【正文】 食用菌場介紹，廢棄食用菌渣處理后，測算年增加20萬元的收入。 4）項目產(chǎn)生的環(huán)境效益 A)漳州是“中國食用菌名城”，年產(chǎn)食用菌 30 萬噸。這些廢渣殘的堆放易造成病原微生物的滋生，特別是真菌病害微生物，和大量 病蟲的累集、代謝產(chǎn)物， 尤其是一些有毒物 質(zhì)（黃曲霉毒素、抗生素等） 的累積， 長期直接施用于田間，容易造成植物抗逆能力的下降，病蟲害發(fā)生率增加。近年來，廢渣堆積如山。項目的實施，使有機廢棄物資源化，可解決環(huán)境治理對食用菌行業(yè)發(fā)展的制約。 13 B)過量施用化肥對 環(huán)境的污染，目前氮肥施用量超過作物需要量的 1/3 1/2，未被作物吸收的無機氮肥，相當一部分轉(zhuǎn)化為硝酸鹽和亞硝酸鹽，并通過土壤滲漏和地表徑流入湖河水域，造成水體的污染和富營養(yǎng)化。同時，由于微生物的作用，提高化肥的利用率，污染源得以控制。從產(chǎn)品的中試質(zhì)量來看，各項技術(shù)指標 穩(wěn)定，其中生物質(zhì)有機載體質(zhì)量完全能滿足各功能微生物的生存生理要求；各種功能微生物在載體中的各種生物特性穩(wěn)定，含菌量在有效期內(nèi)維持預定的范圍內(nèi)。 B) 本項目的中試產(chǎn)品經(jīng)農(nóng)業(yè)部肥料質(zhì)量監(jiān)督檢驗測試中心（杭州）抽樣檢測各項指標符合要求。（見附表） 2) 技術(shù)成果來源 A) 本項目在完成載體形成的關(guān)鍵技術(shù)之一 發(fā)酵微生物菌劑的培養(yǎng)基，采用福建農(nóng)林大學的發(fā)明專利（專利號： ZL 2021100199020）技術(shù)， 14 該專利技術(shù)于 2021年由我公司以轉(zhuǎn)讓方式獲得獨占許可。 C) 本項目中的側(cè)孢芽孢桿菌為我公司研發(fā)創(chuàng)新中心與南京農(nóng)業(yè)大學微生物實驗廠共同誘變篩選，項目的研 發(fā)資金由我公司全額承擔，該菌株的知識產(chǎn)權(quán)歸漳州三炬生物科技有限公司。 （二）項目主要內(nèi)容 1）關(guān)鍵技術(shù) 15 A)多功能載體生物基材料的形成，是項目的基礎(chǔ)； 由于該材料占產(chǎn)品的 80%以上的含量，所以它的成本決定了本項目產(chǎn)品的最終價格，也是決定了本產(chǎn)品的最終市場接受程度，因此，原料必需來源廣泛的有機廢棄物，這就對載體物質(zhì)的技術(shù)要求更高、更復雜； 本基質(zhì)材料必 須具備承載多種活體功能微生物的條件要求，不含有影響功能菌生存的抗生素等物質(zhì)、不含有排他性微生物代謝產(chǎn)物。因此，要求原料的降解過程是受控的，最終的產(chǎn)物是人為要求的，也就要使生物基材料達到工業(yè)發(fā)酵的結(jié)果；必須滿足功能菌正常生存的物理化學條件，如一定的 C/N，一定的營養(yǎng)結(jié)果，一定的顆?？臻g（即溶氧程度），一定的自由水 /束縛水比例等條件要求。因此，產(chǎn)物對發(fā)酵工藝技術(shù)提出了更高的要求。通過該技術(shù)培養(yǎng)出的發(fā)酵菌可達到高含菌量、高萌發(fā)率的目的。 B) 防蟲抗病菌功能的穩(wěn)定表達 防蟲抗病的功能微生物菌我們采用了淡紫擬青霉菌，該菌株來源于我司與廈門大學生命科學院聯(lián)合開發(fā)選育的菌株（見“聯(lián)合開發(fā)合同書”），該菌株能否在載體材料上得到有效的表達是本項技術(shù)的關(guān)鍵。 通過營養(yǎng)條件的改變使菌株遺傳更加穩(wěn)定，活性更強，有利孢子的萌發(fā)和對線蟲的侵染。培 養(yǎng)出具有穩(wěn)定的細胞結(jié)構(gòu)，并產(chǎn)生穩(wěn)定的芽孢多糖莢膜，這種多糖莢膜物質(zhì)它能與游離的NH4+ P5+、 K1+形成絡(luò)合物或螯合物，如下結(jié)構(gòu)： [ CH—— CH2—— CH ] n ︱ ︱ OH OH OH + [NH4 ] 1+ +H2O+｛ CH｝ n NH4（ H2O） NH4(H2O) O H O H [ CH—— CH2—— CH ] n 5+ 17 ︱ H H ︱ CH — O O — CH P5+ +〔 CH〕 n ︱ H P ︱ CH — O O — C H ∣ H ∣ OH +1 K+ +〔 CH〕 n K﹙ CH2OH﹚ n 由于這些絡(luò)合物、螯合物的形成過程是可逆性的，其可逆性的原理隨周圍的 N P5+、 K1+的含量（濃度）減少而逐步釋放出被絡(luò)合、螯合的（ NH4） +、P5+、 K1+。