【正文】
ction, cold soak extraction, warm immersion extraction), the difference of ethanol and methanol extraction solvents, the content of the extraction solvent and the differences in volume, the exploration of extraction time and extraction temperature, choosing the important influence factors (extraction temperature, extraction time and solvent content and the ratio of material and liquidthe) and the most advantage ,and formulating orthogonal test table. According to orthogonal test table of the experimental conditions, determinating direct the contents of tatol flavonoids under the 375 nm UVVis spectrophotometry,and getting the data and disposing of the data , analysising of variance table and extreming difference analysis table. Results: Extraction temperature, extraction time, solvent content, and the ratio of material and liquidthe on the total flavonoids of Anoectochilus roxburghii(Wall) Lindl. effect significantly, the factors affecting the size for the solvent content extraction time the ratio of material and liquidthe extraction temperature. Conclusion: The method can accurately analyze the content of tatol flavonoids in lotus, fast. Key words: Anoectochilus roxburghii(Wall) Lindl.。 Extraction method。全國最大的金線蓮產(chǎn)區(qū)是福建省,其產(chǎn)區(qū)規(guī)模正在逐漸擴(kuò)大,已成為福建特色中草藥之一。 金線蓮中主要成分有黃酮類化合物、甾體類化合物、三萜類化合物、生物堿、糖類、氨基酸、微量元素等,其中黃酮類化合物有槲皮素、異鼠 李素、山奈酚,甾體類化合物有 豆甾醇、開唇蘭甾醇、麥角甾醇、菜油甾醇 等,三萜類化合物有 木栓酮、琥珀酸、阿魏酸、 胡蘿卜 苷、香豆酸、熊果酸 、 棕櫚酸、齊墩果酸 等。黃酮化合物一般具有基本骨架結(jié)構(gòu) C6C3C6。而對(duì)于總黃酮的測定,因?yàn)?UV法具有準(zhǔn)確、重復(fù)性好、易掌握等優(yōu)勢(shì),所以該法用于測定總黃酮含量最為普遍。直接測定法是不使用顯色劑,根據(jù)黃酮自身結(jié)構(gòu),直接在其特征吸收峰出測定,該方法對(duì)于單成分樣品測定準(zhǔn)確、簡便、快速 。 中國藥科大學(xué)本科生畢業(yè)論文(設(shè)計(jì)) 5 對(duì)金線蓮進(jìn)行現(xiàn)代應(yīng)用研究自 1990 年后才開始,主要集中在組織培養(yǎng)、人工種植、化學(xué)成分和藥理作用的研究。 第一章 材料 中國藥科大學(xué)本科生畢業(yè)論文(設(shè)計(jì)) 6 藥物和試劑 槲皮素(批號(hào) 10008120xx07,含量 %) 購自中國食品藥品檢定研究院 ; 山奈酚(批號(hào) 11086020xx09,含量 %) 購自中國食品藥品檢定研究院 ; 異鼠李素對(duì)照品(批號(hào) 11086120xx08,含量 %) 購自中國食品藥品檢定研究院 ; 甲醇、乙醇、磷酸均為分析純; 水為超純水; 主要儀器 Agilent 1100 液相色譜儀 (安捷倫公司 ); HH6恒溫水浴鍋 (國華電器有限公司 ); JY10002 電子天平 (梅特勒 托利多儀器上海有限公司 ); UV2450 紫外分光光度計(jì)(日本島津公司); 超純水器( MiliQ Direct8) 。m) ,流動(dòng)相為甲醇 %鹽酸( 45: 55),流速為 1mL/min,檢測波長為 374nm,結(jié)果見圖 1。 圖 2 對(duì)照品紫外掃描圖譜 A B 中國藥科大學(xué)本科生畢業(yè)論文(設(shè)計(jì)) 8 1 槲皮素; 2 山柰酚; 3 異鼠李素; 對(duì)照品品溶液的制備 精密稱取 槲皮素 ,山柰酚 ,異鼠李素 分別置 25mL 量瓶中,用60%乙醇溶解并定容,分別得對(duì)照品儲(chǔ)備液Ⅰ(槲皮素 )、 Ⅱ (山柰酚)、 Ⅲ (異鼠李素 ), 分別精密吸取上述 3種溶液各 1mL,置于10mL 量瓶中,加 60%乙醇至刻度,即得 混合對(duì)照品溶液( 槲皮素 、山柰酚、 異鼠李素 )。 線性關(guān)系考察 取混合對(duì)照品溶液,分別進(jìn)樣 1181。L、 5181。L、 20181。槲皮素、山柰酚、異鼠李素的線性范圍分別為: ~。 圖 3 混合對(duì)照品標(biāo)準(zhǔn)曲線 中國藥科大學(xué)本科生畢業(yè)論文(設(shè)計(jì)) 9 中國藥科大學(xué)本科生畢業(yè)論文(設(shè)計(jì)) 10 B 第三章 紫外法測定總黃酮含量 對(duì)照品的確定 對(duì)續(xù)濾液的 NaNO2Al(NO3)3NAOH 的顯色處理后顏色比未顯色續(xù)濾液淺,且發(fā)現(xiàn)金線蓮相關(guān)文獻(xiàn)內(nèi)未有有蘆丁的記載,故對(duì)槲皮素、山柰酚、異鼠李素進(jìn)行紫外 200nm800nm 的波長掃描, 60%乙醇作為空白,三者波形相似,在 256nm 左右和 375nm 左右波長有最大吸收峰,處于易獲得和低成本的考慮,選用槲皮素作為對(duì)照品。 圖 4 對(duì)照品零階( A)、一階( B)、二階( C)導(dǎo)數(shù)光譜圖 圖 5 供試品零階( A)、一階( B)、二階( C)導(dǎo)數(shù)光譜圖 由圖 4 可知,對(duì)照品在對(duì)照品在 256nm 和 375nm 處零階圖譜有最大值,一階圖譜過零點(diǎn),二階圖譜分別有過零點(diǎn)和最小值,且振動(dòng)有規(guī)律,得 對(duì)照品在 256nm 和 375nm 處有最大吸收波長;由圖 5 可知供試品在 256nm 和 375nm 處零階導(dǎo)數(shù)圖譜有最大吸收值,一階導(dǎo)數(shù)圖譜分別有過零點(diǎn)A C B 中國藥科大學(xué)本科生畢業(yè)論文(設(shè)計(jì)) 11 和最小值,二階圖譜都有最小值但 256nm 點(diǎn)無振動(dòng)規(guī)律, 375nm 點(diǎn)振動(dòng)有規(guī)律,且 256nm 波長處檢測波不穩(wěn)定,故選擇 375nm 作為最佳吸收波長。 表