4）動物細胞培養(yǎng)需要滿足以下條件 ① 無菌、無毒的環(huán)境 ：培養(yǎng)液應(yīng)進行 無菌 處理。此外，應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，防止 代謝產(chǎn)物積累對細胞自身造成危害 。通常需加入 血清、血漿 等天然成分。 ④ 氣體環(huán)境 ： 95%空氣 ＋ 5%CO2。 （ 5）動物細胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用： 制備病毒疫苗、制備單克隆抗體、檢測有毒物質(zhì) 、培養(yǎng)醫(yī)學研究的各種細胞。 （ 2）選用去核卵 (母 )細胞的原因：卵 (母 )細胞 比較大，容易操作 ；卵 (母 )細胞 細胞質(zhì)多，營養(yǎng)豐富 。 （ 5）體細胞核移植技術(shù)存在的問題： 克隆動物存在著 健康 問題、表現(xiàn)出 遺傳和生理 缺陷等。融合后形成的具有原來 兩個或多個 細胞遺傳信息的單核細胞，稱為 雜交細胞 。 （ 3）動物細胞融合的意義：克服了 遠緣雜交的不親和性 ，成為研究 細胞遺傳、細 胞免疫、腫瘤和生物生物新品種培育 的重要手段。從血清中分離出的抗體 產(chǎn)量 低、純度低、特異性差 。 （ 4）單克隆抗體的優(yōu)點： 特異性強，靈敏度高，并能大量制備 。 ② 用于治療疾病和運載藥物 ：主要用于治療 癌癥治療 ，可制成 “生物導彈 ”，也有少量用于治療其它疾病。 受精 場所：雌性的輸卵管內(nèi) 1）受精前的準備階段 1：精子獲能 過程 2）受驚前的準備階段 2：卵子的準備 ：頂體反應(yīng)，透明帶反應(yīng) 3）受精階段 ：卵黃膜封閉作用 卵裂期：細胞在透明帶中進行有絲分裂 早期胚胎發(fā)育 桑椹胚：胚 胎細胞達 32個左右，每一個細胞都是細胞 囊胚：有囊胚腔，出現(xiàn)了囊胚從透明帶中伸展出來的孵化過程 原腸胚：內(nèi)細胞團細胞形成外胚層和內(nèi)胚層，滋養(yǎng)層發(fā)育成胎膜和胎盤，內(nèi)胚層包圍著原腸腔 小鼠 內(nèi) 細胞融合 分離 抗原注入小鼠體內(nèi) B淋巴細胞 骨髓瘤細胞 雜交瘤細胞 細胞培養(yǎng) 選擇培養(yǎng)細胞 培養(yǎng)基 體內(nèi)培養(yǎng) 體外培養(yǎng) 從腹水提取 從培養(yǎng)液提取 單克隆抗體 第 5 頁 共 8 頁 〖 體外受精和早期胚胎培養(yǎng)〗 試管動物技術(shù)：通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精，并通過培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后， 再經(jīng)移植產(chǎn)生后代的技術(shù)。其中提供胚
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