其次通過特殊的選擇性培養(yǎng)基工藝，篩選出與載體材料和淡紫擬青霉菌相親和的菌株，實現(xiàn)功能的穩(wěn)定發(fā)揮。采用該培養(yǎng)基培養(yǎng)出來的這兩種微生 18 物，從菌體形態(tài)和菌體數(shù)量（ 菌絲層厚而稠密 ） 來看明顯優(yōu)于一般培養(yǎng)基培養(yǎng)出來（如圖 02） 。 ⑵ 從發(fā)酵有機廢棄物的結(jié)果產(chǎn)物來分析：①、主要的產(chǎn)物是低分子多糖、 吡咯并哌嗪 2， 5二酮（ cI）、 3甲基 哌嗪 2， 5二酮 (cII)、 3羥甲基 8羥基吡咯并哌嗪 2， 5二酮（ cIII）、胸腺嘧啶（ cIV）、 3異丁基6另丁基 哌嗪 2， 5二酮 (cV)、 3異丁基 吡咯并哌嗪 2， 5二酮 (cVI)、色氨酸（ cVII）、 maricyclocin（ cVIII）（ 如 圖 03） 。 通過以上對發(fā)酵產(chǎn)物種類和數(shù)量的分析，我們采用的福建農(nóng)林大學的培 21 養(yǎng)基發(fā)明專利，培養(yǎng)出來的微生物發(fā)酵菌，來處理有機廢棄物所獲得的發(fā)酵產(chǎn)物，不但沒有存在任何的抑菌物質(zhì)，而且還含有豐富的有機營養(yǎng)物質(zhì)，是一個理想的微生物承載載體。其中 6－甲氧基柄曲菌素（ aII）， 6－二甲氧基雜色曲菌素 B (aIV)、對芐氧基苯酚（ aV） 低分子多糖、 吡咯并哌嗪 2，5二酮（ cI）、 3甲基 哌嗪 2，5二酮 (cII)、 3羥甲基 8羥基 吡 咯 并 哌嗪 2， 5二酮（ cIII）、胸腺嘧啶（ cIV）、3異丁基 6另丁基 哌嗪 2，5二酮 (cV)、 3異丁基 吡咯并哌嗪 2， 5二酮 (cVI)、色氨酸（ cVII）、 maricyclocin（ cVIII） 該載體的形成將為生物肥料及其功能性生物肥料的發(fā)展打開了技術(shù)瓶頸。 ② 采用了反滲透膜工藝 在產(chǎn)品的處理上采用了反滲透膜工藝來濃縮產(chǎn)品中孢子的濃度，使最終產(chǎn)品的濃度大大增加，進一步將膜技術(shù)應用于生物提取領(lǐng)域。 ③ 采用流加發(fā)酵工藝使功能代謝出特定抗病物質(zhì)： 通過流加工藝后， 對功能微生物的代謝產(chǎn)物對黃瓜免疫能力進行分析，結(jié)果如下圖 060708： 圖 06 側(cè)胞菌代謝產(chǎn)物 對黃瓜苯丙氨酸解氨酶的影響 圖 1117 Nd3+和牛蒡過氧化物酶活性的影響 Effect of Bacillus laterosporus Oligosaccharide on the POD activity of cucumbers fedfabcf04080120160200240CK Nd BO BO + N d苯丙氨酸解氨酶活性PAL Activity(A290/hr.g fw) F o + F odccdcabba0 . 0 00 . 2 00 . 4 00 . 6 00 . 8 01 . 0 01 . 2 0CK Nd BO B O + N d過氧化物酶活性POD Activity(A470/min.g fw) F o + F oebccdfbc daabde0. 00. 40. 81. 21. 6CK Nd BO BO + N d多酚氧化酶活性PPO Activity(A525/min.g fw) F o + F o 23 圖 08 側(cè)胞菌代謝產(chǎn)物 對黃瓜多酚氧化酶活性的影響 從上圖可以看出功能菌的代謝產(chǎn)物明顯提高了 作物免疫物質(zhì)的產(chǎn)生，對作物免疫具有重要作用。 B) 生物源有機廢棄物發(fā)酵前預處理： 生物源有機廢棄物（食用菌下角料和禽畜糞便），經(jīng)特定的切割、均質(zhì)、擠壓，實現(xiàn)物料的完全均質(zhì)，后接種入發(fā)酵菌。 D) 功能菌 的添加和產(chǎn)成品的形成： 在無菌的條件下，功能微生物 [側(cè)胞芽孢桿菌（ Bacillus laterosporus）、淡紫擬青霉（ Paecilomyceslilacinus） ]通過三維混合設(shè)備實現(xiàn)菌與載體的充分混合。 24 工藝流程圖： 原料 輔料 水 專利培養(yǎng)基 120℃ 滅菌 發(fā)酵前原液 檢測 混合調(diào) PH