發(fā)光法測定菌體atp含量-在線瀏覽
2025-07-12 20:51本頁面
【正文】 加入緩沖液定容，得到 108mol/l的標準 ATP試劑。 重復(fù)以上過程，得到 1010mol/l和 1011mol/l的標準 ATP試劑。稱取一定量的 Tris堿，使定容后的濃度為 ，定容前需要先調(diào)節(jié) PH值。C下保存。C下保存。提取結(jié)束后，要用緩沖液將 TCA的濃度稀釋到一定的濃度，再進行測量，以減少 TCA對反應(yīng)的影響。 五 .操作步驟 在測量微生物的 ATP前，需要將 ATP從微生物內(nèi)提取出來， ATP的提取效率直接影響生物量測定結(jié)果。 TCA法和 加熱煮沸法 是兩種常用的 ATP提取方法。 TCA對活細胞有兩種作用：一是 破裂細胞 ，釋放 ATP，二是 ATP水解酶失活 。使 TCA濃度 小于或等于 ，此時 TCA對反應(yīng)的影響基本可以忽略。 具體操作 取樣品（如河水等，如果是固體樣品需用水懸浮后取上清或勻漿） 2ml置于試管中 ↓ ↓ 加入 2mlTCA溶液，震蕩提取得 3min 取 1ml提取液置于 50ml容量瓶中，用 TrisAectate緩沖液定容 稀釋后的提取液置于 4186。 ↓ 此時 TCA的濃度 為 ， 不會對反應(yīng)產(chǎn)生 影響 加熱煮沸法 ?加熱煮沸法是前期研究中采用較多的 ATP提取方法。 抽濾裝置
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