【正文】 氯仿乙酸乙酯梯度洗脫，獲得聚異戊烯醇產(chǎn)物純度為 %，得率為 %～ %。研究結(jié)果表明，銀杏 葉中聚異戊烯醇類(lèi)化合物含量隨產(chǎn)地和樹(shù)齡不同相差甚大，其中以貴州省正安縣銀杏基地樹(shù)葉（ 2～ 5 年生）中含量最高（ ），是貴州省務(wù)川縣老樹(shù)葉（ 15 年以上）的 8 倍左右。 6HKA 是廣譜中樞神經(jīng)氨基酸拮抗劑，它作用于 N甲基 D天冬氨酸（ NMDA），能降低腦缺氧，是銀杏葉提取物中一種重要的生物活性成分，近年來(lái)已引起了國(guó)內(nèi)外學(xué)者的重視，其全面的藥理作用有待進(jìn)一步研究。 對(duì)銀杏葉中 氨基酸測(cè)試結(jié)果表明：銀杏葉中氨基酸含量極其豐富，總氨基酸量為 %～ %（干基計(jì)），均含有 9種必需氨基酸，氨基酸組成合理，必須氨基酸含量占總氨基酸的比值達(dá) %～ %，必需氨基酸占非必需氨基酸比值為 %～ %。近年來(lái)，酚酸及其酯的生物活性引起了廣泛的關(guān)注。香豆酸、香草酸和咖啡酸有抗細(xì)菌和消炎的作用，原兒茶酸是一種抗真菌物質(zhì)，綠原酸還有刺激神經(jīng)中樞系統(tǒng)的作用。經(jīng)水解后，原兒茶酸是主要組分，含量最高達(dá) 272μ g/g（鮮），主要存在于葉和根中。據(jù)作者研究，我國(guó)銀杏葉銀杏酸含量為 500～ 2020μ g/g， 并采用現(xiàn)代分離手段，控制 GBE 產(chǎn)品銀杏酸含量在 2～ 3μ g/g。這種毒素不僅為維生素 B6的拮抗劑，并能在大腦中抑制谷氨酸轉(zhuǎn)化為 4氨基丁酸（ GABA），其毒性反應(yīng)主要引起陣發(fā)性痙攣、神經(jīng)麻痹等。 在距今 億年前的中生代，銀杏類(lèi)植物遍布全世界，成為地球上分布最廣泛地植物群落。大約到了距今一百萬(wàn)年前的第三紀(jì)末和第四紀(jì)初，整個(gè)地球氣候變冷，北半球發(fā)生了強(qiáng)大的冰川運(yùn)動(dòng)，隨之植物群落也發(fā)生了根本性的變化。只在東亞 —— 中國(guó)、朝鮮、韓國(guó)和日本的局部地區(qū)被保留下來(lái)，成為當(dāng)今具有重大科學(xué)價(jià)值的“活化石”。 銀杏在日本分布于北到本州青森縣，南達(dá)九州鹿兒島的廣大地區(qū)。銀杏列為中藥，最早見(jiàn)于十四世紀(jì)吳瑞的《日用本草》、李時(shí)珍的《本草綱目》。 70 年代初，我國(guó)北京制藥廠(chǎng)及日本藥物學(xué)家分別用銀杏葉提取物 —— 黃酮甙類(lèi)，制造出用于治療心血管和腦血管疾病的片劑、針劑。銀杏外種皮的腐蝕作用，多年來(lái)已引起銀杏產(chǎn)區(qū)人們的關(guān)注。盡管如此，銀杏種仁中卻含有有毒物質(zhì)，食用過(guò)量會(huì)引起中毒。另外，在法國(guó)巴黎、保加利亞、匈 牙利、前蘇聯(lián)的克里米亞半島南岸及高加索一帶也栽植著銀杏，并能安全越冬。 隨著藥物科學(xué)研究事業(yè)的向前發(fā)展和銀杏廣泛引種于世界各地，近三百年來(lái)，國(guó)外植物學(xué)家逐漸開(kāi)始對(duì)銀杏作深入細(xì)致地植物學(xué)研究，其中凱普費(fèi)（ kaempfer）是歐洲第一個(gè)研究銀杏的植物學(xué)家。凱普費(fèi)率先提出“ Ginkgo”這個(gè)名字。1896 年，在植物科學(xué)史上，記載著一項(xiàng)轟動(dòng)世界的重要發(fā)現(xiàn)，日本東京帝國(guó)大學(xué)小石川植物園的助教平瀨作五郎發(fā)現(xiàn)了具有運(yùn)動(dòng)機(jī)能的銀杏精子，并繪制出了銀杏精子外形圖。