dna提取及常見問題分析-在線瀏覽
2025-07-13 10:02本頁面
【正文】 酚容易去除 基因組 DNA－ CTAB法 ? CTAB提取緩沖液的改進配方 組份 TrisHCl （ ） EDTA （ ） NaCl CTAB PVP40 β巰基乙醇 終濃度 100 mM 20 mM 3%(W/V) 5%(W/V) 2%（ V/V）使用前加入 ? PVP（聚乙烯吡咯烷酮）是酚的絡(luò)合物，能與多酚形成一種不溶的絡(luò)合物質(zhì)，有效去除多酚，減少 DNA中酚的污染；同時它也能和多糖結(jié)合，有效去除多糖。 ? 該復(fù)合物在高鹽溶液中（ ）是可溶的，通過有機溶劑抽提，去除蛋白、多糖、酚類等雜質(zhì)后加入乙醇沉淀即可使核酸分離出來。北京天為時代科技有限公司 DNA提取及常見問題分析 主講人：劉召華 第一部分： DNA提取方法簡介 第二部分： DNA提取常見問題、 原因分析及其對策 內(nèi)容 提取方法簡介 DNA是遺傳信息的載體，是最重要的生物信息分子，是分子生物學(xué)研究的主要對象，因此 DNA的提取是分子生物學(xué)實驗技術(shù)中最重要、最基本的操作 。 前言 DNA提取的幾種方法 ? 染色體 DNA的提取 ? CTAB法 ? SDS法 ? 其它 DNA提取的幾種方法 ? 非染色體 DNA的提取 ? 質(zhì)粒 DNA的提取 ? 堿裂解法 ? 煮沸法 ? 線粒體、葉綠體 DNA的提取 ? 差速離心結(jié)合 SDS裂解法 基因組 DNA－ CTAB法 ? CTAB法原理 （植物 DNA提取經(jīng)典方法） ? CTAB（ hexadecyltrimethylammonium bromide，十六烷基三甲基溴化銨），是一種陽離子去污劑，可溶解細胞膜，并與核酸形成復(fù)合物。 注： CTAB溶液在低于 15℃ 時會形成沉淀析出，因此在將其加入冰冷的 植物材料之前必須預(yù)熱，且離心時溫度不要低于 15℃ 。 基因組 DNA－ CTAB法 ? CTAB法流程圖 植物材料 裂解液 上層溶液 液氮研磨 抽提 細胞裂解 干燥溶解 離心洗滌 酒精沉淀 DNA溶液 基因組 DNA－ CTAB法 ? SDS法原理 基因組 DNA－ SDS法 ? SDS是一種陰離子去垢劑 ， 在高溫 （ 55～ 65℃ ） 條件下能裂解細胞 ， 使染色體離析 ， 蛋白變性 ， 釋放出核酸； ? 提高鹽 (KAc或 NH
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