平瀨作五郎成為世界上最早發(fā)現(xiàn)銀杏具有精子的科學(xué)家。 Arnott 詳細(xì)研究了 1000 多枚銀杏葉片后，第一次揭示出銀杏葉片大約有 10%具有葉脈聯(lián)合的 現(xiàn)象。 Tuleck 等（ 1960）報(bào)道了起源于班葉銀杏愈傷組織的一個(gè)精氨酸型突變細(xì)胞系，對(duì)此引起了許多植物學(xué)家的關(guān)注。這兩種方法在生產(chǎn)實(shí)踐上都可推廣應(yīng)用， 70 年代日本從我國(guó)進(jìn)口大量銀杏樹(shù)葉，從中提煉出治療心血管疾病和腦血管疾病的黃酮甙藥物，首次用于臨床，療效很好 ，這在當(dāng)時(shí)轟動(dòng)了整個(gè)醫(yī)藥界。日本對(duì)白果多次作了食品成分分析，提出了各組成的含量。目前白果已成為日本人民必不可少的食品。巖崎滿(mǎn)里子（ 1984）作了這方面的試驗(yàn)研究，他設(shè)計(jì)了五種試驗(yàn)貯藏條件，結(jié)果表明，以低溫低濕密閉貯藏和低溫密閉貯藏為最好。 美國(guó)的伊利諾斯州是美國(guó)著名的“銀杏之鄉(xiāng)”， 1978 年 6月該州的銀杏愛(ài)好者們組建了一個(gè)“金色化石樹(shù)”協(xié)會(huì)，以促進(jìn)該州 102 個(gè)縣銀杏的研究和發(fā)展。因此，該協(xié)會(huì)發(fā)起人 Ronsiss建議改為“金色化石樹(shù)”，一是因?yàn)殂y杏是“活化石”；二是因?yàn)榍锛撅h揚(yáng)著金色的樹(shù)葉，二者連在一起組成“金色化石樹(shù)”。 目前世界各國(guó)都在積極引種和栽植銀杏，有的作為科研試材，有的作為用材和采收白果。 銀杏的食用、藥用和保健價(jià)值，在國(guó)外已受到重視，并積極進(jìn)行開(kāi)發(fā)利用。國(guó)外以日本、韓國(guó)和德國(guó)對(duì)銀杏綜合開(kāi)發(fā)利用最有成效，主要用于 食品、醫(yī)藥、保健品和化妝品。 日本的果農(nóng)、加工廠(chǎng)家和商業(yè)企業(yè)，對(duì)銀杏形成了產(chǎn)、供、銷(xiāo)一條的服務(wù)體系。目前，日本市場(chǎng)上銀杏的零售價(jià)每公斤為 1500～ 2500 日元。日本市場(chǎng)上銷(xiāo)售的白果都是小包裝，每包 200 克、 300 克、 400 克、 500 克。他們除把銀杏做成雞蛋糕、亍酷等外，還加工成罐頭、冷凍食品等在市場(chǎng)上進(jìn)行常 年供應(yīng)。 常溫下白果保鮮期僅為 2～ 3 個(gè)月，為提高商品價(jià)格，延長(zhǎng)供貨時(shí)間，日本采取了低溫（ 2℃）、高濕（相對(duì)濕度： 85～ 90%）的保鮮措施，貯藏期可達(dá) 6 個(gè)月。日本國(guó)內(nèi)的銀杏年產(chǎn)量不能保證市場(chǎng)的常年供應(yīng)，因此僅福岡一縣每年還需從中國(guó)和韓國(guó)進(jìn)口約 100 噸銀杏。 自 70 年代以來(lái)，銀杏葉的開(kāi)發(fā)利用在國(guó)外已引起人們的極大興趣，國(guó)外對(duì)銀杏葉的開(kāi)發(fā)利用 已十分重視。從此，銀杏葉的綜合開(kāi)發(fā)利用便開(kāi)始了。從銀杏葉中提煉出來(lái)的黃酮甙，具有改善腦血管循環(huán)及控制周?chē)苁д{(diào)的作用，是治療高血壓、腦動(dòng)脈硬化、糖尿病和心血管疾病的良藥，且長(zhǎng)期使用無(wú)毒副作用。從 70 年代中期 起，德國(guó)每年從韓國(guó)進(jìn)口達(dá) 1000 萬(wàn)美元的銀杏葉片提取物（銀杏葉每噸價(jià)格為 2500 美元），用于生產(chǎn)降低膽固醇藥物。 法國(guó)天然及合成制藥業(yè)公司出口的銀杏葉制劑專(zhuān)用名稱(chēng)為 Tanakan，是一種液劑。銀杏葉制劑，近幾年在德國(guó)和法國(guó)被作為降血壓的特效藥。 韓國(guó)企業(yè)界把銀杏葉作為除高麗參以外的又一大保健品資源，銀杏研究院和制藥、食品、化妝品企業(yè)的研究所，都在積極研究將銀杏葉藥用成分用于藥品、食品、化妝品的途徑，在此方面也取得了不少成果。從銀杏葉中提煉的食品和化妝品添加劑已進(jìn)入商品化階段。據(jù)韓國(guó)有關(guān)企業(yè)調(diào)查，與銀杏葉有關(guān)的產(chǎn)品在韓國(guó)和國(guó)際上擁有廣闊的市場(chǎng)。在美國(guó)，這些產(chǎn)品的年銷(xiāo)售額可達(dá) 20 億美元。目前韓國(guó)制藥業(yè)廠(chǎng)家要求完全禁止出口銀杏樹(shù)葉，而要用它制成藥劑以后再出口，德國(guó)和法國(guó)的制藥業(yè)廠(chǎng)家每年從韓國(guó)進(jìn)口 1200 噸銀杏樹(shù)葉，價(jià)值約 350 萬(wàn)美元。該公司用銀杏樹(shù)葉作原料成功的生產(chǎn)出“靜克敏”，可預(yù)防和醫(yī)治高血壓 、糖尿病和心臟病，還可兼作解毒劑。 每 100 公斤銀杏葉可制得 1公斤提取物（黃酮類(lèi)、萜類(lèi)、苦內(nèi)酯等 8種化合物）。這些提取物除醫(yī)藥應(yīng)用外，還可做成保健食品、保健飲料、巧克力糖、口香糖和其他食品。 瑞典每年從中國(guó)進(jìn)口大量用于治療心絞痛、心肌梗塞、動(dòng)脈硬化和腦血管痙攣等疾病的銀杏葉干浸膏藥。銀杏葉提取物在亞洲和歐洲國(guó)家中年銷(xiāo)售額在 5 億美元以上。銀杏制劑是近年暢銷(xiāo)的中成藥品種，在心腦血管用藥中處于比較重要的地位。中國(guó)的銀杏制劑市場(chǎng)在 1997— 2020 年曾經(jīng)快速增長(zhǎng)，各地大量種植銀杏樹(shù)、開(kāi)辟種植園。膠囊、滴劑也展示了良好的發(fā)展?jié)摿Α５邆鋰?guó)藥準(zhǔn)字的產(chǎn)品占少數(shù)。其中德國(guó)威瑪舒培大藥廠(chǎng)金納多占有最大用藥份額為 %。從黏土中提取有效成份而制成的治療兒童腹瀉藥思密達(dá)和從銀杏葉中提取有效成分而制成的藥物達(dá)納康，在去年其全部產(chǎn)品銷(xiāo)售額中占據(jù)著 %的份額。貴州益佰制藥的“銀杏達(dá)莫”注射液在處方藥市場(chǎng)的進(jìn)攻咄咄逼人，營(yíng)銷(xiāo)手段豐富多彩， 10 萬(wàn)大獎(jiǎng)滿(mǎn)天飛，臨床推廣手冊(cè)、單面更是精心策劃，益佰制藥作為民營(yíng)制藥的生力軍，勇猛有余，如能實(shí)施良好的客戶(hù)關(guān)系策略，將成為中國(guó)制藥領(lǐng)土完整域的一匹黑馬。國(guó)產(chǎn)品種和進(jìn)口品種可以說(shuō)仍然處于同一起跑線(xiàn)上，各自具備成為領(lǐng)跑者的機(jī)會(huì)。目前，銀杏葉制劑產(chǎn)品已達(dá) 120 億元，并每年 80%的速率遞 增，這是其他任何中藥材所沒(méi)有的。 如凍干粉針等至今是一片空白，還沒(méi)有國(guó)家新藥，處在研究階段，主要靠進(jìn)口。 國(guó)外市場(chǎng)： 從 70年代中期起，德國(guó)每年從韓國(guó)進(jìn)口達(dá) 1000萬(wàn)美元的銀杏葉片提取物（銀杏葉每噸價(jià)格為 2500 美元），用于生產(chǎn)降低膽固醇藥物。據(jù) 80 年代初統(tǒng)計(jì)，世界年銷(xiāo)售額達(dá) 40 億美元。據(jù)韓國(guó)有關(guān)企業(yè)調(diào)查，與銀杏葉有關(guān)的產(chǎn)品在韓國(guó)和國(guó)際上擁有廣闊的市場(chǎng)。在美國(guó)，這些產(chǎn)品的年銷(xiāo)售額可達(dá) 20 億美元。目前韓國(guó)制藥業(yè)廠(chǎng)家要求完全禁止出口銀杏樹(shù)葉，而要用它制成藥劑以后再出口，德國(guó)和法國(guó)的制藥業(yè)廠(chǎng)家每年從韓國(guó)進(jìn)口 1200 噸銀杏樹(shù)葉，價(jià)值約 350 萬(wàn)美元。 國(guó)外市場(chǎng)如歐美市場(chǎng)、日韓市場(chǎng)已經(jīng)是越來(lái)越成熟，消費(fèi)群體對(duì)銀杏葉制劑及銀杏的認(rèn)識(shí)越來(lái)越深刻，越來(lái)越龐大。銀杏葉原料和提取物市場(chǎng)穩(wěn)步上升。但真正開(kāi)發(fā)轉(zhuǎn)化為大生產(chǎn)而投放于市場(chǎng)的產(chǎn)品僅僅是銀杏葉片、膠囊等低附加值產(chǎn)品，真正的高附加值產(chǎn)品至今是空白，隨著心腦血管疾病的患病率正在逐年不斷的增大，因此，銀杏葉制劑產(chǎn)品的市場(chǎng)前景是不容置疑的。 本產(chǎn)品銀杏葉凍干粉產(chǎn)品將填補(bǔ)世界空白，正常投產(chǎn)后將實(shí)現(xiàn)年銷(xiāo)售收入10億元，利稅 億元。中醫(yī)辯證屬中經(jīng)絡(luò)氣虛血瘀證，癥見(jiàn)半身不遂，口知歪斜，言語(yǔ)匯謇澀或不語(yǔ)，感覺(jué)減或消失，面色恍白，氣短乏力，口流涎，自汗出，心悸便溏，手足腫脹，舌質(zhì)暗淡，舌苔薄白或白膩，脈沉細(xì)、細(xì)緩或細(xì) 弦者。根據(jù)新藥審批辦法《有關(guān)中藥新藥部分的修訂和補(bǔ)充規(guī)定 （二）處方來(lái)源，選題目的、選題依據(jù) 注射用銀杏葉凍干粉的處方為科研方。據(jù)《食療本草》記載，其可用于心悸怔中，肺虛咳喘等癥。鑒于西藥在治療中風(fēng)病時(shí)尚不能避免嚴(yán)懲的副作用，故我公司科研人員把傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)理論與現(xiàn)代藥理研究成果相結(jié)合，運(yùn)用現(xiàn)代制藥工 藝技術(shù)研制而成具有臨床療效確切、使用安全，起效迅速的中藥二類(lèi)新藥 —— 注射用銀杏葉凍干粉。本病起病急驟，證見(jiàn)多端，變化迅速，與風(fēng)性善行數(shù)變的特征相似，故以中風(fēng)名之。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為：其發(fā)生的主要因素在于患者平素氣血虧虛，與心、肝、腎三臟陰陽(yáng)失調(diào)，加之憂(yōu)思惱怒，或飲酒飽食，或外邪侵襲等誘因，以致氣血運(yùn)行受阻，肌膚筋脈失于濡養(yǎng)：或陰虧于下，肝陽(yáng)暴張，陽(yáng)化風(fēng)動(dòng)，血隨氣逆，挾痰挾火，橫竄經(jīng)隧，蒙蔽清竅，而形成上 實(shí)下虛，陰陽(yáng)互不維系的危急證候。因?yàn)樗褐杆心X血管病的突然發(fā)作，故又稱(chēng)：“腦血管意外”。引起腦座中的危險(xiǎn)因素主要有高血壓、心臟病、糖尿病、高脂血癥，血液高粘滯綜合癥等疾病。我國(guó)近年統(tǒng)計(jì)表明腦卒中發(fā)病率為120～ 180/10 萬(wàn)人，患病人數(shù)約 500～ 600 萬(wàn)人。因此，如何提高腦血管病在恢復(fù)期的治愈率，改善患者的生存質(zhì)量，已成為國(guó)內(nèi)外醫(yī)學(xué)研究的重要課題。甘露醇、速尿、腎上腺糖皮質(zhì)激素是腦卒中胖子水療法的主要措施之一，迅速使用脫水劑能減輕癥狀或拯救生命。 上述治療對(duì)于急性期挽救病人的生命起到了積極的作用。 中醫(yī)學(xué)認(rèn)為中風(fēng)恢復(fù)期的基礎(chǔ)為本虛標(biāo)實(shí)，本虛主要為氣虛，陰虛，兼夾標(biāo)實(shí)主要為血瘀。瘀血者多因正氣虛衰，氣虛運(yùn)血無(wú)力，血腦瘀滯；或暴怒傷肝，肝陽(yáng)暴亢，血隨氣逆，上壅清竊，瘀結(jié) 于腦脈；或肝氣郁結(jié)，氣滯血瘀，發(fā)為本病，因此治療上強(qiáng)調(diào)標(biāo)本兼治，祛邪與扶正并舉。 目前，用于治療腦卒中恢復(fù)期的中草藥近百種，現(xiàn)代藥學(xué)研究和臨床研究均證實(shí)對(duì)該病有確切的療效，且新藥不斷出現(xiàn)，但是隨著我國(guó)人口老齡化問(wèn)題的日趨嚴(yán)重，腦中風(fēng)病人急劇上升，治療腦中風(fēng)恢復(fù)期的藥物遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿(mǎn)足病人的需求。其黃酮類(lèi)成份，能擴(kuò)冠；改善心、腦血液循環(huán)，降低血清膽固醇，還有高層這敏，抗休克、抗器官移植排斥反應(yīng)等作用，是首選的治療心腦血管疾病的天然藥物。 （三）制備工藝及其研究資料 制備工藝 工藝研究 用正交試驗(yàn)法確定最佳提取工藝。 （五）臨床試驗(yàn)用藥品的 原料（藥材）和成品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)草案及臣草說(shuō)明 我們對(duì)該藥組方擬定了質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)草案及起草說(shuō)明。 含量測(cè)定 本品每瓶含總黃酮醇苷不得少五 、每瓶含銀杏總內(nèi)酯不得少于 。 （六）臨床試驗(yàn)用藥品的初步穩(wěn)定性試驗(yàn)資料及文獻(xiàn)資料 經(jīng)過(guò)三個(gè)月的正常室溫下放置考核，本品在臨床研究用藥品包裝，在常溫下質(zhì)量是穩(wěn)定的，直接與藥物接 觸的包裝材料對(duì)藥品的質(zhì)量穩(wěn)定性無(wú)影響。 （八）與功能主治有關(guān)的主要藥效學(xué)試驗(yàn)資料及文獻(xiàn)資料 銀杏葉凍干粉 iv 、 、 生藥 /kg 能顯著降低局灶性腦缺血再灌注后大鼠腦組織的梗塞范圍和含水量，改善其神經(jīng)行為。腦組織病理切片顯示該藥對(duì)神經(jīng)細(xì)胞保護(hù)作用明顯。銀杏葉凍干粉 iv 能明顯縮短實(shí)驗(yàn)性彌散性全腦缺血大鼠的翻正反射恢復(fù)時(shí)間，還能顯著降低腦缺血再灌注后腦組織中伊文思藍(lán)的含量。 銀杏葉凍干粉 iv能明顯增加小鼠急性不完全性腦缺血后 2h 內(nèi)的存活數(shù)，表明該藥對(duì)小鼠急性不完全性腦缺血有保護(hù)作用， iv 的 ED50為 （ 95%可信限為 — ）。同一劑量組 iv 的效應(yīng)強(qiáng)于 ig。銀杏圳凍干粉 iv 給藥對(duì)麻醉犬的腦血浪量，腦血管阻力，血壓，心率和心電均無(wú)明顯影響。對(duì) ADP 誘導(dǎo)家兔體外血小板聚集抑制作用較弱。 Iv 時(shí)可降低兔紅